This paper presents a miniature optical system for the fluorescence detection of the patterned protein chip. The patterned protein chip was fabricated using MEMS process. The fluorescence from the patterned protein chip was measured while varying the concentration of the BSA. The fluorescence light is separated spatially from the excitation beam using mini-size prism to increase SNR (Signal-to-Noise Ratio). The combination of prism and mirrors can convert the excitation light from the laser diode to uniform illumination on the specimen. We believe that the proposed system for fluorescence detection can be applied to rea1ization of point-of-care.
Journal of the Korean Society of Industry Convergence
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v.20
no.5
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pp.441-446
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2017
Among the many foods, it is hard to find perfect food with nutrition and functionality like beans. Korean food culture is the main ingredient of korean culture, kochujang, soybean paste, and soy sauce, and processed soybean tofu is the main ingredient. Soybean meets high quality protein and fat, and it has excellent results in prevention and treatment of all kinds of diseases. Soybean food is becoming a new generation health food. In countries where animal protein intake is low, soybean is used as a protein source instead of animal protein. Tofu, a processed food, is a complete food with high digestibility. In order to publicize the superiority of soybean nutritional value, Tofu processing and powder were investigated by observing the size, shape and characteristics of bean powder using domestic soybeans and imported soybean, and the variation of the amount of coagulant.
Candida cylindracea lipase was immobilized by adsorption on acid washed glass beads. It was observed that protein loading of the support depends on the size of the particle, with smaller particle containing higher amount of protein per unit weight. Initial reaction rate linearly varied up to enzyme concentration of 17.25 U/mL. Amount of free fatty acids produced was linearly proportional up to the enzyme loading of 1650 $\mu$g/g of bead. Achievement of chemical equilibrium took longer time in the case of less protein loading. Degree of hydrolysis was found to decrease in second and third consecutive batch operations on repeated use of immobilized lipase.
An understanding functional properties and molecular interactions of milk proteins was critical to improve qualities of fermented dairy products including yogurts and cheeses. Extensive rearrangements of casein particles were important factors to enhance whey separation in yogurt gel network. The use of high hydrostatic pressure treated whey protein as an ingredient of low fat processed cheese food resulted in the production of low fat processed cheese food with acceptable firmness and enhanced meltabilities. Milk protein-based nano particles produced by self-association of proteins could be better nutrient delivery vehicle than micro particle since particle size reduction in nano particles could lead to increased residence time and surface area available in GI tract.
Kim, Sang-Gon;Kong, Sung-Ho;Bae, Young-Chan;Kim, Sun-Joon
Macromolecular Research
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v.11
no.4
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pp.241-249
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2003
A molecular-thermodynamic model to describe the salt-induced protein precipitation is developed based on the perturbation theory. We employed the modified perturbed hard-sphere-chain (PHSC) equation of state for copolymer mixtures to take into account the pre-aggregation effect among protein particles. Hypothetical pressure-composition diagrams are computed with various size differences and salt concentrations. The precipitation behaviors are also studied for various types of pre-aggregation effect for the given systems.
Sera from rabbits were infected with Vibrio vulnificus containing an antibody against major outer membrane protein (MOMP). MOMP of V. vulnificus ATCC 27562 were isolated and purified by Sarkosyl and TritonX-100 dual treatment. Molecular size of MOMP was identified as 36-kDa on $13\%$ SDS-PAGE. The sequence of the first 26 amino acid residues from the N-terminal end of the protein is AELYNQDGTSLDMGGRAEARLSMKDG, which is a perfect match with OmpU of V. vulnificus CMCP6 and YJ016. MOMP specific IgM and IgG were investigated in groups of mice. The group of mice immunized with MOMP and Alum showed higher levels of IgG2b than the group immunized with only MOMP. Vaccination with MOMP resulted in protective antibodies in the mouse infection experiment.
