Virotherapy is an effective method for the treatment of cancer. The oncolytic virus specifically infects the lyse cancer cell without harming normal cells. There is a time delay between the time of interaction of the virus with the tumor cells and the time when the tumor cells become infectious and produce new virus particles. Several types of viruses are used in virotherapy and the delay varies with the type of virus. This delay can play an important role in the success of virotherapy. Our present study is to explore the impact of this delay in cancer virotherapy through a mathematical model based on delay differential equations. The partial success of virotherapy is guarenteed when one gets a stable non-trivial equilibrium with a low level of tumor cells. There exits Hopf-bifurcation by considering the delay as bifurcation parameter. We have estimated the length of delay which preserves the stability of the non-trivial equilibrium point. So when the delay is less than a threshold value, we can predict partial success of virotherapy for suitable sets of parameters. Here numerical simulations are also performed to support the analytical findings.
The antifuse is a semi-permanent memory device like a ROM which shows the open or short state, and a switch device connecting logic blocks selectively in FPGA. In addition, the antifuse has been used as a logic device to troubleshoot defective memory cells arising from SDRAM processing. In this study, we have fabricated ONO antifuses consisted of PIP structure. The antifuse shows a high resistance more than several G Ω in the normal state, and shows a low resistance less than 500 Ω after program. The program resistance variation according to temperature shows the very stable value of $\pm$20 Ω. At this time, its program voltage shows 6.7∼7.2 V and the program is performed within 1 second. Therefore this result shows that the PIP antifuse is a very stable and programmable logic device.
The time of the onset of double-diffusive convection in time-dependent, nonlinear concentration fields is investigated theoretically. The initially quiescent horizontal fluid layer with a uniform temperature gradient experiences a sudden concentration change from below, but its stable thermal stratification affects concentration effects in such way to invoke convective motion. The related stability analysis, including Soret effect, is conducted on the basis of the propagation theory. Under the linear stability theory the concentration penetration depth is used as a length scaling factor, and the similarity transform for the linearized perturbation equations. The newlly obtained stability equations are solved numerically. The resulting critical time to mark the onset of regular cells are obtained as a function of the thermal Rayleigh number, the solute Rayleigh number, and the Soret effect coefficient. For a certain value of the Soret effect coefficient, the stable thermal gradient promote double-diffusive convective motion.
To document the basic ecological aspects of Chaoborus species, which has never been reported in Korea, we attempted to identify the species, to monitor seasonal and vertical dynamics, and to elucidate trophic relations of the species in Sang-Chun reservoir. Using morphological characteristics, we identified the collected samples as C. flavicans. Also, we compared the distribution of C. flavicans, Daphnia rosea and chlorophyll a to observed seasonal dynamics. The increase of C. flavicans was observed 1-2 weeks after the increase of D. rosea. Survey of diel vertica migration patterns in the summer season showed that C. flavicans were in hypolimnion at daytime, but moved to the epilimnion at night. Finally, to determine trophic relationships in Sang-Chun reservoir, additional studies on the food web were undertaken by stable isotope analysis. Chaoborus flavicans I-II instars appear to be filter feeders based on carbon isotope values. Trophic levels of C. flavicans III-IV instars were shown to be higher than other zooplankto based on nitrogen isotope values.
The anti-dansyl antibodies were specifically labeled with stable isotope by growing hybridoma cells in serum-free medium. Assignments of the observed carbonyl carbon resonances have been determined by using $^{13}C-{15}N$ double labeling method in order to assign the Leu resonances. However, when the identical dipeptide appears more than twice in the polypeptide sequences, we applied the proteolytic fragments in the fragment-specific method. Carboxypep-tidase B-treated antibody has also been used to assign the Lys-447 in C terminal amino acid. These unambiguously assigned carbonyl carbon resonances in antibodies are thought to be useful in elucidating not only the structure of antibodies but also the structure-function relationship in the antibody by $^{13}C$ neuclear magnetic resonance spectroscopy.
Kim, Na Young;Lee, Jung Eun;Chang, Hyeu Jin;Lim, Chae Seung;Nam, Deok Hwa;Min, Bon Hong;Park, Gil Hong;Oh, Jun Seo
Molecules and Cells
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제25권1호
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pp.105-111
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2008
Radiotherapy is an important treatment for many malignant tumors, but there are recent reports that radiation may increase the malignancy of cancer cells by stimulating expression of type IV collagenases. In this study, we examined changes in matrix metalloproteinase (MMP) inhibitors, such as the tissue inhibitors of metalloproteinase (TIMP)-1, TIMP-2 and RECK, in response to irradiation in Panc-1 pancreatic cancer cells. Irradiation increased RECK protein levels but not mRNA levels, whereas no significant changes were found in TIMP-1 and TIMP-2. The enhanced RECK protein levels were associated with an increase in MMP inhibitory activity. However, irradiation slightly but reproducibly increased the invasiveness of the Panc-1 cells. Like irradiation, treatment of Panc-1 cells with transforming growth factor $(TGF)-{\beta}1$ led to a 2-fold increase in RECK protein levels. Transient transfection with Smad3 also increased RECK protein levels, but transfection with Smad7 markedly reduced them. Stable expression of Smad7 and treatment with SB431542, an inhibitor of $TGF-{\beta}$ receptor I kinase, abolished $TGF-{\beta}1$- and radiation-mediated effects on RECK. Furthermore, irradiation increased levels of phosphorylated Smad3. We conclude that radiation post-transciptionally enhances RECK protein levels in Panc-1 cells, at least in part, via $TGF-{\beta}$ signaling, and that irradiation increases Panc-1 invasiveness via a mechanism that may not be linked to MMP-2 activity.
