Auxin-producing antagonistic bacterium K11, which can inhibit Phytophtora capsici, was isolated from a local red-pepper field soil in Gyeong-buk. In order to check for additional PGPR(plant growth promoting rhizobacterium) functions of the strain K11, we confirmed siderophore and cellulase productions by CAS (chrome azurol S) blue agar and CMC plate with congo red, respectively. The strain K11 was identified as Bacillus licheniformis with 98% similarity on 16s rDNA comparison and Biolog analyses. B. licheniformis K11 promoted mung bean adventitious root induction and enhanced root growth of mung bean (160%), pea (150%), and Chinese cabbage (130%), Also, B. licheniformis K11 was able to effectively suppress (63%) P. capsici causing red-pepper blight in the pot in vivo test. Therefore, we could select a triple-functional PGPR which has auxin, siderophore, and cellulase producing ability for effective crops production in organic farming.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.100.2-101
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2003
The global regulator, GacS (global antibiotic and cyanide sensor kinase), was required for the increased resistance to hydrogen peroxide occurring as cultures of the rhizobacterium, P. chlororaphis O6, matured. Specific stationary-phase peroxidase and catalase isozymes were absent in the GacS mutant, whereas a manganese-superoxide dismutase isozyme was expressed earlier and to a great extent than wild type. In the wild type cell, transcript accumulation of rpoS was higher in late logarithmic-phase cells than cells from mid logarithmic- or stationary-phase. Transcripts from rpoS in the GacS mutant were reduced in each of these growth phases compared to the wild type expression. The down stream sequence from rpoS lacked sequences encoding a small RNA, rsmZ, found in other pseudomonads and implicated in control of genes activated by the GacS system. These findings suggest that GacS-mediated regulation of RpoS plays role in control of oxidative stress in P. chlororaphis O6 by as yet an unknown mechanism.
A group of beneficial plant bacteria has been shown to increase crop growth referring to as plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR). PGPR can decrease plant disease directly, through the production of antagonistic compounds, and indirectly, through the elicitation of a plant defense response termed induced systemic resistance (ISR). While the mechanism of PGPR-elicited ISR has been studied extensively in the model plant Arabidopsis, it is less well characterized in crop plants such as pepper. In an effort to better understand the mechanism of ISR in crop plants, we investigated the induction of ISR by Bacillus cereus strain BS107 against Xanthomonas axonopodis pv. vesicatoria in pepper leaves. We focused on the priming effect of B. cereus strain BS107 on plant defense genes as an ISR mechanism. Of ten known pepper defense genes that were previously reported to be involved in pathogen defense signaling, the expression of Capsicum annum pathogenesis-protein 4 and CaPR1 was systemically primed by the application of strain BS107 onto pepper roots confirming by quantitative-reverse transcriptase PCR. Our results provide novel genetic evidence of the priming effect of a rhizobacterium on the expression of pepper defense genes involved in ISR.
An auxin-producing bacterium (AMT-54) was isolated from ginseng cultivating soil of Geumsan area. The isolate AMT-54 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA) which is one of auxin hormone by TLC analysis. When the concentration of IAA was assessed by performing HPLC quantitative analysis, the maximal 457ppm of IAA was detected from the culture filtrate after culturing in R2A broth containing 0.1% tryptophan for 24h at $35^{\circ}C$. The molecular weight of the main peak obtained by LC-mass analysis was correspondent well to 175, that of IAA. The strain AMT-54 was identified as a novel species belongs to Klebsiella mobilis by a chemotaxanomic and phylogenetic analysis. To investigate the growth promoting effect of crop, when the culture broth of K. mobilis AMT-54 was infected onto seed pot of mung bean, the adventitious root induction and root growth of mung bean were 3.3times higher than control.
Root discs of 4-year-old ginseng, Panax ginseng C. A. Meyer, were inoculated with the higher($10^8$ colonyforming units(CFU)/ml) and lower($10^6\;or\;10^5$ CFU/ml) initial inoculum levels of a plant-growth promoting rhizobacterium(PGPR), Paenibacillus polymyxa GBR-1 to examine rot symptom development and bacterial population changes on the root discs. At the higher inoculum level, brown rot symptoms developed and expanded on the whole root discs in which the bacterial population increased continuously up to 4 days after inoculation. In light and electron microscopy, ginseng root cells on the inoculation sites were extensively decayed, which were characterized by dissolved cell walls and destructed cytoplasmic contents. However, no rot symptoms were developed and the bacterial population increased only during the initial two days of inoculation at the lower inoculum level($10^6$ CFU/ml) of P. polymyxa GBR-1. At the lower inoculum level($10^5$ CFU/ml), boundary layers with parallel periclinal cell divisions, structurally similar to wound periderm, were formed internal to the inoculation sites, beneath which the cells were intact containing numerous normal-looking starch granules and no disorganized cell organelles, suggesting that these structural features may be related to the suppression of symptom development, a histological defense mechanism.