Biodegradable polymeric microspheres were studied for their usefulness as carriers for the delivery of vaccine antigens. However, protein antigen could be denatured during microencapsulation processes due to the exposure to the organic phase and stress condition of cavitation and shear force. Therefore this study was carried out to re-evaluate the degree of protein denaturation during microencapsulation with poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) copolymer. PLGA microspheres containing ovalbumin (OVA), prepared by W/O/W multiple emulsification method, were suspended in pH 7.4 PBS and incubated with shaking at $37.5^{\circ}C$. Drug released medium was collected periodically and analyzed for protein contents by micro-BCA protein assay. In order to evaluate the protein integrity, release medium was subjected to the analyses of SDS-PAGE and size exclusion chromatography (SEC). And enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was introduced to measure the immunoreactivity of entrapped OVA and to get an insight into the three-dimensional structure of epitope. The structures of entrapped protein were not affected significantly by the results of SDS-PAGE and SEC. However, immunoreactivity of released antigen was varied, revealing the possibility of protein denaturation in some microspheres when it was evaluate by ELISA method. Therefore, in order to express the degree of protein denaturation, antigenicity ratio (AR) was obtained as follows: amount of immunoreactivity of OVA/total amount of OVA released ${\times}100(%)$. ELISA method was an efficient tool to detect a protein denaturation during microencapsulation and the comparison of AR values resulted in more accurate evaluation for immunoreactivity of entrapped protein.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.35
no.1
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pp.7-13
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2017
In this study, changes in gene expression after administration of silk fibroin fragments ($size{\approx}30kDa$) were evaluated in MG63 cells using a cDNA microarray assay. In addition, the level of alkaline phosphatase (ALP) activity and cellular proliferation in the group administered moderately sized silk fibroin fragments ($size{\approx}30kDa$) (MSF) were compared to those in the group administered smaller silk fibroin fragments (size < 1 kDa) (SSF). The results of the cDNA microarray assay show increased expression of genes that are related to the cell cycle and inflammation. ALP, bone morphogenetic protein-7, bone morphogenetic protein receptor type IA, and runt-related transcription factor 2 exhibited significantly lower expression compared to control cells (fold ratio < 0.5). Relative ALP activity of the $100{\mu}g/mL$ MSF group was significantly lower than that of the SSF group (P < 0.05). Thus, the MSF group showed increased expression of genes associated with cellular proliferation and inflammation but decreased expression of genes associated with osteogenesis.
U, Dong-Jin;An, Yong-Seon;Sin, Won-Seon;Jeong, Yong-Seop;U, Geon-Jo
한국생물공학회:학술대회논문집
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2000.11a
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pp.260-263
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2000
Membranes are widely used to separate target solute molecules such as proteins on the basis of their size in cell broth mixture to minimize the loss of target compounds. In this study, membrane separation system using ultrafilters of MWCO 100 K and 50 K, was operated for concentration and purification of microbial transglutaminase. Fermentation broth containing MTGase was prefiltered by using pore size 1.6 and $0.7\;{\mu}m$ pre-filter made of cellulose fiber and $0.45\;{\mu}m$ microfilter made of cellulose acetate. The prefiltered solution was concentrated by 100 K and 50 K ultrafilter. The final enzyme concentration was 1.29 units/ml and enzyme specific activity was 0.2 units/mg protein. This specific activity were 3.7 times higher than that of initial cell broth mixture. Membrane separation process of microfiltration and ultrafiltration was proved to be very economic, energy efficient and effective separation method used to concentrate MTGase.
To demonstrate the effect of formulation conditions and evaluations of structural integrity from ovalbumin containing poly lactide glycolide copolymer (PLGA) microspheres for Vaccine delivery, OVA microspheres were prepared by a W/O/W multiple emulsion solvent extraction technique. Dichloromethan (DCM) and Ethyl acetate (EA) were applied as an organic phase and poly vinyl alcohol (PVA) as a secondary emulsion stabilizer. Microspheres were characterized for particle size, morphology (optical microscopy and Scanning Electron Microscope (SEM)). Protein denaturation was evaluated by size exclusion chromatography (SEC), SDS-PAGE and isoelectric focusing (IEF). Residual organic solvent was estimated by gas chromatography (GC) and differential scanning calorimetry (DSC). Optical photomicrograph and SEM revealed that micro spheres were typically spherical but various morphologies were observed. Mean particle size $(d_{vs})$ of microspheres were in the range of $3{\sim}50{\mu}m$. Also, The protein stability was not affected by the fonnulation process and residual organic solvent was beyond the detection below 0.1ppm. These results demonstrated that micro spheres might be a good candidate for the parenteral vaccine delivery system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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