We investigated whether IFN-${\beta}$ inhibits the growth of human malignant glioma and induces glioma cell apoptosis using the human IFN-${\beta}$ gene transfected into glioma cells. A eukaryonic expression vector ($pSV2IFN{\beta}$) for IFN-${\beta}$ was transfected into the glioma cell line SHG44 using liposome transfection. Stable transfection and IFN-${\beta}$ expression were confirmed using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Cell apoptosis was also assessed by Hoechst staining and electron microscopy. In vivo experiments were used to establish a SHG44 glioma model in nude mice. Liposomes containing the human IFN-${\beta}$ gene were injected into the SHG44 glioma of nude mice to observe glioma growth and calculate tumor size. Fas expression was evaluated using immunohistochemistry. The IFN-${\beta}$ gene was successfully transfected and expressed in the SHG44 glioma cells in vitro. A significant difference in the number of apoptotic cells was observed between transfected and non-transfected cells. Glioma growth in nude mice was inhibited in vivo, with significant induction of apoptosis. Fas expression was also elevated. The IFN-${\beta}$ gene induces apoptosis in glioma cells, possibly through upregulation of Fas. The IFN-${\beta}$ gene modulation in the Fas pathway and apoptosis in glioma cells may be important for the treatment of gliomas.
Kim, Chong-Ho;Park, Young-Soon;Chung, Koong-Nah;Elwood, Patrick C.
BMB Reports
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제35권4호
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pp.395-402
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2002
Caveolae are small, flask-shaped, non-clathrin coated invaginations of the plasma membrane of many mammalian cells. Caveolae have a coat that includes caveolin. They have been implicated in numerous cellular processes, including potocytosis. Since the human folate receptor (hFR) and other glycosyl-phosphatidylinositol (GPI)-tailed proteins have been co-localized to caveolae, we studied the caveolin role in the hFR function by transfecting hFR and/or caveolin cDNA into Fischer rat thyroid epithelial (FRT) cells that normally do not express detectable levels of either protein. We isolated and characterized stable clones as follows: they express (1) high levels of caveolin alone, (2) hFR and caveolin, or (3) hFR alone. We discovered that hFR is correctly processed, sorted, and anchored by a GPI tail to the plasma membrane in FRT cells. No difference in the total folic acid binding or cell surface folic acid binding activity were found between the FRT cells that were transfected with hFR, or cells that were transfected with hFR and caveolin. The hFR that was expressed on the cell surface of clones that were transfected with hFR was also sensitive to phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PI-PLC) release, and incorporated radiolabeled ethanolamine that supports the attachment of a GPI-tail on hFR. We conclude that the processing, sorting, and function of hFR is independent on the caveolin expression in FRT cells.
Astrocyte elevated gene-1 (AEG-1) is a recently discovered oncogene that has been reported to be highly expressed in various types of malignant tumors, including renal cell carcinoma. However, the precise role of AEG-1 in renal cancer cell proliferation and apoptosis has not been clarified. In this study, we transfected the renal cancer cell line Caki-1 with a plasmid expressing AEG-1 short hairpin RNA (shRNA) and obtained cell colonies with stable knockdown of AEG-1. We found that AEG-1 down-regulation inhibited cell proliferation and colony formation and arrested cell cycle progression at the sub-G1 and G0/G1 phase. Western blot analysis indicated that the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cyclin D1 and cyclin E were significantly reduced following AEG-1 down-regulation. In addition, AEG-1 knockdown led to the appearance of apoptotic bodies in renal cancer cells, and the ratio of apoptotic cells significantly increased. Expression of the antiapoptotic factor Bcl-2 was dramatically reduced, whereas the pro-apoptotic factors Bax, caspase-3 and poly (ADPribose) polymerase (PARP) were significantly activated. Finally, AEG-1 knockdown in Caki-1 cells remarkably suppressed cell proliferation and enhanced cell apoptosis in response to 5-fluorouracil (5-FU) treatment, suggesting that AEG-1 inhibition sensitizes Caki-1 cells to 5-FU. Taken together, our data suggest that AEG-1 plays an important role in renal cancer formation and development and may be a potential target for future gene therapy for renal cell carcinoma.
Ku70/80 heterodimer is a central element in the nonhomologous end joining (NHEJ) DNA repair pathway, Ku80 playing a key role in regulating the multiple functions of Ku proteins. It has been found that the Ku80 protein located at telomeres is a major contributor to radiosensitivity in some telomerase positive human cancer cells. However, in ALT human osteosarcoma cells, the precise function in radiosensitivity and telomere maintenance is still unknown. The aim of this study was to investigate the effects of Ku80 depletion in the U2OS ALT cell line cell line. Suppression of Ku80 expression was performed using a vector-based shRNA and stable Ku80 knockdown in cells was verified by Western blotting. U2OS cells treated with shRNA-Ku80 showed lower radiobiological parameters (D0, Dq and SF2) in clonogenic assays. Furthermore, shRNA-Ku80 vector transfected cells displayed shortening of the telomere length and showed less expression of TRF2 protein. These results demonstrated that down-regulation of Ku80 can sensitize ALT cells U2OS to radiation, and this radiosensitization is related to telomere length shortening.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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