Kim, Soo-Jung;Lee, Jee-Young;Kim, Chung-Ho;Choi, Yang-Do
Applied Biological Chemistry
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v.38
no.5
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pp.387-392
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1995
To study the regulatory expression mechanism of soybean glycinin gone, Gy2, the 5' upstream region of the gene was searched for the presence of putative regulatory elements by nucleotide sequencing. It revealed various kinds of regulatory sequence elements commonly found in plant storage protein genes. There were canonical promoter sequences, TATA box (TATAAT) and AGGA box (GAAT) which are common in the 5' upstream region of the plant genes. The embryo factor binding sequence, RY repeat, CACA sequences, ${\alpha}$-conglycinin enhancer-like sequences were also found. To delineate the function of these sequences, 5' upstream deletion mutants of Gy2 were prepared and fused to the ${\alpha}$-glucuronidase (GUS) gene. Each chimeric construct was transferred into soybean protoplasts for transient assay, which led to the identification of the sequences between -281 and -223, -170 and -122, of Gy2 promoter as negative regulatory elements, and the sequences between -223 and -170, -122 and -16 as positive regulatory elements. These results are consistent in transformed tobacco plants as well. The serially deleted promoter fragments fused to the GUS were transformed into Nicotiana tabacum by Agrobacterium tumefaciens using the binary vector system. GUS activity of Gy2 promoter deletion constructs was detected only in seeds but not in leaves with different levels of expression as in transient assay. These results suggest that the glycinin Gy2 promoter drives a tissue-specific expression in transgenic tobacco plants.
Cucumber mosaic virus (CMV) leads to a cause of poor crop productivity and quality. To solve this problem, we attempted to develop a virus-resistance tobacco plants by using viral coat protein (CP) gene. Transgenic tobacco plants expressing CMV CP gene were analysed by the resistance upon CMV infection. The virus-resistance was measured in $\textrm{T}_{1}$, generation by the inhibition of plant growth and the expression of the mosaic symptoms infected with CMV. The transgenic lines were divided into four groups: highly resistant, resistant, moderate and susceptible based on their growth and symptom severity. Out of 39 transgenic lines, 16 lines showed significant virus-resistance. And of resistant lines, 2 lines were designated highly resistant based on the facts that they achieved similar plant height to that of non-infected tobacco plants and showed lower disease symptom than that of other lines. The steady state level of CP RNA and coat protein level were measured by northern blot and immunoblot analysis. The CP RNA was highly accumulated in most resistant and moderate lines but barely detected in susceptible lines. The coat protein was detected in most lines regardless of their resistance to CMV. from this result, virus-resistance appeared to correlate more with CP RNA level than the level of coat protein. However, in two highly resistant lines, CP RNA level was unexpectedly low. This unexpected phenomenon need to be further investigated.
Plant secondary metabolites play an important role in insect-plant interactions. Herbivorous insects have various strategies to cope with the plant defensive compounds. Polyphagous insects feed on a wide variety of plant species, and their detoxification mechanisms are more complex since they tend to respond to a large array of different plant-derived chemicals. Alternatively, oligophagous insects specialize on only a few related plant species and may be expected to have a more efficient form of adaptation. This adaptation could involve either the production of large quantities of enzymes to detoxify their defensive compounds or the sequestration of the compounds or their metabolites. The oriental tobacco budworm, Helicoverpa assulta, is a specialist herbivore, feeding on a few plants of Solanaceae, such as tobacco and hot pepper. Understanding its host-plant adaptation not provides an important insight on physiology, ecology and evolution of specialist herbivores, but also gives a clue to develop management strategies of the pest species such as H. assulta. This paper briefly reviews the specialist, H. assulta, focusing on its host range, larval associations with the host plants, and detoxification mechanisms to nicotine and capsaicin, two characteristic defensive compounds derived from its two major host plants, tobacco and hot pepper, respectively. It summarizes the relevant research over the last half century and provides a future perspective on this subject.
