Kim Su Hwa;Hong Seung-Bok;Kang Hee Jeong;Ahn Jin-Chul;Jeong Jae Hoon;Son Seung-Yeol
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.3
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pp.201-207
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2005
A phenanthrene-degrading bacterium HS362, which is capable of using phenanthrene as a sole carbon and energy source, was isolated from oil contaminated soil. This strain is a gram negative, rod shaped organism that is most closely related to Sphingomonas paucimobilis based on biochemical tests, and belongs to the genus Sphingomonas based on fatty acids analysis. It exhibited more than $99.2{\%}$ nucleotide sequence similarity of 16S rDNA to that of Sphingomonas CF06. Thus, we named this strain as Sphingomonas sp. HS362. It degraded $98{\%}$ of phenanthrene after 10 days of incubation when phenanthrene was added at 500 ppm and $30{\%}$ even when phenanthrene was added at 3000 ppm. Sphingomonas sp. HS362 could also degrade low molecular weight PAHs(Polycyclic aromatic hydrocarbons) such as indole and naphthalene, but was unable to degrade high molecular weight PAHs such as pyrene and fluoranthene. The optimum temperature and pH for phenanthrene degradation were $30^{\circ}C$ and $4{\~}8$, respectively. Sphingomonas sp. HS362 could degrade phenanthrene effectively in the concentration range of NaCl of up to $1{\%}$. Its phenanhrene degrading ability was enhanced by preculture, suggesting the possibility of induction of phenanthrene degrading enzymes. Starch and surfactants such as SDS, Tween 85, and Triton X-100 were also able to enhance phenanthrene degradation by Sphingomonas sp. HS362. It carries five plasmids and one of them, plasmid p4, is considered to be involved in the degradation of phenanthrene according to the plasmid curing experiment by growing at $42^{\circ}C$.
In order to decrease level of an organophosphorus fungicide, tolclofos-methyl, from in situ ginseng cultivating soil, we isolated a tolclofos-methyl degrading bacteria from ginseng cultivating soil samples. The bacterial strain removed tolclofos-methyl around 95% after 3 days incubation with complete liquid media. The strain was identified as Sphingomonas sp. by 16S rDNA sequence comparison, and designated as Sphingomonas sp. 224. Through the GC-MS analysis, Sphingomonas sp. 224 was proposed to have an initiative degradation pathway generating the metabolite such as 2,6-dichloro-4-methyl phenol compound from tolclofos-methyl. In addition, Sphingomonas sp. 224 was confirmed representing the effective degrading capability to tolclofosmethyl in situ soil.
Lee Soo-Youn;Choi Jung-Do;Shin Malshick;Kim Young-Chang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.1
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pp.8-12
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2005
Some genes, which are involved in the biosynthesis of polysaccharides, could be found by the genome project of Sphingomonas chungbukensis DJ77. In this study, we identified the complete nucleotide sequence of a gene, encoding the glucosyl-isoprenyl phosphate-transferase, which catalyzes the first step in the biochemical pathway for the synthesis of the sphingan type polysaccharide. This gene, named spsB, is initiated by the ATG codon and terminated by the TGA, and its open reading frame consists of 1392 bp, encoding 463 amino acids. The predicted amino acid sequence of this enzyme indicates $50\%$ similarity to SpsB of Sphingomonas spp S88, also produces sphingan, and $48\%$ to GelB of Sphingomonas paucimobilis ATCC 31461.
We isolated a bacterium, K-19, which could degrade PAHs (polycyclic aromatic hydrocarbons) from a soil sample contaminated with PAHs. K-19 was cultured under the conditions where phenanthrene was a sole source of carbon and energy.
Bacteria in the polar region are under strong light and ultraviolet radiation. In this study, we investigated the effects of light on the growth of a psychrophilic bacterium, Sphingomonas sp. PAMC 26621, isolated from an Arctic lichen Cetraria sp. The growth of the strain in the light was lower than that in the dark. Surprisingly, thiamine increased the growth of Sphingomonas sp. PAMC 26621 in M9 minimal medium under light conditions. Thiamine increased the growth of the strain in a concentration-dependent manner along with ascorbic acid. N-acetylcysteine had no effect on the growth of the strain in the light. Thiamine and ascorbic acid also increased the activities of glucose-6-phosphate dehydrogenase and superoxide dismutase. The results of this study indicate that thiamine provided by the lichen symbiosis system plays an important role in light-induced oxidative stress in this Arctic bacterium as an antioxidant. Our study provide insight into the biochemistry and physiology of Arctic bacteria under strong light and ultraviolet radiation.