Plants have the ability to acquire an enhanced level of resistance to pathogen attack after being exposed to specific biotic stimuli. To obtain plant growth-promoting rhizobacteria inducing resistance against cucumber anthracnose by Colletotrichum orbiculare, more than 800 strains of rhizobacteria were screened in the greenhouse. Among these strains, Bacillus amyloliquefaciens solate EXTN-1 showed significant disease control efficacy on the plants. Induction of pathogenesis-related(PR-la) gene expression by EXTN-1 was assessed using tobacco plants transformed with PR-1a::$\beta$-glucuronidase(GUS) construct. GUS activities of tobacco treated with EXTN-1 and salicylic acid-treated transgenic tobacco were significantly higher than those of tobacco plants with other treatments. Gene expression analyses indicated that EXTN-1 induces the accumulation of defense-related genes of tobacco. The results showed that some defense genes are expressed by the treatment with EXTN-1 suggesting the similar resistance mechanism by salicylic acid.
The GacS/GacA system in the root colonizer Pseudomonas chlororaphis O6 is a key regulatory system of many traits relevant to the plant probiotic nature of this bacterium. The work in this paper elucidates proteins using proteomics approach in P. chlororaphis O6 under the control of the cytoplasmic regulatory protein, GacA. A gacA mutant of P. chlororaphis O6 showed loss in production of phenazines, acyl homoserine lactones, hydrogen cyanide, and protease, changes that were associated with reduced in vitro antifungal activity against plant fungal pathogens. Production of iron-chelating siderophore was significantly enhanced in the gacA mutant, also paralleling changes in a gacS mutant. However, proteomic analysis revealed proteins (13 downregulated and 7 upregulated proteins in the mutant compared to parental strain) under GacA control that were not apparent by a proteomic study of a gacS mutant. The putative identity of the downregulated proteins suggested that a gacA mutant would have altered transport potentials. Notable would be a predicted loss of type-VI secretion and PEP-dependent transport. Study of mutants of these GacA-regulated proteins will indicate further the features required for probiotic potential in this rhizobacterium.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.17
no.1
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pp.11-18
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1997
This study was to provide the basic data in improving protoplast formation and regeneration of antagonistic bacteria against phytopathogenic fungi and pest. The antagonistic rhizobacterium, BS 101, against Rhizoctonia solrmi and Fusurium oxyspomm was isolated and identified as Bacillus subtilis. Another bacterium for protoplast formation and regeneration was B. thuringiensis subsp. kurstcJtiHD-l (BT 37669) which have insectcidal toxin in the orders Coleopteria, Dipteria etc.. Auxotrophic mutants, BS 1013 and BT 69, were isolated by treating with NTG 300 ug/ml for 40 min. at $37^{\circ}C$, and with NTG 300 ug/ml for 30 min. at $37^{\circ}C$, respectively. The BS 1013 and BT 69 were converted to protoplas by treating with lysozyme 300 ugh1 for 30 min. at 37C, and lysozyme 9 mglml for 60 min. at $37^{\circ}C$, respectively. The fequencies of the protoplast formation of BS 1013 and BT 69 were 90.00 and 92.83% respectively, after 1~2 day at $37^{\circ}C$. The regeneration kequencies of the protoplasts BS 1013 and B T 69 were 0.52 and 0.10%, respectively, after 4~6 days at $37^{\circ}C$.
Oh, Sang A;Kim, Ji Soo;Park, Ju Yeon;Han, Song Hee;Dimkpa, Christian;Anderson, Anne J.;Kim, Young Cheol
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.3
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pp.323-329
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2013
The stationary-phase sigma factor, RpoS, influences the expression of factors important in survival of Pseudomonas chlororaphis O6 in the rhizosphere. A partial proteomic profile of a rpoS mutant in P. chlororaphis O6 was conducted to identify proteins under RpoS regulation. Five of 14 differentially regulated proteins had unknown roles. Changes in levels of proteins in P. chlororaphis O6 rpoS mutant were associated with iron metabolism, and protection against oxidative stress. The P. chlororaphis O6 rpoS mutant showed increased production of a pyoverdine-like siderophore, indole acetic acid, and altered isozyme patterns for peroxidase, catalase and superoxide dismutase. Consequently, sensitivity to hydrogen peroxide exposure increased in the P. chlororaphis O6 rpoS mutant, compared with the wild type. Taken together, RpoS exerted regulatory control over factors important for the habitat of P. chlororaphis O6 in soil and on root surfaces. The properties of several of the proteins in the RpoS regulon are currently unknown.
The plant growth-promoting rhizobacterium Ochrobactrum lupini KUDC1013 elicited induced systemic resistance (ISR) in tobacco against soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. We investigated of its factors involved in ISR elicitation. To characterize the ISR determinants, KUDC1013 cell suspension, heat-treated cells, supernatant from a culture medium, crude bacterial lipopolysaccharide (LPS) and flagella were tested for their ISR activities. Both LPS and flagella from KUDC1013 were effective in ISR elicitation. Crude cell free supernatant elicited ISR and factors with the highest ISR activity were retained in the n-butanol fraction. Analysis of the ISR-active fraction revealed the metabolites, phenylacetic acid (PAA), 1-hexadecene and linoleic acid (LA), as elicitors of ISR. Treatment of tobacco with these compounds significantly decreased the soft rot disease symptoms. This is the first report on the ISR determinants by plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) KUDC1013 and identifying PAA, 1-hexadecene and LA as ISR-related compounds. This study shows that KUDC1013 has a great potential as biological control agent because of its multiple factors involved in induction of systemic resistance against phytopathogens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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