Park, Jong-Ho;Hong, Sung-Jun;Han, Eun-Jung;Shim, Chang-Ki;Kim, Min-Jeong;Lee, Min-Ho;Kim, Yong-Ki
Korean journal of applied entomology
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v.53
no.4
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pp.409-413
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2014
This study was conducted to observe the effects of dried tobacco leaf smoke on controlling aphids in a laboratory and a greenhouse. Insecticidal activity of tobacco smoke against Aulacorthum solani in an acrylic cage was higher when a burley cultivar, rather a flue-cured cultivar, was used. Mortality of A. solani, Aphis gossypii, and Myzus persicae was 63.9%, 94.4%, and 97.2%, respectively, after 50mg of tobacco smoke on their host plants in an acrylic cage. Mortality of M. persicae after tobacco smoke was used was higher in eggplant than in Chinese cabbage. When 100 g and 200 g of flue-cured tobacco were smoked in a $100m^2$ greenhouse for 2 h, the control values against A. solani were 28.9% and 95.4%, respectively; the control value after 14 h of smoking was more than twice the value after 2 h of smoking. The control value against A. gossypii was more than 80% after tobacco smoke was used in a greenhouse in an organic cucumber farm. Tobacco smoke can be an effective control against aphid pests in greenhouses if an appropriate amount of tobacco and smoking time on the basis of the greenhouse conditions are used.
Jeun, Y.C.;Boonrod, K.;Nagy, P.;Conrad, U.;Krczal, G.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.75.2-75
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2003
To develop an effective protection strategy against tomato bushy stunt virus (TBSV), tobacco plants expressing single-chain Fv antibodies (scFv), were established. A previous had shown that the replication activity of viral replicase was inhibited by the selected scFvs. Moreover, no systemic symptom was found after virus inoculation on leaves of wt N. benthamiana infiltrated with an Agrobacterium suspension resulting i3l expression of the scFvs. However, control plants showed systemic symptoms. In this study the localization of the scFvs within two transgenic plant lines, (CP28H3, CP-P55) was demonstrated using immunogold labelling. The gold particles, indicating the presence of scFv, were mostly found In the cytoplasm of the plant cells including chloroplasts and in the cell walls. However, they were hardly found in the vacuole, nucleoplasm and intercellular spaces. Gold particles often accumulated in either the cytosol or chloroplasts showing a specific labeling, There was no difference in type of gold labeling between both transgenic lines. The localization of the scFv in the cytoplasm further conforms the inhibition of the RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) by the selected scFv because it is known that the RdRp is localized to membraneous cytosolic structures.
The cDNAs derived from the coat protein (CP) genes of six plant RNA viruses, tobacco mosaic virus-pepper strains (TMV-P) and -ordinary strain (TMV-OM), potato virus Y (PVY), turnip mosaic virus (TuMV), cucumber mosaic virus (CMV) and potato leafroll virus (PLRV), were subcloned into the transcription vector, pSPT18, containing SP6 and T7 promoters. The digoxigenin (DIG)-labeled RNA polymerase after linearlization of the cloned pSPTs with XbaI or SacI, and were tested for their sensitivities for the detection of the six viruses. In slot-blot hybridization, dilution end points for the detection of TMV-P and TMV-OM were 10-4, while those of PVY, TuMV and CMV were 10-3. PLRV was detected at the dilution of 10-2. When each RNA probe was applied for the detection of the viruses in the preparations from the leaf disks (8 mm in diameter, and 12 to 15 mg in weight) of infected natural host plants, TMV-P, TMV-OM and TuMV could be detected from one disk, while PVY from 1 or 2 disks. CMV was detected in the preparation from two disks, and PLRV from three disks. With DIG-labeled RNA probe, PVY was detected at 5 days after inoculation, but with ELISA the virus was detected at 8 days after inoculation to tobacco (Nicotiana tabacum cv. Xanthi nc) plants on which symptoms appeared at 9 days after inoculation. No difference was observed in cross reaction between the RNA probes for the detection of TMV-P and TMV-OM.