Anthracene is a PAH that is not readily degraded, plus its degradation mechanism is still not clear. Thus, two strains of anthracene-degrading bacteria were isolated from long-term petroleum-polluted soil and identified as Sphingomonas sp. 12A and Pseudomonas sp. 12B by a 16S rRNA sequence analysis. To further enhance the anthracene-degrading ability of the two strains, the biosurfactants produced by Pseudomonas aeruginosa $W_3$ were used, which were characterized as rhamnolipids. It was found that these rhamnolipids dramatically increased the solubility of anthracene, and a reverse-phase HPLC assay showed that the anthracene degradation percentage after 18 days with Pseudomonas sp. 12B was significantly enhanced from 34% to 52%. Interestingly, their effect on the degradation by Sphingomonas sp. 12A was much less, from 35% to 39%. Further study revealed that Sphingomonas sp. 12A also degraded the rhamnolipids, which may have hampered the effect of the rhamnolipids on the anthracene degradation.
Sphingomonas chungbukensis DJ77 is able to use phenanthrene and biphenyl as the sole carbon and energy source. Mitomycin C curing experiment suggested that polyaromatic hydrocarbon (PAH) utilization in strain DJ77 was plasmid-encoded. The plasmid cured strains were failed to grow on the minimal medium sprayed with biphenyl or phenanthrene. This was evident from southern hybridizations using a previously cloned DNA segment as a probe. There were positive signals in the palsmid DNA of the wild-type strain DJ77 and the absence of hybridizations with chromosomal DNA from the plasmid DNA of the wild-type strain DJ77 and the absence of hybridizations with chromosomal DNA from the palsmid-cured mutant strains.
The aromatic dioxygenase system in Sphingomonas yanoikuyae strain Bl consists of three components, an oxygenase, a ferredoxin, and a reductase. The insertional knockout of the bphA4 gene encoding a reductase and subsequent complementation experiments showed that the reductase encoded by bphA4 in S. yanoikuyae strain Bl is associated with multiple dioxygenase components including that of toluate dioxygenase (XyIXY).
A Phenanthrene-degrading bacterium, Strain 1-21 was isolated from oil-contaminated soil. This strain was a Gram-negative, aerobic, and rod-shaped bacterium, and exhibited a 99% sequence similarity of 16S rDNA to that of Sphingomonas subarctica. The major cellular fatty acid was a summed feature 7(18:1 w7c, 18:1 w9t, 18:1 s12t), which is a characteristic of the Sphingomonas species. When 200 and 1,000 ppm of phenanthrene was added as the sole carbon source, Strain 1-21 degraded 98% and 67% after 10 days of incubation, respectively. Futhermore, this strain was also able to utilized naphthalene and fluorene as sole carbon and energy sources.
Lee Kwan-Young;Kwon Hae-Ryong;Lee Won-Ho;Kim Young-Chang
Korean Journal of Microbiology
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v.41
no.2
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pp.125-128
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2005
A 16S ribosomal RNA gene from S. chungbukensis DJ77 has been sequenced. This sequence had a length of 1,502 bp and was extended for 29 bp at 5' and for 37 bp at 3' from the partial sequence (1,435 bp) registered in 2000 year. Besides, 1 bp was newly added near to the 3' end. We made the secondary structure of the 16S rRNA based on E. coli model and found four specific regions. We found constant and variable regions in genus Sphingomonas as the result of multiple alignment of 16S rRNA gene sequences from Sphingomonas spp. and S. chungbukensis DJ77. We found a stem loop structure in S. chungbukensis DJ77, which was only discovered in C. jejuni to date. It showed the structural agreement despite the difference of the sequences from the both organisms. Finally, S. chungbukensis DJ77 belonged to cluster II (Sphingobium) group, after the classification using phylogenetic analysis and nucleotide signature analysis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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