최근 의약적으로 유용한 단백질을 대량 생산키 위한 실현 가능한 방법이 유전자변환 가축의 이용과 관련되어 발전되어 왔다. 이러한 유전자 변환동물은 이종의 단백질을 유즙속으로 분비시키는 생체반응기로서 이용되고 있다. 이러한 전략적 목적을 위해 현재 유전자 변환동물의 생산을 위한 이용에 있어 여러 가지 방법들이 보고되고 있다. 그러나 ES 세포의 사용이 이러한 방법들 사이에서 가장 실질적인 것으로 추정되고 있다. 본 실험에서는 유전자 구축을 위해 사람 황체 호르몬(human luteinizing hormone; hLH)의 전사를 유도하기 위해 각각 2.2 및 0.5 kb의 토끼 $\beta$-casein pronoter 단편을 이용하여 생쥐의 유선에 hLH를 발현시키도록 조절하고 발현이 thynidine kinase(TK) pronoter에 의해 좌우되는 neo 유전자를 selectable marker로서 plasnid속에 삽입하였다. 그 결과 생긴 구축 유전자는 각각 pCas 2.2와 pCas 0.5로 명명하였다. 구축된 유전자로 2$\times$107의 TT-2 ES세포를 170V, 550$\mu$F로 100$\mu$g의 선상 plasmid에 의해 electroporation 시켰다. 감염된 colony들은 250$\mu$g/$m\ell$ G418을 함유하는 ESM 배양액에서 선별 7일 이후에 회수하여 성공적으로 감염된 ES세포는 PCR 및 Southern blot에 의해 확인되었고 그들 중 나머지는 trypsin 처리 후 각각 미세조작과 공배양 기술을 사용하여 ICR 생쥐의 8세포기 수정란 속에 도입하였다. 결국 24시간 동안 37$^{\circ}C$, 5% $CO_2$에서 배양된 배반포를 chimera의 생산을 위해 위임신 유기된 G418 선발처리 이후 400 및 275개의 ES 세포 colony가 생존하였으며, 3개의 ES 세포으 colony 의 genome 속에 임의적으로 plamid가 삽입된 것을 Southern blot에 의해 확인되었다. 총 13 chimera 생쥐가 3 colony로부터 생산되었으나 germ-line chimera는 현재 조사중이다. chimera 생산빈도는 공배양 기술보다 주입방법에서 현저히 높았다.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.19
no.10
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pp.82-88
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2018
The decoy defensive weapon system is a one-shot system. Reliability is maintained through periodic inspection and high reliability is required to confirm whether or not the functioning is normal after launch. The maintenance cycle of a decoy was set up without target reliability and reliability prediction during the development period. However, the number of operations in the military has been increasing, necessitating the optimization of the maintenance cycle. Reliability is analyzed using the maintenance data of a decoy operated for several decades and the optimal maintenance cycle is suggested. In chapter 2, data collection and classification methods are presented and analysis methodology is briefly introduced. In chapter 3, the data distribution analysis and fitness verification confirmed that applying the Weibull distribution is the most suitable for the maintenance data of the decoy. In chapter 4, we present the analysis result of percentile, survival probability and MTBF and the optimal maintenance cycle was derived from the reliability analysis. Finally, we suggest the application methods for this paper in the future.
Human and animals are born with an intuitive ability to determine approximate numerosity. This ability is termed approximate number sense (hereafter, number sense). Evolutionarily, number sense is thought to be an essential ability for hunting, gathering and survival. According to previous research, children with mathematical learning disability have impaired number sense. On the other hand, individuals with more accurate number sense have higher mathematical achievement. These results support the hypothesis that number sense provides a basis for the development of mathematical cognition. Recently, researchers have been examining whether number sense training can lead to enhancement in mathematical achievement and changes in brain activity in relation to mathematical problem solving. Numerosity which basically represents discontinuous quantity is expected to be closely related to continuous quantity such as representations of space and time. A theory of magnitude (ATOM) states that processing of number, space and time is based on a common magnitude system in the posterior parietal cortex, especially the intraparietal sulcus. The present paper introduces current literature and future directions for the study of the common magnitude system.
