Kim Chang-Kil;Oh Jung-Youl;Jee Sun-Ok;Chung Jae-Dong
Journal of Plant Biotechnology
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제5권2호
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pp.115-119
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2003
To determine the appropriate concentrations of nutrients and growth regulators for shoot proliferation and root initiation, several rose hybrid tea cultivars were cultured. Cultured shoot tips and lateral buds from different cultivars proliferated multiple shoots on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0 to 4 mg/L BA and 0 to 0.05 mg/L NAA. The ability of the explants to proliferate shoots and initiate roots was affected by genotype, the nodal position of explant, the strength of MS basal medium and growth regulators used. The buds nearest the apex exhibited the slowest rate of development. Most cultivars had the highest shoot proliferation when cultured on MS medium with 2 mg/L BA and 0.01 mg/L NAA, but the degree varied by cultivars. Root development was enhanced by lowering the concentration of MS salts.
Development of efficient plant regeneration and genetic transformation protocols (using the Particle Inflow micro-projectile Gun and the shoot-tips as target tissue) of Sorghum bicolor (L.) Moench in terms of expression of the reporter gene, $\beta$-glucuronidase(uidA) is reported here. Two Indian cultivars of sorghum were used in the study, viz. M-35-1 and CSV-15. Plant regeneration was achieved from one-week-old seedling shoot-tip explants via multiple-shoot-clumps and also somatic embryos. The multiple-shoot-clumps were produced on MS medium containing BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$), with biweekly subculture. Somatic embryos were directly produced on the enlarged dome shaped expansive structures that developed from shoot-tip explants (without any callus formation) when cultured on MS medium supplemented both with BA (0.5, 1.0 or 2.0 mg/$L^{-1}$) and 2,4-D (0.5 mg/$L^{-1}$). Whereas each multiple-shoot-clump was capable of regenerating more than 80 shoots via an intensive differentiation of both axillary and adventitious shoot buds, the somatic embryos were capable of 90% germination, plant conversion and regeneration. The regenerated shoots could be efficiently rooted on MS medium containing 1.0mg/$L^{-1}$ IBA and successfully transplanted to the glasshouse and grown to maturity with a survival rate of 92%. The plant regeneration efficiency of both the genotypes were similar. After the micro-projectile bombardment, expression of uidA gene was determined by scoring blue transformed cell sectors in the bombarded tissue by an in situ enzyme assay. The optimal conditions comprising a helium pressure of 2200 K Pa, the target distance of 11 cm with helium inlet fully opened and the use of osmoticum have been defined to aid our future strategies of genetic engineering in sorghum with genes for tolerance to biotic and abiotic stresses.
The study was carried out to clarify reasonable production of healthy seedling, optimal Pot depth, and appropriate transplanting time, which can be deduced from understanding of seedling quality. Seedling quality results from growth of root and shoot, morphology and distribution of root system under influence of Pot depth during seedling growing period. Stem height, shoot dry weight, leaf area and leaf number were increased in proportion to depth of pots. Growth of shoot and root during seedling growing period showed the most dramatic development between 20th and 25th day after temporary planting. Root number increased as pot depth decrease and total root length and dry weight increased as pot depth increase. In 5cm pot, relative multiplication rate was higher and mean extension rate was lower than other depth of Pot. The limitation of pot volume in which rhizosphere was located enhance the development of roots of second and third order. At 20th days after temporary Planting root distribution was relatively uniform in length and development of adventitious root on stem base was poor as Pot depth decreased.
An endophytic bacterial strain, Arthrobacter humicola YC6002, was isolated from a surface sterilized root of Korean turf grass (Zoysia japonica) collected from Jinju, Korea. This strain showed inhibitory effect on germination and shoot growth of radish. The inhibition of germination and shoot growth of radish seeds varied depending on the age of culture and the temperature at which it was incubated. The culture filtrate of 1/10-strength Tryptic Soy Broth medium, incubated for 48 hours at $30^{\circ}C$, showed the highest inhibitory effect on radish seed germination and shoot growth (92% inhibition as compared to control). The active compound with seed germination and shoot growth inhibition was purified and identified as 3-phenylpropionic acid. The purified compound had 53% and 93% inhibitory effect on seed germination and shoot growth of radish for 500 and 1000 ppm solutions, respectively.
Nodule development was regulated partially by host plant factors originating in the shoots and roots. This study was performed to identify the origin of the factors regulating nodulation in supernodulating soybean (Glycine max [L.] Merr.) mutant 'SS2-2' which was isolated recently from ethyl methanesulfonate (EMS) mutagenesis of 'Sinpaldalkong 2'. Self- and reciprocal-grafts were made among three soybean genotypes which consisted of two supernodulating mutants, SS2-2 and 'nts 382', and a normal nodulating Sinpaldalkong 2. Self-grafted supernodulating mutants were characterized by greater nodule number, nodule dry weight, and $C_2$H$_2$ reduction activity than self-grafted wild types. They were also characterized by relatively higher nodule to root dry weight. Significant shoot genotypic effects were observed on nodule number, nodule dry weight, and $C_2\;H_2$ reduction activity per plant, whereas varying root genotypes had no effects. From this result, it is surmised that supernodulating characters are controlled by a graft-transmissible shoot factor, and mutant SS2-2 may have similar nodulation mechanism to the former supernodulating nts 382. In all grafts, both supernodulating mutants and Sinpaldalkong 2 maintained the similar balance between above ground and below ground parts regardless of significant differences in partitioning of dry matter into root and nodule between supernodulating mutants and Sinpaldalkong 2.
