이상 방사면역측정(放射免疫測定)의 기본원리(基本原理), 순수(純粹)한 항원(抗原), 표지항원(標識抗原), 항체생성(抗體生成), 표준곡선(表準曲線)의 작성(作成), 항원항체복합체(抗原抗體複合體)의 분리방법(分離方法)에 대(對)하여 설명(說明)하였다. 생물학적방법(生物學的方法),화학적방법(化學的方法), 기계적(機械的)인 측정방법(測定方法)에 의(依)해 생체내(生體內)의 미량(微量)으로 존재(存在)하고 있는 물질(物質)들을 정확(正確)하게 측정(測定)할 수 없다. 그러나 방사면역측정법(放射免疫測定法)에 의(依)해 쉽게 측정(測定)되어 기관(器管)의 기능검사(機能檢査)는 물론(勿論) 각(各) 기관(器管)과의 상관관계(相關關係)를 분석(分析)하여 질병(疾病)의 진단(診斷), 치료경과(治療經過)을 평가(評價)하는데 매우 중요(重要)한 정보(情報)를 제공(提供)해주고 있다. 이러한 점(點)을 고려(考慮)하여 이 방법(方法)을 잘 습득(習得)하고 진료(診療)의 수단(手段)으로 널리 이용(利用)되어 의료기술발전(醫療技術發展)에 토대(土臺)가 되기를 바란다.
면역측정법의 주요 발전 단계를 3가지로 구분한다. 즉 첫 발전 단계(제 1세대)는 방사성 호르몬(방사선 추적자, radiolabeled analyte marker)을 이용한 길항적 측정방법의 개발과 보급이다. 두 번째(제 2세대)는 단가 항체(monoclonal antibody, McAb)를 추적자로 만들고, 비방사성 표지자를 이용하여 비경쟁적 초감도의 측정방법이 면역진단 분야에 적용되는 단계이다. 세 번째(제 3세대)의 발전은 최소량화, 칩을 이용하는(chip-based) microarray의 방법을 응용하여, 한 시료에서 여러 가지 생리활성물질 즉 호르몬의 동태를 파악하는 초감도 다변량분석법(simultaneous ultrasensitive measurement)이 개발되고 보급되는 단계라 할 수 있다. 제 1세대의 방사면역측정법(radioimmunoassay, RIA)을 거쳐 제 2세대 비방사면역측정법(non-isotopic immunoassay methods, NIA)이 모두 장 단점이 비교되고, 각각의 특수성을 가진 측정법이 정립되고, 시장에서의 우열이 정리되고 있는 시점이다. 이미 제 3세대(Chip/microarray-based multianalyte ligand assays)가 매우 빠르게 개발되고 있어 새로운 전환기를 맞고 있다고 판단된다. 그러나 본 종설에서는 일차로 제 2세대를 정리하고, 이어 새로운 전환점의 측정법을 소개하고자 한다.
Preliminary studies on the measurement of the free thyroxine in the serum with Amerlex $FT_{4}$ RIA kit were investigated using a tracer as $^{125}I-T_{4}$ derivative which is not almostly bound to thyroxine binding globulin, etc. The results are followed: 1. Linearity was tested on standards at various concentrations, and reproducibility and accuracy was excellent. 2. The antibody specificity is also excellent, and standard calibration curve of total $T_{4}$ was similar that of adding the TBG inhibitor. 3. Each value of $T_{4}$ in serum (the normal group, the hypothyroidism patients the pregnant women and the TBG dificiency patients) was not significant. As mentioned above, this method is more simple and rapid, compared to the other method.
계란의 방사선 조사 여부를 효소면역 측정법에 의해 판별 가능한지를 검토하기 위해, 방사선에 대해 가장 민감한 것으로 알려진 오브알부민의 항 오브알부민 19G에 대한 반응성을 경합효소면역측정법 (cELISA)에 의해 검토하였다. 계란은 난각이 있는 상태에서 조사선량은 0~7 kGy로 조사하였다. 항 오브알부민 IgG에 대한 오브알부민의 반응성은 조사선량이 증가함에 따라 감소하였는데, 감소 정도는 조사선량 의존적으로 변화되어 7 kGy에서 가장 크게 감소하였다. 방사선 조사에 의한 반응성감소 정도는 1.5배 (0.5 kGy)~3.7배 (7 kGy)이었다. 가장 조사선량이 낮은 0.5 kGy에서도 반응성의 감소가 측정 가능했기 때문에 cELISA는 저선량 조사된 계란의 검출에 유용한 방법으로 사용될 수 있을 것으로 사료된다. 방사선 조사에 의한 오브알부민의 반응성 감소는 오브알부민의 부분적 분해에 의해 구조적 변화가 일어났기 때문으로 사료된다.