Effects of stress on the low salinity stress were examined in the pacific abalone Haliotis discus discus. Changes in survival rate, hemolymph count, antioxidant enzyme activities (catalase: CAT and superoxide dismutase: SOD), respiratory burst activity, phenoloxidase activity, lysozyme activity and expression of heat shock protein 70 (HSP70) mRNA were measured 0, 3, 6, 12, 24 or 48hours after low salinity treatment with 25, 30, 33 and 35 psu. Survival rates of pacific abalone were 100% at 33 and 35 psu, but 93 and 97% at 25 and 30 psu for 48 hours, respectively. Hemolymph counts decreased in the time elapsed-dependent way at all of the experimental groups. At low salinity, 25 and 30 psu, SOD and CAT activity increased compared to the experimental group of 33 psu. Moreover, respiratory burst activities of the pacific abalone seemed to have no effect on low salinity stress at any experimental group. However, phenoloxidase activity is an important component of the defence against pathogen that was decreased in a reduction of salinity dependent way. Lysozyme activity also immediately reduced at 25 psu experimental group for 48 h. The HSP70 mRNA was weakly expressed at 33 psu, but strongly detectable at 25 psu experimental group. The HSP 70 mRNA expression in gill increased in the time elapsed-dependent way at 25 psu experimental group and then recovered at 48 h. These results suggest that low salinity stress give rise to inhibitory action of immune system as a result of the decrease of phenoloxidase and lysozyme activity in the pacific abalone, especially.
Effects of the combinations of six oxygen concentrations ($control, 0.6, 1.0, 2.0, 3.4 and 7.4 mg DO/l$) and two salinity levels ($20{\%_{\circ}} and 32{\%_{\circ}}$) on the rates of oxygen consumption, ammonia excretion and mortality of the mysid, Neomysis awatschensis were tested at $20{\circ}C$. The lethal level ($96 hr-LC-(50)$) of dissolved oxygen for mysid at $20{\%_{\circ}} and 32{\%_{\circ}} were 2,20 mg DO/l and 1.60 mg DO/l$ respectively, and all mysids died within $24hr at 0.6 mg DO/l$. Oxygen consumption rate of mysid was increased with dissolved oxygen increase at $20{\%_{\circ}} and 32{\%_{\circ}}$, but ammonia excretion rate was high af $1.0 mg DO/l$ during 96h exposure to DO concentration, and significantly greater in $20{\%_{\circ}} than 32{\%_{\circ}}$. $O:N$ ratio of mysid exposed during 96hr with salinity anil dissolved oxygen was below $10 at 20{\%_{\circ}} and 1,0{\~}2.0 mg DO/l, and was 4.4 at 32{\%_{\circ}} and 1.0 mg DO/l$. These results indicated that mysids were capable of changing their energy substrate in response to salinity and DO changes, and obtaining energy from proteins.
The present study examined the effect of the dietary administration of a halophilic bacterium Bacillus sp. Mk22 on the growth improvement of black tiger shrimp, Penaeus monodon, and reduced shrimp infection by Vibrio parahaemolyticus and white spot syndrome virus (WSSV). The shrimp were fed 45 days using three experimental diets: no addition (control), commercial probiotic, and Bacillus sp. Mk22. The shrimp treated with the halophilic bacterium Mk22 showed a significant improvement of growth (7.1 ± 0.21 g), survival (94.3 ± 0.58%), weight gain (178 ± 4.93 g), and reduced feed conversion rate (0.8 ± 0.03 g) compared with the shrimp in the other groups. The shrimp treated with Bacillus sp. Mk22 also showed a lower Vibrio count (0.02 ± 0.01 × 102 CFU/ml) in the shrimp culture water compared with the other groups. The shrimp in the three groups were challenged with either Vibrio or WSSV. For the Vibrio infection, no mortality was observed from water infection or oral feeding infection in the commercial probiotic group and Mk 22 group. For the WSSV infection, a 68% survival rate from water infection and 20% survival rate from oral feeding infection was observed on day 45 in the Mk22 group, while 100% mortalities were recorded at a much earlier time in both the control and commercial probiotic groups. The antioxidant enzyme activities, indicators of oxidative stress, such as catalase and superoxide dismutase, significantly decreased in both the Vibrio and WSSV-infected Mk22 groups compared with the other groups, indicating that Bacillus sp. Mk22 was effective in reducing oxidative stress, possibly due to the reduced infection.
Baeck, Gun Wook;Huh, Sung-Hoi;Park, Joo Myun;Pack, Se Chang
Korean Journal of Ichthyology
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v.19
no.4
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pp.318-323
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2007
The feeding habits of Pacific cod (Gadus macrocephalus) were studied based on the examination of stomach contents of 192 specimens collected from November, 2005 to January, 2006 in the coastal waters off Gadeok-do, Korea. The size of Pacific cod ranged from 35 to 82 cm in standard length (SL). Pacific cod mainly consumed shrimps such as Eualus spathulirostris, Crogon hakodatei and C. affinis and fishes. Its diet also included small quantities of cephalopods, amphipods, hermit crabs and crabs. Individuals between 35 cm and 45 cm SL mainly consumed shrimps. The portion of shrimps decreased with increasing fish size, and this decrease was paralleled with increased consumption of fishes and cephalopods. In this study we found Syngnathus schlegeli in the stomach contents of many Pacific cod specimens. S. schlegeli is a typical seagrass fish species which inhabits in seagrass beds, This fact means that Pacific cods stay in the seagrass beds during spawning period. Therefore migration of Pacific cod to coastal waters off Gadeok-do during spawning period seems to be a survival strategy for its larvae and small juveniles to stay in seagrass beds which provide with abundant foods and shelters to many commercial fish species.
