The root nodules and Glycine max were classified as determinate nodule based on their morphological characteristics, and isolated endosymbiont as a Bradyrhizobium based on its growth rate and single subpolar flagellum. The isolate was similar to B. japonicum USDA110 in utilization of carbon source, growth at 38.deg.C and 2% NaCl, production of $H_{2}$S and especially in the restriction endonuclease digestion pattern of symbiotic genes, allowing them to be placed in sTI group together. The former, however, grew better than the later in broad pH range from 5.0 to 9.5. Infectivity and effectivity of the isolate were confirmed by inoculation of soybean seedlings with the isolates. Characteristics of the reisolated endosymbiont from induced root nodules were identical to those of the first isolate. From these results, it was confirmed that Bradyrhizobium strain isolated from the root nodules of Glycine max was a real symbiont, and was named B. japonicum SNU001.
ATP contents of soybean(Glycine max Merrill) and mungbean (Phaseolus radiatus L.) seeds being germinated with Hoagland solution at $30^{\circ}C$ for 6 days were determined. In pregerminated seed, ATP contents in soybean and mumgbean were 11.4 and 63.0$\mu$g/g fresh seed respectively. During germination, the highest ATP content of soybean seeds was 550% of initial content on 2nd day and that of mungbean was 480% on 1st day after germination. ATP content in cotyledon of soybean and mungbean were increased up to 4th and 1st day after germination respectively, thereafter both were decreased, but those in the root, including the hypocotyl, of both seeds were continuously increased with germination progress.
Wild soybean plants(Glycine ussuriensis) collected from Korea(47 strains) and abroad(41 strains) were grown under field condition and classified according to the growth habit. Seeds were analyzed for protein content. The results were as follows: 1. Wild soybean plants were classified into three groups each by seed size, growth habit of stem, leaf size and flowering time. 2. Seed protein was higher in the strains with large leaves, tendril, stem or late flowering. 3. Glycine gracilis, supposed to be the intermediate species between cultivated and wild soybean(according to the stem growth habit, straight or semitendril, and seed size) was medium in protein content of seeds. 4. The average protein content of Glycine ussuriensis, 43.2%, was highest in comparison with those of others such as G. gracilis, 37.5%, or G. max, 36.2%. 5. One hundred seed weight of Amphicarpaea trisperm, similar to the wild soybean, was almost same as Glycine ussuriensis, but protein content of this species was lower than wild soybeans.
In order to establish efficient plant regeneration from embryogenic suspension cultures of soybean, Glycine max L, we examined the effects of auxin type and concentration, cytokinin type and concentration, and amino acid type and concentration on the growth of embryogenic clumps from induced callus, and the effect of desiccation of mature somatic embryos obtained from these clumps on the frequency of somatic embryo germination. Embryogenic callus was induced from the edge of the cotyledons cultured on MS medium containing 6% sucrose, 40 mg/L 2,4-D, 0.2% gelrite and pH 5.7. The growth of embryogenic clumps was best in early staged, embryogenic callus that was placed in suspension culture of MS medium containing 5 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L asparagine. Single somatic embryos were isolated from the clumps and plated on the same medium for maturation. When the mature single somatic embryos were desiccated for 96 h, somatic embryo germination came up to approximately 90%. The plantlets germinated after embryos desiccation for 2 weeks were transfered to MS medium containing 3% sucrose,0.2% gelrite and pH 5.7.
The dvelopment of leaves in soybean(glycine max cv. yellow grain and glycine max cv. black grain)plant were assessed for the applicability of the plastochron index. The plastochron ages versus time in days were respectively 6.4 days in black grain and 9.6 days in yellow grain. Plots of plastochron indes(pi) versus time were linear, there were two distinct groups of regression line. when a point of intersection in the lines were upper than the reference length, pi was estimated n+(ln Ln-ln LR)/(ln Ln-ln Ln+2) or (n-1)+(ln Ln-1-ln LR)/(ln Ln-1-ln Ln+1) . When a point of intersection in the lines were less than the reference length, pl was estimated n+(ln Ln-ln LR)/(ln Ln-ln Ln+2) or (n-1)+(ln Ln-1-ln LR)/(ln Ln-1-ln Ln+1) . The growth rate of black grain plants analysed by pl was higher than yellow grain plants.
