Kim, S.W.;Baik, C.S.;Kim, J.M.;Suh, B.H.;Lee, J.H.
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.17
no.2
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pp.197-202
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1990
Early studies demonstrated that seminal plasma has a factor which inhibits fertilizing ability in a reversible manner. The factor can be precipitated by centrifugation at 104000g for 18 hr. The precipitate was applied to a CM cellulose column and eluted with high salt concentration. This fraction possessed antifertilizing activity was applied to a Sephacryl S-200 column according to a modification of the method of Reddy et al. Using such inhibition of in vitro fertilization ability as an assay, we have carried our experiments to purified the factor. When the factor was added to IVF medium, 70-80% of fertilization was inhibited.
Leucosia anatum, also known as the pebble crab, is a species of crab that belongs to the family Leucosiidae. Crabs are the most conspicuous and abundant components of the epibenthic macrofauna of the mangrove ecosystems. The present investigation was carried out with the objective of enlightening the reproductive system of L.anatum through histological and histochemical studies. Histological analysis of the epithelial cells of vas deferens, the luminal size and shape of the vas deferens was carried out, since the spermatophore material is secreted and molded by the vas deferens. Histochemical analysis of the blood plasma, testis, proximal vas deferens, middle vas deferens, distal vas deferens, seminal plasma and spermatophore was done to reveal the possible transformation of their secretory materials into the spermatophoric components. Biochemical components present in the blood plasma, testis, proximal vas deferens (PVD), median vas deferens (MVD) and distal vas deferens (DVD) regions seminal plasma and spermatophore of pebble crab were analyzed to find out the quantity of free sugars, proteins, and fats. Thus the current study focuses on the histological and histochemical analysis of Testis and Vas Deferens and their secretions in L.anatum.
${\beta}$-Glucuronidase from bull seminal plasma was partially purified by $(NH_4)_2SO_4$fractionation, two successive DEAE-cellulose columns, isoelectric focusing (pH 4 to 6) and Gel filtration on Sephadex G-200. Only one form of ${\beta}$-glucuronidase was obtained by isoelectric focusing at pH 5.13. Highly purified ${\beta}$-glucuronidase had specific activity of 34 units/mg protein and showed one major and some minor contaminants by disc gelk electrophoresis. The enzyme showed maximum activity at pH 5.2 and at $48^{\circ}C$. The enzyme was completely inhibited by 1,4 saccharo-${\alpha}$-lactone (5 mM). Albumin and 0.15 M NaCl increased the ${\beta}$-glucuronidase activity. Km of ${\beta}$-glucuronidase using phenolphthalein mono-${\beta}$-glucuronic acid as substrate was 2.9 mM and Vmax was $0.8{\mu}$mole/min. The enzyme appeared to be a glycoprotein by its binding to concanvalin·A. Rabbit and human sperm-acrosomal extracts and seminal plasma showed high ${\beta}$-glucuronidase activity.
Avian spermatozoa are characterised by high concentrations of polyunsaturated fatty acids (PUFAs), in particular docosatetraenoic (DTA, 22:4n-6) and arachidonic (AA, 20:4n-6) acids. As a result they are vulnerable to lipid peroxidation, which is considered to be an important factor of male infertility. Antioxidant systems are expressed in spermatozoa and seminal plasma and build three major levels of antioxidant defense. The first level is based on the activity of superoxide dismutase (SOD) which is, in conjunction with glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase and metal-binding proteins, responsible for prevention of free radical formation. The second level of defence is responsible for prevention and restriction of chain reaction propagation and includes chain-breaking antioxidants such as vitamin E, ascorbic acid, glutathione and some others. The third level of antioxidant defence deals with damaged molecules, repairing or removing them from the cell and includes specific enzymes such as lipases, proteases, DNA repair enzymes etc. In the review, profiles of PUFAs and the two first lines of antioxidant defence in avian spermatozoa are characterised. Dietary manipulation of the breeder's diet (PUFA, vitamin E and selenium) as an effective means of modulating fatty acid composition and antioxidant system is also considered. Antioxidant properties of seminal plasma and efficiencies of inclusion of antioxidants into semen diluents are also characterised.
