The Epstein-Barr-transformed B lymphoblastoid cell lines, LCL, which express antigens, are potential antigen-presenting cells (APCs) for the induction of cytotoxic T lymphocytes in vitro. However, transfecting LCL with subsequent selection by antibiotics is notoriously difficult because the plating efficiencies of LCL are reported to be 1% or less. Therefore, this study investigated the optimal conditions for increasing the transduction efficiency of a recombinant adenovirus to LCL for use as a source of APCs. The transduction efficiencies were < 13% (SD $\pm$ 2.13) at a multiplicity of infection (MOI) of 100, while it was increased to 28% (SD $\pm$ 9.43) at an MOI of 1000. Moreover, its efficiencies to LCL that expressed the coxsackie adenovirus receptor were increased to 60% (SD $\pm$ 6.35) at an MOI of 1000, and were further increased to 70% (SD $\pm$ 4.56) when combined with the centrifugal method. The cationic liposome or anionic polymer had no effect on the transduction efficiency when compared to that of the centrifugal method. These results may be used as a convenient source of target cells for a CTL assay and/or autologous APCs for the induction of the in vitro CTL responses that are specific to viral and tumor antigens.
Kim, Dae-Hyun;Kim, Hyun-Ran;Heo, Seong;Kim, Se-Hee;Kim, Min-A;Shin, Il-Sheob;Kim, Jeong-Hee;Cho, Kang-Hee;Hwang, Jeong-Hwan
Research in Plant Disease
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v.16
no.3
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pp.247-253
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2010
Apple scar skin viroid (ASSVd) is one of the smallest viral pathogens infecting fruits, especially apple, and causes a significant damage to fruit trees. ASSVd usually induced the skin-dapple ring symptoms, but in 'Fuji' varieties, corked spot were occurred on the fruit skin in 2009. This new symptom will be of great helpful to diagnosis ASSVd in sight. ASSVd was surveyed in apple and pear from 2009 to 2010 in Korea, and ASSVd was identified in 20 out of 1,193 trees. The infection rate was 1.7%. To screen the infectivity of ASSVd among apple cultivars, real-time RT-PCR was applied followed by designing of ASSVd specific primers based on highly conserved regions of several ASSVd isolates including Korean isolate. NADH dehydrogenase subunit 5 (nad 5) gene, which is mRNA of the mitochondrial gene, was used for internal control. In this study, ASSVd infected apples were classified into 12 groups depending on different symptoms and symptom severity (scaring, rusting or malformation). Taken together, this study suggested that real-time PCR analysis was more sensitive to detect the low copy of ASSVd on early viroid infected apple skins than regular RT-PCR method.
Purpose : There was an epidemic of aseptic meningitis in Korea for 3 years from 1996 to 1998. In this study, we reported the time of outbreak, age and sex distribution, clinical manifestations, laboratory data, and complications of the children with aseptic meningitis. Methods : We reviewed clinical records of 192 aseptic meningitis patients who had been admitted to Pohang St. Mary's Hospital from 1996 to 1998. Results : Aseptic meningitis occurred most frequently in July and August. The ratio of male to female was 1.91 : 1, and the most prevalent age was 1 to 5 years of age. The main symptoms were fever, vomiting, headache in this order of frequency. Peripheral blood showed leukocytosis(WBC > $10,000/mm^3$) in 44.3% of the cases. CSF examination showed WBC count were less than $500/mm^3$ in 88.0%, protein levels less than 40 mg/dL in 61.5%, and glucose levels more than 40 mg/dL in 94.3% of the cases. We did not isolate the causative viral agents. Conclusion : Aseptic meningitis was prevalent in children in the Pohang area from 1996 to 1998. Clinical manifestations and CSF profiles of aseptic meningitis patients showed no great difference compared to other reported.