수놈 흰쥐를 1.0, 2.0, 3.0, 5.0 및 7.0 Gy 선량으로 전신 조사하였으며 조사 후 48, 72, 96시간과 216시간 경과 후 혈액을 채취하였다. 혈액 내 ceruloplasmin을 측정하여 선량반응곡선을 완성하기 위하여 항원고정 방식의 경쟁적 효소면역측정법을 사용하였다. Ceruloplasmin의 정제는 turpentine을 주사한 수놈 흰쥐의 혈액을 사용하였다. Ceruloplasmin의 흡착효율은 50 mM carbonate/bicarbonate buffer, pH 9.6보다 10 mM Tris-HCI, 150 mM sodium chloride, pH 7.4에서 더 효과적이었으며 정량을 위한 적정한 ceruleplasmin의 흡착범위는 well 당 $70{\sim}140ng$이었다. Ceruloplasmin은 피폭 후 $72{\sim}96$시간에서 최대농도를 보였으며 피폭 후 96시간에서 최대값을 지니는 선량반응관계를 보였다. Cerulplasmin은 피폭 후 216시간에서도 피폭이전의 농도로 회복되지 않았다. 0.1 Gy로 피폭된 경우에도 ceruloplasmin의 농도는 피폭 후 $72{\sim}96$시간에서 최대로 증가하였으며 단백질의 농도는 대조군과 유의성 있는 변화를 관찰할 수 있었다. Cerulplasmin은 방사선피폭 후 변화하는 중요한 급성반응물질중의 하나로 밝혀졌으며 방사선방호를 위한 유전자 발현 및 조절에 관할 연구가 필요하다.
Studies on the clinical significance with Amerlex $FT_{4}$ RIA kit observing the determination of $FT_{4}$ were investigated using a tracer as $^{125}I-T_{4}$ derivative which is not almostly bound to thyroxine binding globulin, etc. The results are followed; 1. $FT_{4}$ value($1,55{\pm}0.38ng/100ml$) of normal group was not accorded that of hyperthyroidism with Amerlex $FT_{4}$ RIA kit, and was higher than that of hypothyroidism. 2. $FT_{4}$ value was lower level in chronic-kidney disfunction syndrome whereas, it was normal in a cancer patient, a woman in pregnancy and a patient in TBG disfunction. 3. The value of this method is a good corelationship at that of equilibrium dialysis method. (r=0.931) 4. $FT_{4}$ value by this kit was linear relationship to those of the other kit (Gamma Coat and Liquisol), and the normal value of each methods was also similar. As mentioned above, this method is more simple and rapid, compared to the other method. Therefore, it was thought that this method is a very useful clinically.
뇌낭미충증환자 혈청 및 뇌척수액의 특이 IgG 항체가를 면역효소측정 법으로 측정하였을 때에 이 혈청학적 진단법이 환자진단에 얼마나 유용한지를 평가하였다. 1984년 1월부터 1986년 1월까지 주로 신경학적 중상을 나타낸 환자 355명에서 혈청 및 뇌척수액을 검사하였다. 면역효소측정법에 사용한 항원은 돼지에 자연감염된 유구낭미충의 낭액이며 단백질 농도 $2.5{\mu}g/ml$로 희석하여 사용하였고, 혈청은 1 : 100으로 희석하여, 뇌척수액은 희석하지 않고 반응시켰고 Perozidase-Conjugated Antihuman IgG goat serum(Cappel 회사제품)을 1 : 5,000으로 사용하여 혈청 및 뇌척수액내 유구낭미충 특이 IgG 항체가를 흡광도로 표시하였다. 흡광도 0.18 또는 그 이상을 양성으로 판정하였다. 