The comparison of the chemical properties of semen of black porgy Acanthopagrus schlegelii long-term acclimated reared in freshwater (BFW) and seawater (BSW) with sperm activity of salinity and ion composition. The chemical properties of seminal plasma on BFW of the factors that most there was not significant difference in the BSW. However, osmolality in seminal plasma of BFW and BSW was $307.0{\pm}4.6$ and $337.3{\pm}10.1$ mOsm/kg, respectively, where BFW showed significant lower concentration in contrast to BSW. Salinity effect on sperm motility of BFW and BSW in 0 psu solution, no sperm motility was observed, whereas in 10 psu solution, both BFW and BSW sperms showed low motility and short time post sperm activation. However, diluted in 20 and 32 psu solutions, highest motility and long time post sperm activation were observed in BFW and BSW sperm. SAI of BFW and BSW varied in depend on the osmolality regardless of ion kind and it showed the highest value in the similar osmolality of artificial seawater (956 mOsm/kg). Accordingly, even in sperm released from BFW, factors initiating sperm motility are determined by osmolality.
This experiment was carried out to investigate the effects of osmolarity of thawing diluents, seminal plasma added in thawing diluents on the sperm viability and the effects of thawing temperature, the temparature of the thawing diluents on the sperm viability and acrosomal morphology of boar spermatozoa by the straw method. The result obtained were summarized as follows: 1. The sperm viablilty after thawing of the frozen semen was shown greater in the high osmolarity(392~492mOsm) than low osmolarity(300mOsm) in thawing diluent. The added levels of seminal plasma in thawing diluent did not affect the viability of frozen-thawed boar semen. 2. In terms of thawing temperature, the sperm viability was shown higher in the frozen semen thawed at 5$0^{\circ}C$ for one min. (p<0.01) than those thawed at 2$0^{\circ}C$ or 37$^{\circ}C$ for one min. The sperm viability was not significant at the diluent temparature of 2$0^{\circ}C$or 37$^{\circ}C$ after thawing: but the sperm viability was higher in thawing diluent at 2$0^{\circ}C$ than in that at 37$^{\circ}C$. However, the effects of thawing temperature and diluent solution on normal acrosomal rate were not significant. 3. Cleavage rates of oocytes fertilized with frozen semen were 46.4% and 43.3%, respectively, which were thawed at 5$0^{\circ}C$ for one min. and then diluted in mBTS medium at 2$0^{\circ}C$or 37$^{\circ}C$. To sum up, the sperm viability was shown greater at the high of thawing diluents of frozen boar semen. In terms of thawing conditions, the sperm viability was shown greater, when semen was thawed at a high temperature for a short time and then diluted at the same temperature as that in the straw.
Objective: This study investigated the effects of 5-aminolevulinic acid (5-ALA) on the motility parameters, mitochondrial membrane depolarization, and ATP levels in chicken sperm. Methods: The pooled semen from Barred Plymouth Rock males was used. In the first experiment, the semen was diluted 4-times with phosphate-buffered saline (PBS (-)) containing various concentrations (0, 0.01, 0.05, and 0.1 mM) of 5-ALA, and then the sperm motility parameters after incubation were evaluated by computer-assisted sperm analysis (CASA). In the second experiment, the semen was diluted 4-times with PBS (-) containing 0.05 mM 5-ALA, and then sperm mitochondrial membrane depolarization and ATP levels after 1.5 h of incubation were analyzed with the MitoPT® JC-1 Assay and ATP Assay kits, respectively. In the third experiment, the semen was removed from the seminal plasma and resuspended with the mediums of PBS (-), PBS (-) supplemented with CaCl2 and MgCl2 (PBS (+)) + 5-ALA, PBS (+) + caffeine, and PBS (+) + caffeine + 5-ALA. Then, the sperm motility parameters after incubation were evaluated by CASA. In the last experiment, the semen was treated with the mediums of PBS (-), PBS (-) + 5-ALA, 5.7% glucose, 5.7% glucose + 5-ALA after removing the seminal plasma, and then the sperm motility parameters were evaluated by CASA. Results: The addition of 0.05 mM 5-ALA significantly increased the chicken sperm motility, progressive motility, linearity, average path velocity, curvilinear velocity, straight-line velocity, and the wobble. The sperm mitochondrial membrane depolarization was also increased by the 5-ALA treatment. The 5-ALA treatment decreased the sperm ATP levels. Both the caffeine treatment and glucose treatment decreased the sperm motility during incubation period. Conclusion: 5-ALA might increase sperm mitochondrial membrane depolarization to utilize the ATP for enhancing sperm movement.