Hyun, Tae-Kyung;Kumar, Kundan;Rao, Kudupudi Prabhakara;Sinha, Alok Krishna;Roitsch, Thomas
Plant Biotechnology Reports
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v.5
no.1
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pp.19-25
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2011
Tocopherols belong to the plant-derived poly phenolic compounds known for antioxidant functions in plants and animals. Activation of mitogen-activated protein kinases (MAPK) is a common reaction of plant cells in defense-related signal transduction pathways. We report a novel non-antioxidant function of ${\alpha}$-tocopherol in higher plants linking the physiological role of tocopherol with stress signalling pathways. Pre-incubation of a low concentration of $50{\mu}M$${\alpha}$-tocopherol negatively interferes with MAPK activation in elicitor-treated tobacco BY2 suspension culture cells and wounded tobacco leaves, whereas pre-incubated BY2 cells with ${\alpha}$-tocopherol phosphate did not show the inhibitory effect on stimuli-induced MAPK activation. The decreased MAPK activity was neither due to a direct inhibitory effect of ${\alpha}$-tocopherol nor due to the induction of an inhibitory or inactivating activity directly affecting MAPK activity. The data support that the target of ${\alpha}$-tocopherol negatively regulates an upstream component of the signaling pathways that leads to stress dependent MAPK activation.
Yang Joo Kang;Deuk-Su Kim;Seyoung Kim;Young-Jin Seo;Kisung Ko
BMB Reports
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v.56
no.7
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pp.392-397
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2023
In this study, recombinant Fc-fused Prostate acid phosphatase (PAP) proteins were produced in transgenic plants. PAP was fused to immunoglobulin (Ig) A and M Fc domain (PAP-IgA Fc and PAP-IgM Fc), which were tagged to the ER retention sequence KDEL to generate PAP-IgA FcK and PAP-IgM FcK. Agrobacterium-mediated transformation was performed to produce transgenic tobacco plants expressing four recombinant proteins. Genomic PCR and RT-PCR analyses confirmed the transgene insertion and mRNA transcription of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK in tobacco plant leaves. Western blot confirmed the expression of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK proteins. SEC-HPLC and Bio-TEM analyses were performed to confirm the size and shape of the plant-derived recombinant PAP-Fc fusion proteins. In mice experiments, the plant-derived IgA and IgM Fc fused proteins induced production of total IgGs including IgG1 against PAP. This result suggests that IgA and IgM Fc fusion can be applied to produce recombinant PAP proteins as a prostate cancer vaccine in plant expression system.
Tobacco and ginseng plants differed in responses to varied light intensities. Tobacco showed high in CO$_2$ uptake and RuBPCase activity at 1900 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/, being high by 3.7 times and 2.7 times than ginseng respectively. Close positive relationships existed between CO$_2$ uptake and RuBPCase activity in tobacco. However, ginseng showed negative correlation. The activity of glycolate oxidase and malate dehydrogenase in tobacco was high at 1900 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/, but those of ginseng was high at 1000 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/. Nitrate reductase activity of tobacco at 1900 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/ was 2 times higher than that at 500 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/, while that of ginseng was no detected in all plots. The content of protein and chlorophyll in tobacco was 2.2 times and 1.5 times higher than in ginseng at the most efficient light intensity. The ratio of chlorophyll a/b in tobacco was low at 500 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/, while that of ginseng was low at 1000 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/. The relationships between protein and chlorophyll was high positive correlation. However, on 5 days after treatment, ginseng showed negative correlation at 500 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/. Tobacco and ginseng showed different leaf soluble protein patterns on SDS-gel electrophoresis. The molecular weights of two major band were 50 KD and 15 KD in both plants. The major bands in tobacco were thinned at 500 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/, while those in ginseng thinned at 1000 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/ from 15days after treatment. Disappeared band was 45 KD at 500 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/ in tobacco, but that of ginseng was 47 KD at 1000 ${\mu}$ E m/sup-2/ sec$\^$-1/.
This study was conducted to determine the larval development of tobacco cutworm, Spdodoptera litura Fabricius, reared on leaves of different leguminous plants of 11 varieties or cultivars, and to measure amount of leaves fed by the larva. Larval duration ranged from 11.5 to 15.7 days depending on different food with the shortest on geomjeongkong-1 and the longest on daek-wangddangkong. Among 6 larval development stages, the 1st instar stages was the longest(3.2~5.0 days) while the 4th instar was the shortest (1.0~1.5 days). In general, amount of leaves consumed was increased with larval age, and consumed from 5 to 74% of total food only during the last instar stage. And female consumed more food than male. While, larval mortality and the sex-ratio seem to have no relation with the amount of food per species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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