Plastid transformation was attempted with soybean [Glycine max (L.) Merr.] leaves and photoautotrophic and embryogenic cultures by particle bombardment using the transforming vector pZVII that carries the coding sequences for both subunits of Chlamydomonas reinhardtii Rubisco and a spectinomycin resistance gene (aadA). Spectinomycin resistant calli were selected from the bombarded leaves but the transgene was not present, indicating that the resistance was due to mutations. The Chlamydomonas rbcL and rbcS genes were shown to be site-specifically integrated into the plastid genome of the embryogenic cells with a very low transformation efficiency. None of the transformed embryogenic lines survived the plant regeneration process so no whole plants were recovered. This result does indicate that it should be possible to insert genes into the plastid genome of the important crop soybean if the overall methods are improved.
On screening pathogen-resistant soybean, we identified a WRKY type transcription factor named a Glycine max WRKY1 (GmWRKY1). Expression of GmWRKY1 gene was induced in the soybean sprout by Pseudomonas infection. The GmWRKY1 was expressed in all of the tissues with high levels in stems, leaves and developing seeds. The protein Gm WRKY1 contains highly conserved two WRKY DNA-binding domains having two $C_2-H_2$ zinc-finger motif ($C-X_{4-5}-C-X_{22-23}-H-X-H$) in its N-terminal and C-terminal amino acid sequences. In electrophoresis mobility shift assay, the GmWRKY1 protein bound specifically to W-box elements in the promoters of defense related genes. These results demonstrated that GmWRKY1 is one of the soybean WRKY family genes and the plant-specific transcription factors for defense processes.
대두(Glycine max L.) 종자로부터 분리된 렉틴을 토끼에 면역화시켜 렉틴항혈청을 얻었다. 이를 이용한 면역화학적 방법을 사용하여 대두렉팅의 면역화학적 특성과 6개 대두 품종의 종자에서 렉틴의 존재를 조사하였다. Crossed immunoeiectrophoresis한 결과 종자는 4종의 침강선을 보임으로서 렉틴에 4종의 항원성분이 존재함을 보여 주었다. 1% agarose gel을 이용하여 Immunodouble diffusion test한 결과 6개 대두 공시품종 모두 렉틴항체에 대하여 침강선을 나타내었고 푸종간 침강선은 모두 유사한 양상을 보였다. ELISA 방법에 의하여 6개 대두 품종간의 렉틴함량을 조사, 비교한 결과 렉틴함량은 장엽콩>광교>황금콩>백운콩>장백콩=팔달콩 순으로 나타났다. 공시품종의 조자로부터 분리한 렉틴은 모두 토끼 적혈구는 응집시켰으나 Fusarium sp., Alternaria sp., Cuvalaria sp. 등의 곰팡이 포자는 응집시키지 못하였다.
대두(Glycine max)의 ${\beta}$-1,3-glucanase를 분리동정하고 benzyladenine(BA)이 이 효소의 세포내 함량과 활동도에 미치는 영향을 조사하였다. 또 세포벽의 callose함량과 protoplast의 세포벽재생에 미치는 BA의 영향을 조사하여, cytokinin이 식물의 세포벽재생을 촉진하는 기능이 있음을 확인하고 세포벽재생에 있어서 cytokinin의 작용기구를 검토하였다. 대두 ${\beta}-1,3-glucanase$는 21 kD의 polypeptide로 동정되었는데 이 polypeptide의 세포내함량과 효소활성은 BA처리에 의하여 저하되었다. 그리고 callus세포벽의 callose함량과 protoplast의 세포벽재생율이 BA처리에 의하여 증가되었다. 이 결과들은 cytokinin이 세포의 ${\beta}-1,3-glucanase$수준을 저하시켜 callose분해를 억제함으로써 세포벽 재생을 촉진할 수 있음을 보여주었다.
대두(Glycine max L) 자엽의 발아 정도에 따른 부정근 형성능과 자엽 절편의 부정근 형성 배지 처리 시간에 따른 부정근 형성 정도를 조사하였으며 부정근 형성과 관계 있는 발아 및 부정근 유기시의 단백질 변화 양상을 2차원 전기영동법으로 조사하였다. 발아된 자엽의 부정근 형성능은 발아 4일 이후에 높았으며 부정근 형성 배지에서의 부정근 형성은 처리 4일 이후부터 형성되어 6일 이상 처리한 것이 가장 부정근 형성이 높았다. 또한 부정근 형성과 관계 있는 단백질 34개의 단백질 spot를 얻었는데 부정근 형성을 위한 발아 자엽의 주요 단백질은 염기성 단백질 27d이었다. 그리고 부정근 유기시 생성되는 단백질은 염기성의 길 kD, 23 kD 및 33 kD였으며 산성의 27 kD와 29 kD이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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