One of the major problems in strawberry production is difficulty in diagnosis of anthracnose caused by Colletotrichum acutatum or Glomerella cingulata in latent infection stage. We here developed a diagnostic tool for the latent infection consisting of initial culturing of fungi, DNA extraction, synthesis of PCR-amplified probes and microtube hybridization (MTH) using a macroarray. The initial culturing step is convenient to lure the fungi out of the plant tissues, and to extract PCR-inhibitor-free DNA directly from fungal hyphae. For specific detection of the fungi, PCR primers were designed to amplify the fungal MAT1-2 gene. The subsequent MTH step using the PCR products as probes can replace the laborious electrophoresis step providing us sequence information and high-throughput screening. Using this method, we have conducted a survey for a few thousands nursery plants every year for three consecutive years, and finally succeeded in eliminating latent infection in the third year of challenge.
Min, Sun-Hong;Cho, Ilsung;Park, Chawon;Jung, Wongyun;Hwang, Won Taek;Kim, Minho;Lee, Kyo Chul;Lee, Yong Jin;Lim, Sang Moo;Hong, Bong Hwan
대한방사성의약품학회지
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제5권2호
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pp.120-128
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2019
Radiopharmaceuticals include therapeutic radiopharmaceuticals and diagnostic radiopharmaceuticals. Therapeutic radiopharmaceuticals are administered to the body and ingested at specific organs to detect radiation emitted from the site and to construct an image to diagnose the disease. Diagnostic radiopharmaceuticals are used to treat diseases by killing cells with radiation emitted from radiopharmaceuticals, such as cancer cells, vascular endothelial cells, arthritis, and Alzheimer's disease. The application possibilities of terahertz imaging technology for the combination of radiopharmaceuticals and molecular imaging medicine are discussed and experimental methods are presented. Terahertz imaging is expected to be a powerful technique because of the effective piercing feasibility, which enables to perform safe and high resolutive imaging. To investigate the response of cell to the terahertz wave, both the pulsed and CW THz wave systems are employed. THz imaging of a rat's paraffin-embedded epithelial cell with tumor is studied in advance.
Fluorine-18 is considered to be the radionuclide of choice for positron emission tomography (PET). Thus, the development of small molecule-based radiopharmaceuticals for use in diagnostic imaging relies heavily on efficient radiofluorination techniques. Until the early 2000s, diaryliodonium salts and aryliodonium ylides were widely employed as labeling precursors to yield aromatic PET radiotracers with cyclotron-produced [18F]fluoride ion. Rapid recent progress in the development of efficient borylation methods has led to a paradigm shift in 18F-labeling methods. In addition, deoxyfluorination has attracted a great deal of interest as an alternative approach to aryl ring activation with 18F-. In this review, methods for radiolabel development are discussed with a specific focus on the progress made in the last 5 years. Other interesting 18F-based protocols are also briefly introduced. New methods for exploiting 18F- are expected to increase the number of 18F-labeling methods, to allow applications in a range of chemical environments.
Label-free, sensitive and selective detection methods with high spatial resolution are critically required for future applications in chemical sensor, biological sensor, and nanospectroscopic imaging. Here I describe the development of Plasmon Resonance Energy Transfer (PRET)-based molecular imaging in living cells as the first demonstration of intracellular imaging with PRET-based nanospectroscopy. In-vivo PRET imaging relied on the overlap between plasmon resonance frequency of gold nanoplasmonic probe (GNP) and absorption peak frequencies of conjugated molecules, which leads to create 'quantized quenching dips' in Rayleigh scattering spectrum of GNP. The position of these dips exactly matched with the absorption peaks of target molecules. As another innovative application of PRET, I present a highly selective and sensitive detection of metal ions by creating conjugated metal-ligand complexes on a single GNP. In addition to conferring high spatial resolution due to the small size of the metal ion probes (50 nm in diameter), this method is 100 to 1,000 folds more sensitive than organic reporter-based methods. Moreover, this technique achieves high selectivity due to the selective formation of Cu2+complexes and selective resonant quenching of GNP by the conjugated complexes. Since many metal ion ligand complexes generate new absorption peak due to the d-d transition in the metal ligand complex when a specific metal ion is inserted into the complex, we can match with the scattering frequency of nanoplasmonic metal ligand systems and the new absorption peak.
Lee, Boeun;Cho, Yong-Hyun;Lee, Yun-Sang;Jeong, Jae Min
대한방사성의약품학회지
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제2권2호
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pp.113-117
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2016
As a neurotransmitter, serotonin plays important roles in brain. It relates various neuropsychiatric disorders such as anxiety, depression, schizophrenia. [$^{11}C$]DASB is a well-known PET tracer for serotonin transporter imaging. In this study, we synthesized [$^{11}C$]DASB in HPLC loop for simple and rapid production. Total synthesis time was about 40 minutes and the radiochemical purities were over 99%. The specific activity was $51.4GBq/{\mu}mole$ (n=16). [$^{11}C$]DASB showed highest uptake in mid-brain that serotonergic nerves are abundant and lowest uptake in cerebellum. In conclusion, we used HPLC loop method for [$^{11}C$]DASB labeling and this method is useful for production of $^{11}C$ labeled PET tracers.
