• 제목/요약/키워드: virus titer

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Newcastle병(病)의 예방접종(豫防接種)에 관한 연구(硏究); 사독(死毒)백신 및 감독(減毒)된 생독(生毒)백신에 대한 면역학적(免疫學的) 반응(反應) (A STUDY ON NEWCASTLE DISEASE VACCINATION: The Immunological Response to Inactivated and Attenuated Virus Vaccines)

  • 정길택
    • 대한수의학회지
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    • 제2권1호
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    • pp.27-36
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    • 1962
  • 필자(筆者)는 한국(韓國)에 특(特)히 많이 유행(流行)하고 있는 가계(家鷄)의 유행병(流行病)인 Newcastle discase에 착안(着眼)하였다. 예방방법(豫防方法)으로서 종래(從來) 사용(使用)된 Forinalin-inactivated vaccine은 수산화(水酸化) "알미늄 젤"을 부가(賦加)하므로서 근육내주사방법(筋肉內注射方法)으로 사용(使用)할수 있게되어 사용방법(使用方法)이 비교적(比較的) 편리(便利)하게 되었으나 그 면역효과(免疫效果)에 대(對)하여서는 아직 이론(異論)이 있으므로 Hitcher등(等)이 제창(提唱)한 Attenuated Vaccine에 대(對)하여 더 흥미(興味)를 가지게 되었다. 특(特)히 이와같은 생독(生毒) Vaccine은 닭의 age에 차별(差別)없이 독력(毒力)이 거의 없을뿐만 아니라 경비적(經鼻的)으로 대단(大端)히 간이(簡易)한 방법(方法)으로도 투여(投與)할수 있고 고도(高度)의 면역(免疫)을 장기간(長期間) 부여(賦與)할수 있는 점(點)을 들어 기(其) 실용성(實用性)을 주목(注目)하게 되었다. 그러나 vaccine투여방법(投與方法)은 기면역율(其免疫率)과 vaccine투여(投與)로 인(因)한 손실(損失)을 좌우(左右)하게 되므로 중요(重要)한 연구과제(硏究課題)임을 인정(認定)하고 급수법(給水法)을 채택(採擇)하여 일정량(一定量)의 vaccine을 투여(投與)한후(後) 면역항체(免疫抗體)의 출현(出現)을 혈구응집조지항체(血球凝集阻止抗體)와 강독방어능력(强毒防禦能力)을 관찰(觀察)하여 구체적방법(具體的方法)을 검토(檢討)하려 하였다. 먼저 생독(生毒)vaccine으로 사용(使用)한 Lasota strain과 사독(死毒)으로 사용(使用)한 서울주(株)를 각각 $10^{-1}$에서 $10^{-11}$까지 희석(稀釋)하여 9일란(日卵)의 Allantoic Cavity로 접종(接種)하여 60시간(時間)이 경과(經過)한 후(後) Allantoic fluia를 채취(採取)하여 비교(比較)한 결과(結果) 서울주(株)는 $10^8MLD/ml$, $10^{9.6}LD_{50}/ml$였고 Lasota strain은 $10^9MID/ml$, $10^{10.5}ID_{50}/ml$였다. Formalin-mactivated Vaccine을 만들기 위(爲)하여 서울주(株)로 감염치사(感染致死)된 계태아(鷄胎兒), 양뇨막(羊尿膜), 요수등(尿水等)의 혼합유제(混合乳劑)에 Formaldehy를 1% 가(加)하여 48시간후(時間後)에 4배(四倍)의 생리식염수(生理食鹽水)를 가(加)하고 이 혼합물(混合物) 100ml에 4% "알미늄 젤"을 20ml.의 비(比)로 가(加)하여 Inactivation Test (9일(日)에 난접종(卵接種)) 및 Sterility Test(Thioglycollate Medium에 접종(接種))를 한 결과(結果) 완전(完全)히 inactivation 되었고 무균상태(無菌狀態)임을 인정(認定)한 후(後) 사용(使用)하였다. Attenuated Vaccine을 만들기 위(爲)하여는 Lasota strain을 9일란(日卵)의 Allantaic carity로 접종(接種)하여 3일간(日間) 발육(發育)케 한 후(後) Allantoic fluid를 채취(採取)하여 Allantoic fluid 100ml.에 탈지유(脫脂乳) 4ml.의 비(比)로 가(加)하여 2.5ml.식(式) 분주(分注)한 후(後) 냉동건조(冷凍乾燥)하여 $4^{\circ}C$에 보관(保管)하였다. 오개월팔일령(五個月八日齡)의 백색(白色)레구흥 200수(首)를 100수식(首式) 2군(二群)으로 나누어 각각(各各) 사독(死毒) Vaccine (1ml.I.M.) 및 생독(生毒) Vaccine (1 : 400, 10ml 경구(經口))을 투여(投與)한 후(後) 105일간(日間) 관찰(觀察)한 결과(結果) : 1. 사독(死毒) Vaccine은 HI항체(抗體)나 감염방어작용(感染防禦作用)이 105일간(日間)의 실험기간 동안 모두 고도(高度)로 유지(維持)되었다. 2. 생독(生毒) Vaccine은 감염방어작용(感染防禦作用)은 완전(完全)히 유지(維持)되었으나 HI항체(抗體)는 75일(日)까지 고도(高度)로 유지(維持)되었으나 75일후(日後)에는 약간(若干) 저하(低下)되었다. 3. 급수(給水)에 타서 경구적(經口的)으로 투여(投與)하는 생독예방접종(生毒豫防接種)은 면역기간(免疫期間)이 사독예방접종(死毒豫防接種)에 비(比)해 약간 짧은듯 싶지만 그접종방법(接種方法)이 대단히 간단하며 시간(時間)도 짧게 걸린다.

