• 제목/요약/키워드: random amplification of polymorphic DNA

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Bombyx mori세포주와 Spodoptera frugiperda세포주의 분자생물학적 표식자 (The Molecular Biological Marker in Bombyx mori and Spodoptera frugiperda Cells)

  • 진병래;제연호;강석권
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제38권1호
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    • pp.53-56
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    • 1996
  • 곤충세포주로 널리 이용되고 있는 Sf 세포주와 Bm 세포주의 분자생물학적 표식자를 탐색하기 위하여, 총 세포 단백질의 SDS-PAGE와 genomic DNA를 RAPD(Random Amplification of Polymorphic DNA) 방법으로 분석하였다. 그 결과, 총 세포 단백질 및 genomic DNA, 패턴에서 두 세포주를 뚜렷하게 구별할 수 있는 밴드를 탐색하였으며, 이들은 유용한 분자 생물학적 표식자로 이용될 수 있을 것이다.

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RAPD를 이용한 고추(Capsicum annuum) 유전자원의 분류 (Classification of Capsicum annuum Germplasm Using Random Amplified Polymorphic DNA)

  • 남승현;최근원;유일웅
    • 원예과학기술지
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    • 제16권4호
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    • pp.503-507
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    • 1998
  • 본 연구는 RAPD표지를 이용하여 국내외에서 수집된 고추 유전자원들간의 유전적관계를 평가하고자 수행되었다. Random primer를 이용한 고추의 PCR반응은 $MgCl_2$ 3mM, Taq. DNA polymerase 1.5U, 주형 DNA 10ng, dNTPs $200{\mu}M$, random primer 200nM 그리고 $42^{\circ}C$의 annealing 온도조건으로 최적화하였다. 80개의 random primer로부터 높은 밴드선명도와 재현성을 보이는 16개가 선발되었으며 70%의 GC함량을 갖는 primer들이 GC함량이 60%인 것보다 DNA증폭에 있어 효과적이었다. 31개의 고추품종및 계통들에 대해 71개의 polymorphic밴드와 22개의 monomorphic밴드를 포함하는 총 93개의 DNA밴드가 선발된 16개의 random primer들로부터 형성되었다. Primer당 약 4.4개의 polymorphic밴드가 형성되었다. 이들 71개의 polymorphic밴드를 이용하여 유사도지수가 구해졌으며 이를 근거로 31고추 계통 또는 품종들을 뚜렷이 구분하는 dendrogram이 작성되었다.

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뽕나무 하늘소(Apriona germari Hope)로부터 Beauveria속 사상균의 분리 및 PCR에 의한 동정 (Identification of Beauveria spp. Isolated from Mulberry Longicorn Beetle (Apriona germari Hope) using Polymerase Chain Reaction)

  • 서종복;진병래
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제37권2호
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    • pp.167-171
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    • 1995
  • 딱정벌레목 천공성 해충인 뽕나무 하늘소(Apriona germari)의 효과적인 방제를 위하여, 뽕나무 하늘소 이병충으로 부터 곤충병원 사상균을 분리하고, 위상차 현미경 및 주사전자현미경으로 관찰하였으며, PCR(polymerase chain reaction)을 이용하여 동정하였다. 뽕나무 하늘소 이병충으로 부터 분리된 곤충병원 사상균은 현미경 관찰 결과 Beauveria속의 전형적인 형태적 특성을 나타냈다. 따라서 이들의 용이한 동정을 위하여 PCR primer(5'-ACG GGC GCT C-3')를 이용한 RAPD(random amplification of polymorphic DNA) 방법으로 분석하고, B. bassiana와 B. brongniartii의 PCR 산물을 전기영동한 결과 DNA 표식자로 이용이 가능하였다. 이상의 결과로서 본 실험에서 분리·명명된 SFB-1A는 B. bassianifh, SFB-1A는 B. bassiana로, SFB-3A는 B. brongniartii로 동정되었다.