Pretargeting is a two-component strategy often used for tumor targeting to enhance the tumor-to-background ratio in cancer diagnosis as well as therapy. In the multistep strategy, the highly specific unlabeled monoclonal antibodies (mAbs) with the reactive site is allowed to get localized at tumor site first, and then small and fastclearing radiolabeled chelator with counter reactive site is administered which covalently attaches to mAbs via inverse electron demand Diels-Alder reaction (IEDDA). The catalyst-free IEDDA cycloaddition reaction between 1,2,4,5-tetrazines and strained alkene dienophiles aid with properties like selective bioconjugation, swift and high yielding bioorthogonal reactions are emergent in the development of radiopharmaceutical. Due to its fast pharmacokinetics, the in vivo formed radioimmunoconjugates can be imaged at earlier time points by short-lived radionuclides like 18F and 68Ga; it can also reduce radiation damage to the normal cells. Ultimately, this review elucidates the updated status of pretargeting based on antibodies and IEDDA for tumor diagnosis (PET and SPECT) and therapy.
HBV infection is contagious and may be transmitted vertically or horizontally by blood products and body secretions. Over 50% of Iranian carriers have contracted the infection prenatally, making this the most likely route of transmission of HBV in Iran. This study assesses the resistance to Lamivudine in patients with chronic hepatitis B infection using a new ZNA probe Real Time PCR method. To evaluate the effectiveness of Lamivudine therapy for chronic hepatitis B infection, a study was conducted on 70 patients (63 men and 7women), who had received the drug first line. All patients were tested for the presence of HBsAg and HBeAg, the serum ALT level and the HBV DNA load before and after treatment. In all samples resistance to Lamivudine was tested with the ZNA Probe. Our results showed that ZNA Probe Real Time PCR method could detect wild type,YMDD, and its mutants, tyrosine-isoleucine-aspartate-aspartate and tyrosine-valine-aspartate-Aspartate. Among an estimated seventy patients with chronic hepatitis B infection, 18 (25.7%) were resistant to lamivudine. Only one patient was negative for presence of HBS-Ag (5.6%) and two patients were negative for HBe-Ag (11.1%). Real-time PCR with Zip nucleic acid probes is a sensitive, specific and rapid detection method for mutations in the YMDD motif, which will be essential for monitoring patients undergoing Lamivudine antiviral therapy.
The melanocortin 1 receptor (MC1R) plays an important role in regulation of melanin pigment synthesis within mammalian melanocytes. Mutations within the gene encoding MC1R have been shown to explain coat color variations within several mammalian species including cattle. To develope a rapid and accurate method for the identification of Hanwoo meat, we performed a single nucleotide polymorphism (SNP) analysis in Melanocortin 1 receptor (MC1R) gene using TaqMan$^{(R)}$ MGB probe-based real-time PCR. Two specific probes (one for Hanwoo and the other for Holstein and Black angus) were designed. At the 5' end of 2 TaqMan$^{(R)}$ MGB probes, 6-carboxyfluorescein (FAM) was labeled for Hanwoo, and VIC for Holstein and Black angus. As a result, Hanwoo samples showed FAM-positive signal only, whereas other samples showed VIC-positive. This result suggests that the TaqMan$^{(R)}$ MGB probe based real-time PCR technique would be very accurate, easy and reproducible method to discriminate between Hanwoo meat and Holstein/Black angus meat.
Determining the absolute neutrino mass scale and the neutrino mass hierarchy are central goals in particle physics, with important implications for the Standard Model. However, the final answer may come from cosmology, as laboratory experiments provide measurements for two of the squared mass differences and a stringent lower bound on the total neutrino mass - but the upper bound is still poorly constrained, even when considering forecasted results from future probes. Cosmological tracers are very sensitive to neutrino properties and their total mass, because massive neutrinos produce a specific redshift-and scale-dependent signature in the power spectrum of the matter and galaxy distributions. Stringent upper limits on ${\sum}m_v$ will be essential for understanding the neutrino sector, and will nicely complement particle physics results. To this end, we describe here a series of cosmological hydrodynamical simulations which include massive neutrinos, specifically designed to meet the requirements of the Baryon Acoustic Spectroscopic Survey (BOSS) and focused on the Lyman-${\alpha}$ ($Ly{\alpha}$) forest - also a useful theoretical ground for upcoming surveys such as SDSS-IV/eBOSS and DESI. We then briefly highlight the remarkable constraining power of the $Ly{\alpha}$ forest in terms of the total neutrino mass, when combined with other state-of-the-art cosmological probes, leaving to a stringent upper bound on ${\sum}m_v$.
$^{89}Zr$ with the favorable nuclear decay kinetics and chemical properties is an appealing radiometal for its application in immuno-PET using radiolabeled monoclonal antibodies. Rising demand of ultrahigh purity and high-specific activity $^{89}Zr$ has propelled the radiochemist worldwide to develop an overall efficacious method for its promising separation from the target matrix $^{89}Y$. The requirement of elevated radiochemical purity (${\geq}$ 99.99%) has accelerated the efforts since last two decades to achieve higher decontamination and separation factors of carrier free $^{89}Zr$ over $^{89}Y$ using several suitable separation techniques. However, each of the technique has its own pros and cons which prior to its actual medical application needs to be optimized and thoroughly scrutinized to avoid further complications during radiolabelling of the pharmaceuticals. In this short review article we will specifically consider as well focus on the historical development and the recent advances on the radiochemical separation of $^{89}Zr$ from $^{89}Y$ which will be helpful for the separation scientist involved in this area to understand the existing available means and plan the strategy to investigate and develop the novel techniques to overcome the problems involved in the present methods.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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