Sixty four bacterial colonies which were able to oxidize the manganese were isolated from soil samples in Mokcheon and Ochang area. Among them, one bacterial strain was selected for this study based on its higher manganese oxidation, and this selected bacterial strain was identified as Aeromonas sp. MN44 through physiological-biochemical test and analysis of its 16s rRNA sequence. Aeromonas sp. MN44 was able to utilize lactose but did not utilize various carbohydrates as a sole carbon source. Aeromonas sp. MN44 showed a very sensitive to antibiotics such as kanamycin, chloramphenicol, ampicillin, tetracycline and spectinomycin, and heavy metal such as cadmium. But this strain showed a high resistance up to mg/ml unit to heavy metals such as lithium and manganese. Optimal manganese oxidation condition of Aeromonas sp. MN44 was pH 7.4 and manganese oxidation activity was inhibited by proteinase K and boiling treatment. So, we concluded that this factor was protein. The manganese oxidizing factor produced by Aeromonas sp. MN44 was partial purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Toyopearl 650M ion exchange chromatography and Sephadex gel filtration chromatography. Its molecular mass was about 113 kDa.
Concerning about the negative impact of chemical pesticides on human health and the environment has been leading to dramatic increase of research in natural product-based pesticides. An antagonistic bacterium Streptomyces sp. S-1110 was isolated from apple farm soil. The culture filtrate of the strain showed growth inhibition effects to apple pathogenic fungi, Botryosphaeria dothidea, Colletotrichum gloeosporioides and Rhizoctonia solani. The unidentified antibiotic substances from the strain kept antagonistic activity either after heat treatment at $121^{\circ}C$ for 1 h or pH treatment at range of pH 3 - pH 12 for 24 h. The substances also prevented apple fruit from spoiling by inoculated two pathogenic molds, B. dothidea and C. gloeosporioides. These results suggested that the isolated strain would be useful as a biocontrol agent to control apple spoiling occurred from mold.
A direct shear test is classified roughly by one side simple shear test of confining horizontal displacement type and torsional shear test of non-confining one. Direct shear test that has been widely used so far has some problems with test apparatus, testing and the analysis, and in particular that its strength value is everestimated in sandy soils. Also, progressive failure of shearing process happens from shear apparatus restriction and because the shear strain and shear stress are erratic in specimen, we can not define the shear strain value. In the meantime, a simple shear test having advantage of direct shear test is an ideal test method that can get stress-strain relation on shear because it can deliver constant shearing deformation to specimen. However, simple shear test cannot be used practically, because its structure makes tester manufacturing difficult. This paper described a on outline of test apparatus, improvement of test method, and constant pressure test results based on the obtained from improved direct shear apparatus and the standardization of JGS soil testing method.
This study describes isolation and identification of a soil bacterium which is degradable of phosphinothricin and improvement of the isolated strain by using mutagenesis and spheroplast fusion. The experiment was performed to search for a possibility of development of a new strain which is both PPT-degradable and glyphosate-resistant by using interspecies cell fusion between the PPT-degrading bacterium. Pseudornonu.\ puucimohlis and a glyphosate -resistant strain, Pseudornonu.~ cc,pucicl. Auxotrophic mutants were obtained by the treatement of P. puucimohili.\ with ethylmethanosulfate, and used to cell fusion. Lysozyme and EDTA were used to spheroplast formation and regeneration rates :)f the spheroplast were 6.5'%1 in P. pauc.irnohili.\ and 8.8% in P.ci,j~u[,i(lr, espctively. Polyethylenglycol 5.000 was used to cell fusion as fusogen. The fusant\ulcorner F1. F2. F\ulcorner and F4 werc- obtained by the intra- and interspecies cell fusion. The fusant Fl of intraspecies cell fusion was higher to the wild type by 1 I'%l in PPT degrading ability, and the fusant F3 of inierspesis cell fusion developed plyphosatc-resistant and PPI-dcgrading ability which were propertics of two parental strains.
A novel Chryseobacterium sp. JK1 strain producing extracellular protease had been isolated from soil. The largest clear zones were observed on nutrient agar plates supplemented with 1% skim milk at $30-35^{\circ}C$ along with the growth of Chryseobacterium sp. JK1. The cell growth of JK1 strain was maximal at 24 h and maximum protease activity was reached up to 560 unit/ml at the stationary phase in liquid culture. In the presence of maltose, glucose or mannitol in Nutrient broth, cells grew well, but protease were produced poorly with lower production yields of 64-77% than in NB broth only. Similarly, the addition of skim milk, beef extract, yeast extract, malt extract or tryptone showed good growth and poor enzyme production. On the contrary, the addition of $(NH_4)_2HPO_4$ or $(NH_4)_2SO_4$ gave poor growth and good enzyme production of 121-146%.