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국내 산란계의 주요 전염성 질병에 대한 혈청학적 모니터링 (Serological Monitoring of Major Infectious Diseases in the Domestic Layers)

  • 민봉철;;김강산;김태식;손주성;모인필
    • 한국가금학회지
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    • 제46권4호
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    • pp.235-247
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    • 2019
  • 본 연구에서는 국내 산란계의 주요 질병에 대한 면역상태 및 역가수준을 파악하기 위해 2015년부터 2017년까지 3년간 충북대 수의과대학 조류질병학 실험실에 의뢰된 산란계의 혈청을 성장기와 산란기를 고려하여 주령별로 구분하여 분석하였고, 계절에 따른 검사결과를 분석하였다. 검사대상 질병은 검사 의뢰건 수가 많고, 혈청검사 결과가 유의미한 질병인 LPAI, ND, IB, aMPV, EDS'76, IBD, CIA, MS로 한정하였다. AI와 ND의 경우 전체적인 GMT, CV의 양상은 비슷하게 진행되었다. 반면 LPAI의 경우 주령별 계군양성율이 불균일하고 편차가 최대 약 50%의 큰 차이를 보였지만 ND의 경우 균일한 양성률을 보이며 편차는 2% 미만으로 낮게 확인되었다. 또한, 전체적인 GMT 역시 LPAI가 ND에 비하여 낮게 형성됨을 확인하였다. 이는 각 질병의 특성과 백신접종의 차이에 따른 결과로 판단된다. IB는 음성계군과 전체계군을 비교할 때 전체 계군의 역가수준이 전반적으로 높았고, CV값은 낮은 경향을 확인할 수 있었으며, 이를 통해 야외 IB virus의 노출을 추정할 수 있었다. aMPV는 2011년에 백신 출시 이후 과거에 비해 높은 항체양성률과 GMT역가 상승을 확인할 수 있었다. EDS'76은 전주령 구간 균일한 역가분포를 나타내었고, 백신에 의한 역가형성을 확인할 수 있었다. IBD는 0~1.5주령의 어린 일령에서 전반적인 IBD 모체이행항체가 높은 수준의 양성률을 보였고 3주령 이후 높게 형성되는 양성률이 모체이행항체수준을 높이는 것으로 추정되고, 향후 지속적인 혈청학적 모니터링이 진행되어야 하겠다. MS는 2017년 백신 출시 이후 양성률과 역가가 높게 나타나는 결과를 보였지만 의뢰건 수가 적고 백신 도입 초기이기 때문에 지속적인 모니터링이 필요하다.