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Random Amplification of Polymorphic DNA와 혈청학적 분석을 이용한 국내식품에서 분리한 Listeria monocytogenes의 분류 (Classification of Listeria monocytogenes Isolates from Korean Domestic Foods Using Random Amplification of Polymorphic DNA and Serotyping Analysis)

  • 김현중;박시홍;김해영
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제34권1호
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    • pp.23-27
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    • 2006
  • 본 연구에서는 국내시장에서 유통되는 육류, 냉동식품, 생우유, 조개류 등과 같은 식품으로부터 L. monocytogenes들을 분리하고 혈청형을 결정하였다. RAPD 결과를 통해서 L. monocytogenes는 Listeria 속의 다른 균주들과 전체 밴드의 수와 크기에서 구별이 되었다. 또한, L. monocytogenes는 2개 그룹으로 구별되었으며, 그룹 I은 L. monocytogenes 1/2b, 4e, 4b, 그룹 II는 L. monocytogenes 1/2a, 1/2c, 3 혈청형 그룹별로 분류되었다. 결론적으로 RAPD 방법과 serotyping은 L. monocytogenes를 분류하는 데에 있어서 기존의 방법의 단점을 보완한 새로운 가능성을 제시하였다.

Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Variation in Porhyra yezoensis and P. tenera

  • Beom-Kyu Kim;Gyu-Hwa Chung;Yuji Fujita
    • 한국양식학회지
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    • 제10권3호
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    • pp.321-326
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    • 1997
  • The random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique was used to anlayze six isolates of two species of Porphyra, P. yezoensis and P. tenera. Four 21-mer prrmers were combined randomly into six groups of double primers and screened for DNA amplification using nuclear and chloroplast tempate DNA. The RAPD patterns resulting from RnRc and CnCc primers provided evidence for both genetically homo-and heterogeneous populations of P. yezoensis and P. tenera. Similarity values obtained by RnRc primer analysis of nuclear DNA varied from 0.364 to 0.714 and those of chloroplast DNA were high, ranging from 0.727 to 1.000, except for P. yezoensis (Enoura).

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RAPD분석을 이용한 요코가와 흡충과 미야타흡충의 분자생물학적 비교 (Different RAPD patterns between Metagonimus yokogawai and Metagonimus Miyata type)

  • 유재란;정진성;채종일
    • Parasites, Hosts and Diseases
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    • 제35권4호
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    • pp.295-298
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    • 1997
  • 요코가와흡충과 미야타흡충의 genomic DNA를 RAPD 분석을 이용하여 비교하였다. 상업적으로 구 입한 60-70%의 G+C 성분을 가진 무작위 10-mer oligonucleotide 표지자 (Kit A, Operon Technologies Inc., CalifDmia, USA) 20개 중에서 다음의 8개를 이용하여 두 홉충간에 구별이 가능한 밴드양상을 관찰할 수 있었다: OPA-02,5-TCCCGAGCTG-3; OPA-09,5-GGGTAACGCC-3; OPA-10, 5-GTGATCGCAG-3; OPA-11, 5-CAATCGCCGT-3; OPA-13, 5-CAGCACCCAC-3; OPA-17, 5-GACCGCTGT-3; OPA-19,5-CAAACGTCGG-3; OPA-20, 5-GTrCCGATCC-3. 이 연구의 결과로 미야타흡충은 요코가와흡충과 서로 다른 유전자 염기 서열을 가지고 있음이 암시 되었다.