Purpose: Mumps meningitis is a common complication of mumps infection; however, information on mumps meningitis in the postvaccine era is limited. The purpose of the present study was to determine factors associated with mumps meningitis and to discuss the effect of vaccination on this disease. Methods: We retrospectively reviewed patients younger than 19 years with mumps, diagnosed at a university hospital in Korea between 2003 and 2013. Patients were divided into groups with and without meningitis, and the clinical features of the 2 groups were compared. Results: The study enrolled 119 patients: 19 patients with meningitis and 100 patients without. Univariate analysis showed that older age (median: 15 years vs. 9.5 years, respectively), a longer interval from last vaccination (median: 10.2 years vs. 4.8 years, respectively), and febrile presentation (94.7% vs. 31.0%, respectively) were significantly associated with mumps meningitis. Sex, number of vaccination doses, bilateral parotitis, and the presence of complications other than meningitis did not differ between the 2 groups. In multivariate logistic regression analysis, age (odds ratio, 1.38; 95% confidence interval, 1.01-1.89; P=0.04) and fever (odds ratio, 30.46; 95% confidence interval, 3.27-283.61; P<0.01) remained independent factors for mumps meningitis. Conclusion: Clinicians in the postvaccine era should be aware of the possibility of mumps meningitis in febrile cases of mumps in adolescents, regardless of the number of vaccination doses. To establish the role of vaccination in mumps meningitis, further studies will be necessary.
Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) infection causes acute enteritis with lethal watery diarrhea resulting in a high mortality rate in piglets. As with the other members of group 1 coronaviruses, PEDV also utilizes the host aminopeptidase N (APN) as the major cellular receptor for entry into target cells. The coronavirus spike (S) protein is known to interact with the cellular surface for viral attachment and the S1 domain of all characterized coronaviruses contains a receptor-binding domain (RBD) that mediates a specific high-affinity interaction with their respective cellular receptors. Although the RBDs of several coronaviruses have been mapped, the location of the PEDV RBD has to date not been defined. As a first step toward the identification of the region of the S protein of the PEDV that is critical for recognition with the cellular receptor, we generated a series of S1-truncated variants and examined their abilities to bind to the porcine APN (pAPN) receptor. Our data indicate that the N-terminus of the S1 domain is required for pAPN association. The results from the present study may assist in our understanding of the molecular interactions between the PEDV S protein and the pAPN receptor.
Hepatitis E Virus (HEV) infection is a worldwide disease and the primary cause of acute viral hepatitis in the world. It can be isolated from many different species including pigs. HEV is a zoonotic pathogen and foodborne disease. The main animal reservoir is domestic pigs. It is usually asymptomatic in pig but it is a public health concern, causing acute hepatitis in humans of varying severity. This study focused on the presence of HEV in pig and pork product. One hundred feces and one hundred fifty serum samples were randomly collected from pigs in slaughterhouses in Gwangju from November in 2018 to February in 2020. In addtion, seventy-five pork products were collected from markets in Gwangju. Feces and pork product samples were examined for the presence of HEV RNA using an reverse-transcription realtime PCR (RT-qPCR) assay. Serum samples were tested for the presence of HEV-specific IgG antibodies using Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HEV antigen and antibody positive rates were 3.0% (3/100) and 19.3% (29/150), respectively, in Gwangju and nearby areas such as Jeonnam and Jeonbuk. However, HEV antigen was not detected from any of pork product in this study. In conclusion, the prevalence of HEV should be continuously monitored because HEV was sporadically detected in Gwangju and nearby areas.
The present surveys were conducted in attempts to investigate the health situation of horses in Korea through mass-screening the samples serologically, bacteriologically and clinically. A total of 575 horses were sampled randomly, comprising 126 from the Korean Horse Affairs Association, 288 from the Korean Equestrian Federation and 161 from the Jeju ponies. Each of the samples taken was tested for diagnoses of 18 horse diseases including African horse sickness. Summarised below are the results obtained from this surveys. 1. From results of the serological survey it is evident that Korea is currently free from African horse sickness, dourine, glanders, vesicular stomatits, equine piroplasmosis, equine viral arteritis, Venezuelan encephalomyelitis and contagious equine metritis. Constant vigilence with strengthened quarantine measures is thus vital for maintaining freedom of any those diseases in Korea. 2. No clinical case was observed with any of signs or symptoms of infectious lymphangitis, anthrax and infestations with ringworm, mange or scab. However, continuous follow-up is required for establishing the evidence of no occurrence of the diseases in Korea. 3. One case of seropositive to equine infectious anemia may fully justify systematic and regular testings for the whole population of horse in Korea. 4. It is manifested that equine rhinopneumonitis, Japanese encephalitis and Getah virus infection are well established in Korea, together with the presence of equine infectious abortion(Salmonella abortus equi). This strongly entails preventive precautions before entry into Korea for the horses participating in the 1986 Asian Games and the 1988 Seoul Olympics.