베로 세포에서 생산된 2세대 일본뇌염 백신의 마우스에서의 면역원성 (The Immune Response of Mice Vaccinated with Japanese Encephalitis Vaccine, CJ50003 Produced in Vero Cells)

  • 문상범;홍선표;김달현;김수옥;유왕돈;강재구
    • 미생물학회지
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    • 제35권1호
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    • pp.82-88
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    • 1999
  • 베로 세포에 적응시켜 개발된 약독화 일본뇌염 바이러스인 CJ5003 주를 이용해 제조된 새로운 2세대 일본뇌염 백신의 효과를 마우스에서 조사하였다. Adjuvant 로 aluminiu hydroxide gel을 사용한 경우, 그렇지 않은 경우에 비해 높은 일본뇌염 바이러스 특이 항체 유도능과 10배 향상된 중화항체 유도능을 보였으며, 항원의 양을 변화시켜 면역시킨 결과 0.5 ng 의 적은 항원양으로도 항체가 유발되었고 방어 가능한 수준인 1:10 이상의 중화항체가 유지되었다. 500ng의 항원양으로 면역된 마우스를 면역 초기부터 24주간 관찰한 결과 중화항체가가 14주까지 1:200 이상으로 계속 유지되었으며 24주에도 1:160을 유지하여 일본뇌염에 대한 방어효력이 장기간 유지되고 있음을 나타냈다. 또한 면역된 마우스 혈청은 Nakayama-NIH, SA14, P3 등 3종의 신경독성 일본뇌염 바이러스주에 대해서 각각 유사한 수준의 일본뇌염 바이러스 특이 항체가를 보여주어 다양한 일본뇌염 바이러스 주에 대한 방어 가능성을 보여주었다. 마우스를 이용한 뇌내 직접 공격 시험결과, CJ5003 후보 백신은 90% 이상의 높은 생존율을 나타냈다. 이상의 in vitro, in vivo 시험 결과는 베로 세포에서 생산된 CJ5003 후보 백신의 차세대 백신으로 개발 가능성을 시사한다.

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산란후기 사료 내 가수분해 효모의 첨가 급여가 생산성과 계란 품질에 미치는 영향 (Effects of Dietary Hydrolyzed Yeast on Egg Production and Egg Quality during Late Phase of Laying Hens)

  • 정재용;김관응;이형호;양회창;김은집;안병기
    • 한국가금학회지
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    • 제48권4호
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    • pp.169-176
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    • 2021
  • 본 실험은 산란후기의 공시계에서 가수분해 효모의 수준별 급여를 통해 난 생산성과 난질을 평가하고 평가된 데이터를 기본으로 하여 보조사료적 가치를 검토하기 위하여 수행하였다. 58주령 하이라인 실용 갈색계 총 180수를 공시하여 3개 처리에 6반복 반복당 10수를 임의배치 하였고 가수분해 효모를 0, 0.1 및 0.2% 수준으로 첨가한 실험사료를 8주간 급여하였다. 첫 전기 4주간의 산란율과 일산란량에서는 처리간에 큰 차이가 없었으나, 후기 4주간 동안 대조구에 비하여 가수분해 효모를 첨가한 실험구의 산란율과 일산란량이 유의하게 높은 것으로 나타났다(P<0.05). 난중은 처리간에 큰 차이가 없었다. 전체 실험기간 중의 난각강도와 난각두께는 가수분해 효모 첨가구에서 유의하게 높은 결과가 관찰되었다(P<0.05). 호우유니트에서는 처리간에 차이가 없었으나 난황색은 가수분해 효모 0.1% 첨가구에서 대조구에 비하여 유의하게 높았다(P<0.05). 난각 미세구조에서 유두층은 가수분해 효모 급여에 따라 선형적으로 증가하는 결과가 관찰되었다(P<0.05). 가수분해 효모 0.2% 첨가구에서 가금 인플루엔자 바이러스에 대한 항체역가가 유의하게 증가하였다(P<0.05). 결론적으로 가수분해 효모의 첨가 급여에 의해 산란후기의 난 생산성이 부분적으로 개선되었고, 난질 및 난각질이 유의하게 향상됨으로서 산란계의 후기 생산단계에 효과적으로 적용할 수 있음이 시사되었다.