Optimum concentration of alizarine complexone (ALC) for staining of otoliths for Pacific cod was determined by examination of stained quality, growth and survival rates. Small juveniles ($34.1{\pm}1.8mm$ TL, $mean{\pm}SD$) were immersed in four different concentrations (20, 40, 60, 80 mg/L) and large ones ($73.8{\pm}1.2mm$ TL, $mean{\pm}SD$) in five different concentrations (1, 5, 10, 20, 40 mg/L) of ALC for 24 hrs. The fish were then reared and observed for 14 days. The stained quality of otoliths was evaluated by dividing them into four grades by the presence of fluorescent stains on the otoliths under G-excited UV light. The small juveniles stained with the different ALC concentrations had 100% staining success, and their growth rate and body weight did not differ significantly between treatments. Optimal ALC concentration for the smaller juveniles was 20 mg/L in the present experiment. On the other hand, distinct fluorescent rings were confirmed on otoliths of larger juveniles in the 10 mg/L treatment with high survival rate. These results suggest that ALC staining at concentrations of 10 mg/L with larger juveniles will be helpful for release-recapture experiments for stock enhancement of Pacific cod.
Lactacystin, a microbial natural product synthesized by Streptomyces, has been commonly used as a selective proteasome inhibitor in many studies. Proteasome inhibitors is known to be preventing the proliferation of cancer cells in vivo as well as in vitro. Furthermore, proteasome inhibitors, as single or combined with other anticancer agents, are suggested as a new class of potential anticancer agents. This study was undertaken to examine in vitro effects of cytotoxicity and growth inhibition, and the molecular mechanism underlying induction of apoptosis in SCC25 human tongue sqaumous cell carcinoma cell line treated with lactacystin. The viability of SCC25 cells, human normal keratinocytes (HaCaT cells) and human gingiva fibroblasts (HGF-1 cells), and the growth inhibition of SCC25 cells were assessed by MTT assay and clonogenic assay respectively. The hoechst staining, hemacolor staining and TUNEL staining were conducted to observe SCC25 cells undergoing apoptosis. SCC25 cells were treated with lactacystin, and Western blotting, immunocytochemistry, confocal microscopy, FAScan flow cytometry, MMP activity, and proteasome activity were performed. Lactacystin treatment of SCC25 cells resulted in a time- and does-dependent decrease of cell viability and a does-dependent inhibition of cell growth, and induced apoptotic cell death. Interestingly, lactacytin remarkably revealed cytotoxicity in SCC25 cells but not normal cells. And tested SCC25 cells showed several lines of apoptotic manifestation such as nuclear condensation, DNA fragmentation, the reduction of MMP and proteasome activity, the decrease of DNA contents, the release of cytochrome c into cytosol, the translocation of AIF and DFF40 (CAD) onto nuclei, the up-regulation of Bax, and the activation of caspase-7, caspase-3, PARP, lamin A/C and DFF45 (ICAD). Flow cytometric analysis revealed that lactacystin resulted in G1 arrest in cell cycle progression which was associated with up-regulation in the protein expression of CDK inhibitors, $p21^{WAF1/CIP1}$ and $p27^{KIP1}$. We presented data indicating that lactacystin induces G1 cell cycle arrest and apoptois via proteasome, mitochondria and caspase pathway in SCC25 cells. Therefore our data provide the possibility that lactacystin could be as a novel therapeutic strategy for human tongue squamous cell carcinoma.
Remarkable effect of pain relief and prevention of the postoperative Complications after thoracotomy has been achieved by continuous intravenous analgesia. This study was carried out with thirty patients who underwent posterolateral thoraco tony. The patients were divided into three groups: Group I(n= 10), the patients with intermittent intramuscular analgesia(piroxicam 20 mg), Group II(n=10), the patients with continuous epidural analgesia(0.5% bupivacaine 30m1 + normal saline 30 ml + morphine 10 mg), and Group III(n= 10) the patients with controlled intravenous infusion of analgesics(fentanyl 2500 mfg +normal saline 10 ml). The results w re as follows; 1) There were no significant changes of vital signs, between groups. 2) Tidal volume and FVC were significantly improved in the group II and III compared with the group I during the first postoperative day. 3) A significant reduction of immediate post-thoracotomy pain was achieved in the group II and III compared with the group I. 4) The limitation of motion in the operative side was less in the group II and III compared with the group I. 5) A signi(icant reduction of the postoperative analgegics consumption was noticed in group II and III. 6) Significant complications were not occured during follow-up period in all groups.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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