Kim, Ju-Ye;Kim, Ji-Hyun;Moon, Soon-Jung;Cho, Byong-Soo;Cha, Sung-Ho
Pediatric Infection and Vaccine
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v.7
no.1
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pp.152-158
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2000
Purpose : Kawasaki disease is an acute illness of unknown cause that affects infants and children. Sometimes, cervical lymphadenitis that seems to be caused by bacterial or viral agents at admission would be changed to Kawasaki disease within several days of hospitalization. Lymphadenopathy is one of major presenting manifestation of both cervical lymphadenitis and Kawasaki disease. We compared Kawasaki disease with cervical lymphadenopathy as the initial manifestation with cervical lymphadenitis without other typical manifestations of Kawasaki disease. Methods : We describe and compare the clinical characteristics of 15 patients with Kawasaki disease which were misdiagnosed as cervical lymphadenitis and 125 patients with cervical lymphadenitis, retrospectively. Results : The clinical characteristics of Kawasaki disease with cervical lymphadenopathy as an initial presenting manifestation were older in age and had more frequent abnormalities in markers of systemic inflammation than kawasaki disease without cervical lymphadenopathy. They would have greater abnormalities in markers of inflammation than cervical lymphadenitis alone. They had higher mean WBC, cESR, CRP which were compared with the patients with cervical lymphadenitis. Usually, patients with cervical lymphadenitis responded to antibiotics promptly, but they did not tend to be responded to antibiotics within 48~72hrs. Conclusion : Patients with Kawasaki disease may initially present with findings that strongly suggest bacterial lymphadenitis with or without other manifestations of Kawasaki disease. If they did not response initial antibiotics administration, they should be closed observed for the possible development of the another signs of Kawasaki disease. Earlier diagnosis of Kawasaki disease can avoid the need for unnecessary procedures and antibiotics and lead to more proper therapy directed at Kawasaki disease.
Detection of pathogenic microorganisms takes several days by conventional methods. It is necessary to assess microorganisms in a timely manner to reduce the risk of spreading infection. For this purpose, bacteriophages are chosen for use as a biosensing tool due to their host specificity, wide abundance, and safety. However, their lytic cycle limits their efficacy as biosensors. Phage proteins involved in binding to bacteria could be a robust alternative in resolving this drawback. Here, a fragment of tail protein J (residues 784 to 1,132) of phage lambda fused with 6X His-tag (6HN-J) at its N-terminus was cloned, overexpressed, purified, and characterized for its binding with microorganisms. The purified protein demonstrated a size of about 38 kDa in sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and bound with anti-His monoclonal antibodies. It bound specifically to Escherichia coli K-12, and not Salmonella typhimurium, Bacillus subtilis, or Pseudomonas aeruginosa in dot blotting. Binding of the protein to E. coli K-12 inhibited about 50% of the in vivo adsorption of the phage lambda to host cells at a concentration of $1{\mu}g/ml$ 6HN-J protein and almost 100% at $25{\mu}g/ml$ 6HN-J. The results suggest that a fusion viral protein could be utilized as a biosensing element (e.g., protein chips) for detecting microorganisms in real time.
Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) is a viral disease causing severe economic losses on tomato. Practical prevention of the TYLCV disease is to control tabacco whitefly (Bemisia tabaci) or to cultivate TYLCV-resistant tomato cultivars, because no agrochemical products are available to control TYLCV. In this study, TYLCV resistance of the commercial tomato cultivars were evaluated using the DNA markers tightly linked to TYLCV resistance genes Ty-1 and Ty-3 and infection with the TYLCV clones mediated by Agrobacterium. In marker genotyping, resistance alleles were detected from 4 oval type tomato cultivars (Titichal, TY tinny, TY saengsaeng II, TY sense Q). Four cheery type cultiavrs (TY endorphin, TY smartsama, Tiara TY, Olleh TY) and 6 round type cultivars (TY kingdom, TY ace, TY homerun, TY altorang, Dotaerang TY winner, Styx TY). The seedling bioassay indicated that tomato cultivars of the oval type and cherry type showed consistancy in marker genotype and phenotype while slight disease symptom was observed from some round type cultivras (TY ace, TY homerun, Styx TY) with resistance marker genotype. For fruit yields, TY tinny was greater than its control cultivar Titichal in oval types, TY smartsama was greater than its control Smile in cherry type, and TY ace and TY kingdom were greater than their control Dabok. These cutliavrs can be a good choice for high-yielding TYLCV-resistant tomato cultivars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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