서울지역에서 문제되고 있는 강아지의 급성설사증에 관한 병인학적 연구 (Etiologic Survey on the Acute Diarrhea of Puppies in Seoul)

  • 한홍율;박희명;이진희;오태호;정순욱;윤신근;박철만
    • 한국임상수의학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.171-184
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    • 1993
  • In Seoul area, there are so many kennel clubs, veterinary hospital, pet establishment and breeding confers that various problems have occurred. They are crowed pet houses, poor sanitation, stress to puppies, sudden environmental changes to puppies and unvaccination against parvovirus, canine distemper virus, parainfluenza virus, infectious hepatitis caused by Adenovirus type I and Leptospira. Several studies were made to survey the infectious agents involved in acute diarrhea of poppies in Seoul are, such as history taking, physical examination, complete blood count and serum chemistry, histopathological finding, bacterial isolation and identification, and hemagglutination test in feces and hemagglutination inhibition test in serum against parvovirus, respectively. The results obtained are summarized as followed. 1. The percent of PCV (30.5$\pm$5.6) and concentration of Total protein(5.0$\pm$0.8) resulted from statistical analysis are significantly lower than normal values (p<0.05), respectively. In addition, fibrinogen (505$\pm$326) was significantly higher an normal value (p<0.001), Band neutrophil (22.9$\pm$12.7) showed signifiant difference (P<0.01). decreased monocyte (3.2$\pm$2.1) and eosinophil (0.7$\pm$0.8) values appeared statistically significant (p<0.001), lymphocyte (16.7$\pm$9), as well. 2. The concentrations of calcium .(8.0$\pm$2.8), glucose (40.1$\pm$31.4), and albumin (2.0$\pm$0.39) were lower than normal values (p<0.01, p<0.01, p<0.001), respectively. Also Inorganic phosphate (7.1$\pm$2.4), pH (p<7.9f:0.2), and Blood Urea Nitrogen (40.41=37.1) were significantly higher than normal values (p<0.001, p(0.001, p<0.05), respectively. 3. Simple and mixed infections occupied 18% and 82% in the distribution of causes in puppies with acute diarrhea, respectively. 4. As puppies got older, incidence of acute diarrhea caused by Staphylococcus aureus was decreased to 13% and infection of canine distemper virus was increased to 53%, but E coli and canine parvovirus always showed high frequency of outbreak in the body weight ranged from 35g to 7.8Kg. 5. As showed in table 5, infections of E coli and Canine Parvovirus showed high outbreak regardless of the age which is classified into three stages, 35~50 day, 60 day and 75~day to 1 year, canine distemper virus appeared increased, but in case of Staphylococcus aureus, visa versa. 6. In comparison wi methods for the laboratory diagnosis diagnosis parvovirus, Hemagglutination test showed positive reaction in 25% and mean serum antibody titer measured by Hemagglutination inhibition test showed 2779 (n=20). In addition, positive reaction was 90% (18/20). 7. In histopathological studies, enteritic and pneumonic lesions were indicated in 53.7% and 39.5% of samples, respectively. 8. Etiologic diagnosis based on the history taking, clinical signs and histopathological findings in puppies with acute diarrhea and vomiting indicated that 50% of puppies were infected by canine parvovirus and distemper virus. 9. In the parasitological examination made by simple flotation with saturated zinc sulfate tour parasites found were Isospora canis, Toxocara canis, Ancylostoma spp and Toxocara spp. Isospora canis and Toxocara canis were more frequently found among those parasites of diarrhoeic causes in puppies ranged from 35 days to 1 year. Their infestation rates were 15% and 13% respectively.