Radiorespirometric analysis revealed that Pseudomonas sp. strain KKI isolated from a soil contaminated with petroleum hydrocarbons was able to catabolize polycyclic aromatic hydrocarbons such as phenanthrene and naphthalene. The rate and extent of phenanthrene mineralization was markedly enhanced when the cells were pregrown on either naphthalene or phenanthrene, compared to the cells grown on universal carbon sources (i.e., TSA medium). Deduced amino acid sequence of the Rieske-type iron-sulfur center of a putative phenanthrene dioxygenase (PhnAl) obtained from the strain KKI shared significant homology with DxnAl (dioxin dioxygenase) from Spingomonas sp. RW1, BphA1b (biphenyl dioxygenase) from Spingomonas aromaticivorans F199, and PhnAc (phenanthrene diokygenase) from Burkholderia sp. RP007 or Alcaligenes faecalis AFK2. Northern hybridization using the dioxygenase gene fragment cloned from KKI showed that the expression of the putative phn dioxygenase gene reached the highest level in cells grown in the minimal medium containing phenanthrene and $KNO_3$, and the expression of the phn gene was repressed in cells grown with glucose. In addition to the metabolic change, phospholipid ester-linked fatty acids (PLFA) analysis revealed that the total cellular fatty acid composition of KKI was significantly changed in response to phenanthrene. Fatty acids such as 14:0, 16:0 3OH, 17:0 cyclo, 18:1$\omega$7c, 19:0 cyclo increased in phenanthrene-exposed cells, while fatty acids such as 10:0 3OH, 12:0, 12:0 2OH, 12:0 3OH, 16:1$\omega$7c, 15:0 iso 2OH, 16:0, 18:1$\omega$6c, 18:0 decreased.
This study was attempted to select an antagonist against Phytophthora blight of red-pepper caused by Phytophthora capsici. The three strains, A-35, A-67 and A-183 were isolated from the rhizosphere in soil where red-pepper had been cultivated continuously for a long time, and the strain A-83 was estimated to be the strongest antagonist against P. capsici. The A-183 strain was identified as a strain of Pseudomonas sp., showing the maximum antifungal activity, when cultured at $30^{\circ}C$ for 5 days in the potato extract medium(pH 6.5) containing 2.0% mannitol and 0.3% peptone.
Eighty one bacterial strains of parathion degrading bacteria were isolated from soil samples that were contaminated with pesticide in Daejeon area. Among them, one bacterial strain was finally selected in media containing parathion as the sole source of carbon and energy, and this strain was identified as Pseudomonas rhodesiae H5 through physiological and biochemical tests, and analysis of its 16S rRNA sequence. Pseudomonas rhodesiae H5 was able to utilize various carbohydrates but did not utilize sorbose as sole carbon source. Pseudomonas rhodesiae H5 was resistance to ampicillin, spectinomycin, and mitomycin C but sensitive to kanamycin and chloramphenicol. And this strain showed high resistance up to several milligrams of heavy metals such as $BaCl_2$, LiCl, and $MnSO_4$. Optimal growth condition for temperature and pH of P. rhodesiae H5 was 3$0^{\circ}C$, and pH 7.0, respectively. It can be presumed that P. rhodesiae H5 hydrolyzed an organophosphate bond of parathion, forming p-nitrophenol, and then metabolized via ortho-ring cleavage mechanism.
A bacterial strain which was capable of producing extracellular soymilk-clotting enzyme was isolated from soil samples during the course of screening test. The characteristics of the isolated strain K-324-7, indicated that the strain belonged to species of Bacillus cereus. The crude purification of this enzyme was precipitated by salting out with ammonium sulfate of 0.8 saturation. The optimal pH for the enzyme activity was at $6.1{\sim}7.0$ and below $50^{\circ}C$. The optimal culture medium for the production of soymilk-clotting enzyme were consisted of 0.2% glucose, 0.2% peptone, and 0.5% $KH_2PO_4$ with initial pH value of 6.5. The activity of enzyme was maximum when the microbe was cultured for 3 days at $35^{\circ}C$.
A pink-pigmented facultative methylotrophic bacterium, Methylobacterium sp. strain SY1, was isolated from soil through methanol-enrichment culture technique. The isolate was gram-negative, slightly curved rod, and motile by a single polarly inserted flagellum. The colony was smooth, bright pink, and slimy. The guanine plus cytosine content of the KNA was 66%. The cell was obigately aerobic and exhibited both catalase and oxidase activities. Carotenoid pigment and poly-$\beta$-hydroxybutyrate were present. It was found to have three kinds of plasmid with molecular weights 45,000, 38,500 and 23,000. Growth with methanol(0.5%) was fast ($t_{d}$=6.5h) and was optimal at $30^{\circ}C$ and at pH 7.0. The isolate could grow on several sugars, organic acids, amino acids, amines, and alcohols in addition to the methanol. Methanol was found to be assimilated through the serine pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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