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 대상자 355명중 신경외과 수술 및 병리학적 소견으로 확진된 뇌낭미충증 환자 26명, 피하결절 생검에서 낭미충증을 진단하였고 뇌전산화 단충촬영으로 확진한 환자 24명, 뇌전산화 단층환영으로 확진한 21명등 71명에서 면역효소측정법에 의한 특이 IgG항체가 양성자는 64명으로 민감도는 90.1%이었다. 그 중 혈청의 검사에 의한 민감도는 77.5%, 뇌척수액 검사에 의한 민감도는 83.1%로서 뇌척수액 검사가 더 민감한 소견이었다. 뇌낭미충증으로 확진된 환자중 위음성자는 특이 IgG 항체가가 대단히 낮은 예가 대부분이었다. 2. 대상자 355명중 뇌낭미충중 이외의 질환으로 확진된 환자는 52명으로서 그중 7례는 신경외과 수술 및 병리학적 소견에 근거하여 기타 질환으로 확진된 예이며 45례는 세균학적, 방사선학적 소견등을 근거로 기타 질환으로 확진된 예이었다. 이들 중 뇌낭미충 특이항체 검사에서 음성을 보인 예는 46례로서 이 검사의 특이도는 88.5%이었다. 혈청 및 뇌척수액검사에 의한 특이도는 카각 94.2%이었다. 위 양성반응을 보인 예 중에서 혈청 및 뇌척수액에서 모두 양성인 예는 없었다. 3. 혈청내 특이 IgG 항체 검사에 의한 기타 기생충감염자에서의 교차반응의 정도는 다음과 같았다. 무구조충증 18례중 2례, 스파르가눔증 20례중 2례, 폐흡충증 56례중 1례, 간흡충증 15례중 1례, 간질(간질)증 1례중 1례등이 교차반응을 나타내었다. 뇌척수액내 특이 IgG 함체 검사에 의한 교차반응을 뇌폐흡충증 환자 9례 중에는 없었으나 뇌스파르가눔중 환자 10례중 2례는 교차반응을 보였다. 뇌낭미충증으로 확진된 71례중 폐흡충항원에 대해 교차반응을 보인 예는 없었으나 스파르가눔 항원에 대해서는 혈청으로 검사했을 경우 6례, 뇌척수액의 경우 11례에서 교차반응을 나타내었다. 4. 뇌압상승이 있는 뇌낭미충증환자 예에서 뇌실조영술이나 뇌실복막강 단락술 도중 얻은 측뇌실 뇌척수액으로 낭미충 특이 IgG 항체가를 측정하면 측뇌실에 병변이 있지 않는 한 음성 또는 낮은 양성림위의 홉광도를 보이고 있었다. 5. 포도낭미충증 환자 4례중 혈청검사로는 4례중 3례가, 뇌척수액검사로는 검사한 3례 모두가 양성반응을 보였다. 이상의 결과는 혈청 및 뇌척수액내 특이 IgG 항체를 면역효소 측정 법으로 측정하는 혈청학적 진단법이 뇌낭미충증 환자의 감별진단에 매우 유용함을 보이고 있다.
검정금파리의 변태에 따른 엑디스테로이드를 Radioimmunoassay법으로 측정하고, 난세포성숙에 미치는 엑디스테로이드의 효과를 조사하여 얻을 결과는 다음과 같다. 산락직후 존재하였던 난내 엑디스테로이드는 발생과정 중 감소하다가 부화 직전 다시 증가하였으며, 유충기와 용기의 성장 변태시 엑디스테로이드함량의 변화를 보면 유충-유충과 유충-용으로의 탈피시에 일시적인 증가현상을 나타냈다. 특히 용화 후 48시간에 높은 엑디스테로이드의 농도를 보였는데 이는 큐티클분비와 경화작용과 밀접한 관계가 있는 것으로 생각된다. 성충기에서는 수컷의 경우 엑디스테로이드가 거의 검출 되지 않은 반면, 암컷에서는 단백질원 섭식 후 96시간에 최고의 함량을 나타내어 난성숙도와 일치하는 변화를 보였다. 엑디스테로이드 처리와 난성숙도와의 관계를 보면, 1$\mu$g 처리군은 대조군에서와 같은 성숙도를 나타내 차이를 보이지 않았으나, 5$\mu$g처리군에서는 대조군에서 보다 12시간 빠르게 난세포성숙이 완료되어, 엑디스테로이드 처리시 임계농도 이상에서는 난세포조기성숙에 직접적인 영향을 미치는 것으로 나타났다.
강원도 홍천에 거주하는 56세 구부가 갑자기 우상부 복통 고열 오한을 주소로 내원하였고 복 꾸 초음파검사와 콤퓨터단층촬영 결과 2-3 cm 직경의 불규칙한 꼴의 동공이 간 우엽에서 여러개 관찰되었다. 간생검상 샤르코-라이덴 결정을 포함한 심한 중심성 괴사 주위로 조직구. 호산구등 염 증세포가 침윤되어 주위 조직과 명확히 구분되었다. 효소면역측정법을 이총한 간질 특이 항체 혈청 걸사에서 양성이었다. 간 병변은 프라지관텔 투약 6개웍 후에 모두 사라졌으나. 특이 항체가와 호산구 증가는 투약 6개월 16개월 후에도 정상화 되지 않았다. 방사선학적 소견 조직병리학 소견 및 혈청학 검사 결과를 종합할 때. 초기 침습성 간질증으로 진단하였으며 프라지콴텔에 의하여 치료되지 않은 예이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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