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Butyrate가 Adenoviral Vector로 이입한 Herpes Simplex Virus Thymidine Kinase 유전자치료에 미치는 영향 (Effect of Butyrate on Adenovirus-Mediated Herpes Simplex Virus Thymidine Kinase Gene Therapy)

  • 박재용;김정란;장희진;김창호;박재호;정태훈
    • Tuberculosis and Respiratory Diseases
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    • 제45권3호
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    • pp.587-595
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    • 1998
  • 연구배경: 유전자치료에 이용되는 adenovirus를 기초로 하는 벡타는 상피세포에 강한 친화력이 있고 증식하지 않는 세포에도 유전자의 이입이 가능하며, in vivo에서 다른 백타에 비해 유전자이입 효율이 높은 장점이 있다. 그러나 adenovirus에 이해 전달된 유전자는 세포의 chromosome에 삽입되지 않기 때문에 세포가 분열하면 딸세포에 형질이 전달되지 않을 뿐 아니라 adenovirus가 숙주의 면역반응을 초래하여 이입된 유전자가 제거됨에 따라 전달된 유전자의 발현기간이 짧은 단점이 있다. 포화지방산인 butyrate는 histone의 acetylation을 증가시켜 전달된 유전자의 발현을 증가시킨다고 한다. 저자들은 유전자치료시 butyrate를 병용투여 할 경우 이입한 유전자의 발현이 증가되고, 따라서 유전자치료의 효과를 증가시킬 수 있을 것이라는 가정하에 butyrate가 herpes simplex virus thymidine kinase 유전자를 이용한 유전자치료에 미치는 영향을 조사하였다. 방 법: 악성 중피종세포인 REN세포에 Ad.CMVtk를 이입한 후 세포들을 3군으로 분류하였다. 1 군은 butyrate를 처리하지 않고 7일간 배양하였으며, 2군은 이입 후 1일째에 그리고 3군은 이입 후 2일째 1.5mM/L butyrate를 함유하는 배지에서 24시간 동안 배양한 후 butyrate가 함유되지 않은 배지로 교환하여 배양하였다. 유전자 이입 후 2일, 3일, 그리고 7일에 Western blotting을 시행하여 유전자의 발현정도를 조사하였으며, butyrate 처리 유무에 따른 bystander effect에 의한 살상효과의 차이를 조사하였다. 결 과: Butyrate를 처리하지 않은 대조군은 유전자이입 후 7일째에 유전자의 발현이 없었으나 butyrate를 처리한 군은 7일째에도 유전자의 발현이 있었다. 그리고 butyrate를 처리한 경우 bystander effect에 의한 살상효과가 유의하게 증가되었다. 결 론: 이상의 결과로 butyrate는 유전자의 발현을 증가시킴에 의해 bystander effect를 증가시킴을 알 수 있었으며, 향 후 adenovirus를 이장한 유전자치료의 효과를 증가시킬 수 있는 새로운 방법이 될 수 있을 것으로 생각된다.

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High Efficiency Retroviral Vectors with Improved Safety

  • Yu, Seung-Shin;Kim, Jong-Mook;Kim, Sunyoung
    • Toxicological Research
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    • 제17권
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    • pp.157-166
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    • 2001
  • Almost all currently available retroviral vectors based on murine leukemia virus (MLV) contain one or more viral coding sequences. Because these sequences are also present in the packaging genome, it has been suggested that homologous recombination may occur between the same nucleotide sequence in the packaging genome and the vector, resulting in the production of replication competent retrovirus (RCR). Up until now, it has been difficult to completely remove viral coding sequences since some were thought to be involved in the optimum function of the retroviral vector. For example, the gag coding sequence present in almost all available retroviral vectors has been believed to be necessary for efficient viral packaging, while the pol coding sequence present in the highly efficient vector MFG has been thought to be involved in achieving the high levels of gene expression. However, we have now developed a series of retroviral vectors that are absent of any retroviral coding sequences but produce even higher levels of gene expression without compromising viral titer. In these vectors, the intron and exon sequences from heterologous cellular or viral genes are present. When compared to the well known MLV-based vectors, some of these newly developed vectors have been shown to produce significantly higher levels of gene expression for a longer period. In an experimental system that can maximize the production of RCR, our newly constructed vectors produced an absence of RCR. These vectors should prove to be safer than other currently available retroviral vectors containing one or more viral coding sequences.