El-Ratel, Ibrahim Talat;Attia, Kandil Abdel Hai;El-Raghi, Ali Ali;Fouda, Sara Fikry
Animal Bioscience
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v.34
no.5
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pp.844-854
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2021
Objective: The potential of extra virgin olive oil (EVOO), betaine (BET), and ginger (GIN), as natural antioxidants, in reducing negative effects of heat stress on physiological responses, antioxidant capacity, semen quality and fertility of bucks under heat stress were investigated. Methods: Forty adult Animal Production Research Institute line rabbit bucks were distributed randomly into four experimental treatments of ten rabbits each. The first treatment was fed the commercial pellet diet (CPD) without supplementation and served as a control. The other three treatments were fed CPD supplemented with EVOO (300 mg), BET (1,000 mg), and GIN (200 mg) per kg diet for 3 consecutive months during the summer season. Results: Supplementation of EVOO, BET, or GIN improved (p<0.05) the sexual desire, progressive motility, vitality, intact acrosome and membrane integrity, sperm cell concentration, sperm outputs and fertility. Seminal plasma total proteins, globulin, total antioxidant capacity, glutathione and glutathione S-transferase, and initial fructose increased (p<0.05), while total lipids, aspartate and alanine aminotransferases and malondialdehyde decreased (p<0.05) compared with the control. In comparing the natural antioxidants treatments, GIN evoked the largest improvement. Conclusion: The inclusion of GIN (200 mg/kg diet) appeared to improve the sexual desire, semen quality and oxidative stress of bucks. This may be a beneficial supplement for the management of rabbit bucks used in natural mating or artificial insemination.
Semen quality was compared between the local Katjang and the cross-bred (local Katjang ♀ ${\times}$ German Fawn ♂) bucks. There were on significant genotypic differences in semen characteristics of concentration (first ejaculate : $6.19{\pm}1.30$ -versus $6.33{\pm}1.40{\times}10^9/ml;$second ejaculate: $5.82{\pm}1.10$ - versus $5.68{\pm}1.45{\times}10^9/ml$, for Katjang and the cross-breds, respectively), percentage live (first ejaculate: $77.61{\pm}1.33%$ versus $77.81{\pm}0.53%$; second ejaculate: $81.97{\pm}1.59%$ versus $82.74{\pm}0.96%$, for Katjang and cross-breds, respectively) and percentage of normal sperms (first ejaculate: $12.54{\pm}3.88%$ versus $26.45{\pm}3.83%$; second ejaculate: $38.68{\pm}3.65%$ versus $28.54{\pm}4.38%$, for Katjang and cross-breds, respectively), with the exception of seminal volume and sperm motility. Means of all variables were within the values reported for other goat breeds, In contrast, the differences in semen characteristics between the first and second ejaculations of both genotypes were more distinct, the second ejaculations always had more volume, more normal sperms and better sperm motility but less sperm concentrations. Removing the seminal plasma and replacing it with tris-citrate buffer greatly prolonged the viability of sperms of both genotypes when stored at $5{^{\circ}C}$. Sperm motility seens to be a good indicator of sperm viability. However, the sperms of the corss-bred bucks withstood the washing process better and their swimming abilities were superior ($8.12{\pm}0.46mm/min$) when compared to those of the local Katjang breed ($5.42{\pm}0.49mm/min$). The higher content of calcium ions in their seminal plasma (first ejaculate: $10.5{\pm}0.8$ versus $10.6{\pm}0.8mg/100ml$;second ejaculate: $15.3{\pm}0.8$ versus $16.1{\pm}0.8mg/100ml$, for Katjang and cross-breds, respectively) means that in natural matings the sperms of the cross-breds would be at an advantage compared to those of the local Katjang, since calcium ions reportedly initiate acrosomal reactions.
Physicochemical changes of milt during the spermiation period were investigated in black seabream (Acanthopagrus schlegeli) reared in recirculating seawater system. The spermiation period for the milt collection in cultured brood stock was from 11 April to 4 June. During the spermiation period, average milt volume (ml/100 g body weight) was $0.70{\pm}0.33\;ml$ and maintained high level from 2 May to 4 June. The total number of stripping spermatozoa per 100 g body weight reached the maximum value $(3.32{\times}10^{10})$ in 9 May, then decreased rapidly thereafter. Spermatozoa concentration per ml reached the minimum value in 2 May. There was no change in spermatocrit for the spermiation period. Total protein, total lipid, glucose and Na concentration in spermatozoa and seminal fluid were lower than those in plasma. Total protein, total lipid and K concentration in spermatozoa were higher than those in seminal fluid. The glucose concentration in spermatozoa and seminal fluid in April and May were significantly higher than those in June.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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