The aim of this study was to investigate changes in 7 nutritional components (fatty acid, protein, fat, ash, total dietary fiber (TDF), $\gamma$-aminobutyric acid (GABA), and $\gamma$-oryzanol) of paddy rice (PR) and brown rice (BR) throughout the germination process, as measured at different shoot lengths (10 mm, 20 mm, and 30 mm). With the increase of shoot length, the nutritional components' concentrations increased, as compared to the concentrations measured before germination. Moreover, BR exhibited higher GABA, $\gamma$-oryzanol, and protein than PR. Among the components, TDF, GABA, and $\gamma$-oryzanol showed significant concentration differences throughout germination, while the others exhibited only slight variations. In particular, GABA and $\gamma$-oryzanol were predominantly increased in grains of 10 mm shoot length. These compounds might prove to be important factors from germinated rice. Additionally, the germinated cultivar 'Keunnun' might also prove to be a very important food source, owing to its high GABA and $\gamma$-oryzanol contents. These results suggest that variations in nutritional components related to the increase of shoot length may prove to be important when considering the beneficial aspects of rice on human health.
Rosa rugosa is a medicinal, ornamental, and edible plant native to Eastern Asian countries, including Korea, Japan, and China. The aim of this study was to establish a system for biomass production and secondary metabolite accumulation during in vitro culture and acclimatization of Rosa rugosa. The highest rate of multiple shoot proliferation was achieved with $8.8{\mu}M$ benzyladenine (BA) (83.3%). However, the number of shoots (14.4 per explant) at $4.4{\mu}M$ BA was higher than that at $8.8{\mu}M$ BA. Compared to BA, a combination of thidiazuron (TDZ) and indole butyric acid (IBA) exhibited significantly lower shoot induction, with only 50.0~79.2% and 4.2~16.7% relative shoot formation, respectively. During acclimatization, shoots were sampled every week and their total phenolic contents were analyzed. Among various growth factors, fresh weight showed the most dramatic increase from the 3rd week (88.0 mg/plant) to 4th week (132.7 mg/plant). Total phenolics and flavonoids contents were the highest at $1^{st}$ week of acclimatization. Depending on developmental stages, total phenolics and flavonoids contents were higher in 1-yr-old shoots grown ex vitro than in those of older field-grown or in vitro-grown plants. Amongst different ages of field grown plants, 6-year-old plants, the oldest in this study, showed the lowest content in total phenolics.
In this study, cryopreservation by droplet-vitrification was applied to pear (Pyrus spp.) germplasm. We focused on the development and assessment of various strategies for the selection of suitable tissue, osmoprotection, and dehydration. We also evaluated post-thaw recovery of cryopreserved explants by droplet-vitrification. Preferentially, we tested the effects of preculture and loading treatments to determine which tissues were more suitable, either the apical shoot tips or the axillary buds. Apical shoot tips showed the better regrowth rate than in vitro axillary buds. The most effective techniques for cryopreservation were as follows. Shoots from in vitro seedlings which had been cultured for about 5-6 weeks were cold-hardened at 4℃ for one week, excised shoot tips were precultured on liquid MS medium including 0.3 M sucrose for 31 hours and 0.7 M sucrose for 17 hours, osmoprotected in loading solution (LS) for 40 min, and then cryoprotected in dehydration solution (PVS3) for 90 min. In addition, we found that regrowth rates of explants on regrowth medium after exposure to liquid nitrogen (LN) were higher than those on MS medium. Results indicated that the highest regrowth percentage was 95.6% for 'Bartlett' cultivar and 68.9% for 'BaeYun No.3' cultivar. Consequently, apical shoot tips of two pear cultivars, 'Bartlett' (P. communis) and 'BaeYun No.3' (P. pyrifolia), were successfully cryopreserved by droplet-vitrification. Results of this study show that the enhanced droplet-vitrification method described in the present study could be used as an effective means for long-term storage of pear genetic resources.
In order to establish in vitro propagation method of sundew, Drosera rotundifolia L., the effects of MS medium concentration, cytokinin type and concentration, pH, and auxin type and concentration on shoot proliferation and root formation were investigated using shoots at 3 month after seed germination. The highest shoot production was obtained with the half strength of MS ($\frac{1}{2}$ MS) medium than with any other strength of MS medium tested. Addition of kinetin or BA in $\frac{1}{2}$ MS medium was strongly suppressed shoot proliferation. The suppression of shoot proliferation was more effective in BA-supplemented $\frac{1}{2}$ MS medium than kinetin-supplemented. The optimum pH of the media for shoot proliferation was pH 5.7-6.7. Shoots were subcultured in $\frac{1}{2}$ MS medium supplemented with 0.5mg/L 2,4-D for rooting every 8 weeks. All subcultured shoots produced extensive root systems after 5 to 6 week culture. Plantlets after root development were planted in plastic pots filled with moss. The survival rate of plantlets was almost 100%. On subculturing every 8 weeks, hundreds of the plants were propagated from a single plant within a year.
Plant biotechnology involving genetic modification has been rather controversial. However, the major issues related to safety are being addressed by continued improvements in technology. Some of the related facts will be highlighted to set the tone for a scientific discussion on the possibilities of using the technology for crop improvement. Our main research interest is to understand the molecular regulation of shoot bud regeneration in plant tissue culture, which is essential for crop improvement by biotechnology. We have isolated and characterized some genes that are associated with adventitious shoot regeneration. These include a MADS-box cDNA (PkMADS1) from paulownia kawakamii, which regulates vegetative shoot development and in vitro shoot regeneration from leaf explants. Another gene we have characterized from petunia codesfor a cytokinin binding protein (PETCBP). Preliminary functional analysis of this gene indicated that this also affects adventitious shoot bud initiation. Also, the antisense suppression of this gene in petunia causedexcessive branching. Results from our work and selected other publications will be used to highlight the possibilities of manipulation of such genes to improve crop species.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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