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Systemic Analysis of a Novel Coxsackievirus Gene Delivery System in a Mouse Model

  • Kim, Yeon-Jung;Yun, Soo-Hyeon;Lim, Byung-Kwan;Park, Ki-Bum;Na, Ha-Na;Jeong, Soo-Young;Kim, Dae-Sun;Cho, Young-Joo;Jeon, Eun-Seok;Nam, Jae-Hwan
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제19권3호
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    • pp.307-313
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    • 2009
  • In order to systemically investigate the possibility of using coxsackievirus B3 (CVB3) to deliver foreign genes in vivo, a recombinant strain of CVB3 encoding the renilla gene (CVB3-renilla) was constructed. The recombinant CVB3 resulted in extensive and transient expression of the renilla protein within mouse organs, especially the pancreas. The level of expression was generally dependent upon the viral titer present. Moreover, the CVB3-renilla strain was completely attenuated. Interestingly, the recombinant CVB3 vector was expressed much more strongly in mouse organs than was a comparable adenoviral vector. The CVB3-renilla strain did not express the renilla gene in mice with pre-existing coxsackievirus-specific neutralizing antibodies, but direct organ-specific administration of the virus during open-peritoneum surgery was able to circumvent this immunity. This coxsackievirus vector may represent a useful means for delivering and expressing foreign genes in mouse models in an acute and extensive fashion.

Effects of Insect Hormones on the Replication of Nucleopolyhedrovirus

  • Zhang, Zhi-Fang;Yi, Yong-Zhu;Xiao, Qing-Li;He, Jia-Lu;Zhou, Ya-Jing;Zhang, Yuan-Xing
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제4권2호
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    • pp.137-141
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    • 2002
  • An experimental study was undertaken to quantify the effects of insect hormones on the replication of nucleopolyhedrovirus (NPV). The results demonstrated that TCID/ sub 50/ at 72 h post-infection (hpi) rose systematically from 0.55$\times$10$^{8}$ /m1, for untreated cells, up to 1.67$\times$10$^{8}$ / ml at 3$\mu$g/ml, then dropped down to 1.45$\times$10$^{8}$ /m1 at 4 $\mu$g/ml, by adding ecdysone to the culture medium for Bm-N cells infected with a wild-type Bambyx mori. nucleopolyhedrovirus (BmNPV). The optimum enhancement of about 3 times on budded virus (BV) titer at 72 hpi was given at 3 $\mu$g/ml of ecdysone. While the polyhedra number had no obvious variation within the range of concentrations from 0 to 4 $\mu$g/ml. By addition of juvenile hormone analogue (JHA) into the media with this concentration range, the BmNPV TCID/ sub 50/ and polyhedra number at 72 hpi did not show significant changes. Also, the addition of either 3 $\mu$g/ml of ecdysone or 3 $\mu$g/ml of JHA to the culture media did not appear to affect the TCID/ sub 50/ and polyhedra number significantly in infected Sf-21 cells with the autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV).

Characterization of KI-24, a Novel Murine Monoclonal Antibody with Specific Reactivity for the Human Immunodeficiency Virus-1 p24 Protein

  • Shin, Song-Yub;Park, Jung-Hyun;Lee, Myung-Kyu;Jang, So-Youn;Hahm, Kyung-Soo
    • BMB Reports
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    • 제33권1호
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    • pp.92-95
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    • 2000
  • The HIV-1 p24(202-221) sequence ETINNEEEWDRVHPV HAGP contains a B-cell epitope with the earliest immune response and the highest antibody titer against anti-mouse sera obtained by immunization with p24 antigens. A novel mouse monoclonal antibody (mAb) was generated against the immunodominant B-cell epitope of the HIV-1 p24 capsid protein, p24(202-221). BALB/c mice were immunized with the four branched multiple antigenic peptide (MAP) containing the HIV-1p24(202-221) sequence, and antibody-secreting hybridoma were produced by fusion of mouse splenocytes with P3X63Ag8.653, mouse myeloma cells. One clone which produced the antigen-specific mAb named KI-24 (Isotype IgG1, light chain: ${\kappa}$) was identified. mAb KI-24 was highly specific for both the p24(202-221) and p24 proteins when analyzed by ELISA and Western blotting. Since p24(202-221) also contains a cytotoxic T-lymphocyte epitope, this specfic peptide epitope and the monoclonal antibody with specific reactivity against the p24 protein and p24(202-221) can be used in peptide vaccine development and p24 antigen detection from HIV patients.

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