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Listeria spp.의 RAPD typing을 위한 Primer의 분리력 비교 (Primers for typing Listeria spp. using Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) ANalysis)

  • 임형근;홍종해;박경진;최원상
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권2호
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    • pp.67-72
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    • 2003
  • RAPD 분석은 한 개의 primer를 이용하여 임의의 DNA 조각을 증폭하는 것이다. 이때 만들어지는 여러 형태의 DNA pattern을 이용하여 리스테리아 모노사이토제네스를 분류할 수 있다. 리스테리아균들을 효과적으로 RAPD typing 할 수 있는 primer들을 엄선하기 위하여 리스테리아 표준균주 13종을 대상으로 총 31가지 primer들의 RAPD 분리력을 비교하여 보았다. 결과는 재현성이 높았으며 이중 6가지 primer(primer 6, HLWL74, UBC155, UBC127, Lis5, Lis11)가 discrimination index, band의 숫자, band scoring의 난이도 등을 고려해 볼 때 나머지 primer 들에 비해 우수한 분리력을 보였다. 이들 primer들은 장차 리스테리아의 RAPD typing에 이용될 수 있을 것으로 보이며, 현재는 이들을 이용하여 돈육공장의 오염원 규명을 위한 연구를 수행 중이다.

Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Identification of Genetic Variation in Chlorella species

  • CHO Jung Jong;KIM Yong-Tae;HUR Sung Bum;KIM Young Tae
    • 한국수산과학회지
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    • 제29권6호
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    • pp.761-769
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    • 1996
  • The random amplified polymorphic DNA (RAPD) technique was used to characterize 18 reference strains of microalgae, mostly Chlorella species, collected from various localities around Korea peninsular. Eighteen strains consist of four genera of the family marine Chlorella from 12 samples, two genera of fresh water Chlorella from three samples, and three genera on Nannochloris. Twenty 10-mer anonymous primers were screened for amplification of genomic DNA extracted from samples using the CTAB extraction method. Nineteen of these oligonucleotide primers were positive or band producing. Three of 20 random primers (OPA 10, OPA 12, and OPA 18) resulted in both clear band and a high degree of reproducibility and showed some potential to be used to discriminate individual samples of both genetically hetero-and homogeneous populations, in determining phylogenetic relationships between species within a genus and developing individual fingerprints for each samples.

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Genetic Similarity and Diversity in Crucian Carp(Carassius carassius) Populations by Polymerase Chain Reaction-Random Amplified Polymorphic DNAs

  • Yoon, Jong-Man;Kim, Tae-Sun;Kim, Jong-Yeon
    • 한국어업기술학회:학술대회논문집
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    • 한국어업기술학회 2001년도 춘계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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    • pp.332-333
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    • 2001
  • Genomic DNA was extracted from the blood of the freshwater crucian carp(Carassius carassius) from Kunsan in Korea, representing genetic similarity by polymerase chain reaction amplification of DNA as twelve of arbitrary primers. The electrophoretic analysis of polymerase chain reaction-random amplified polymorphic DNAs(PCR-RADP) products showed the high levels of similarity between different individuals in crucian carp.

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Salmonella spp.의 RAPD Typing을 위한 Primer의 분리력 비교 (Primers for Typing Salmonella spp. using Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) Analysis)

  • 임형근;이경희;홍종해;박경진;최원상
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.224-228
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    • 2003
  • RAPD 분석은 한 개의 primer를 이용하여 임의의 DNA조각을 증폭하는 것이다. 이때 만들어지는 여러 형태의 DNA band유형을 이용하여 살모넬라를 분류할 수 있다. 살모넬라를 효과적으로 RAPD typing할 수 있는 primer들을 엄선하기 위하여 살모넬라 표준군주 16종을 대상으로 총 20가지 primer들의 RAPD 분리력을 비교하여 보았다. 결과는 재현성이 높았으며 이중 primer A, OPG04, OPG10, OPL-03을 16가지 균 모두를 다른 유형으로 분리하였고 primer OPB-17, OPB-6, OPG08, OPL-02는 15가지 유형으로 분리하였다. 이들은 discrimination index, band의 숫자, band scoring의 난이도 등을 고려해 볼 때 나머지 primer 들에 비해 우수한 분리력을 보였다. 이들 primer들은 장창 살모넬라의 RAPD typing에 이용될 수 있을 것으로 보이며, 현재는 이들을 이용하여 돈육 공장의 오염원 구명을 위한 연구를 수행 중이다.