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소프트콘택트렌즈 단백질제거제의 효능 평가법 분석 (Analysis of Evaluation Methods for the Efficacy of Protein Removal Agents for Soft Contact Lens)

  • 변현영;성형경;원혜림;심지인;박미정;김소라
    • 한국안광학회지
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    • 제19권1호
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    • pp.51-57
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    • 2014
  • 목적: 본 연구에서는 콘택트렌즈 단백질제거제 개발 시 요구되는 단백질 제거효능의 적절한 평가를 위한 시험법을 확립하고 이를 실제 콘택트렌즈에 침착된 단백질의 제거효율을 측정한 결과와 비교, 분석하여 단백질제거제의 효능 평가법으로 제시하고자 하였다. 방법: 대한약전에 제시된 단백소화력 시험법을 이용하여 파파인, 판크레아틴, 섭틸리신 A 및 프로테아제와 각각의 효소가 포함된 단백질제거 정 또는 용액의 효능평가에 적절한 시험조건을 찾고자 하였다. 또한, balafilcon A 재질 렌즈에 인위적으로 침착시킨 단백질을 시판되고 있는 단백질제거 정 또는 용액으로 제거하여 세척효율을 확인하고 이들 방법의 상관관계를 분석하였다. 결과: 판크레아틴과 판크레아틴 함유 제품의 경우 단백소화력 시험법으로 평가하였을 때 둘 다 약전에서 제시하는 판크레아틴 단백소화력 기준값인 28 IU/mg를 충족하였다. 프로테아제와 삼염화아세트산 B 용액으로 실험한 섭틸리신 A의 경우는 단백소화력 시험법으로 평가하였을 때 제조사에서 제시한 효소활성 값을 충족하였으나, 파파인과 삼염화아세트산 A 용액으로 실험한 섭틸리신 A는 제조사에서 제시된 효소활성 값에 해당하는 단백소화력이 측정되지 않았다. 시판되는 단백질제거제의 경우 판크레아틴을 함유한 제품을 제외한 나머지 세 가지 제품은 단백소화력 시험법으로는 제조사에서 명시한 효소들의 단백질 효소활성 값을 확인할 수 없었다. 그러나 실제 렌즈에 침착된 단백질의 제거정도를 측정하였을 때에는 파파인을 함유한 제품을 제외한 3종의 단백질제거제는 모두 90%가 넘는 단백질 제거효율을 보였다. 파파인 함유 단백질제거제의 경우 단백소화력 시험법으로는 효능 측정이 불가능하였으나 실제 렌즈에 침착된 누액단백질 제거효율은 73.72%에 이르렀다. 결론: 본 연구결과로 콘택트렌즈 단백질제거제의 효능은 함유되어 있는 단백분해효소의 종류에 따라 시험법을 달리하여 평가되어야 함을 확인할 수 있었다. 즉, 판크레아틴, 프로테아제, 섭틸리신 A를 함유하는 단백질제거제는 단백소화력 시험법과 단백질제거효율 측정법으로 효능평가가 가능하고, 파파인을 함유하는 단백질제거제의 평가는 콘택트렌즈를 이용한 단백질제거효율 측정법만이 효율적임을 제안할 수 있다.

An evaluation of heat on protein oxidation of soy protein isolate or soy protein isolate mixed with soybean oil in vitro and its consequences on redox status of broilers at early age

  • Zhang, Xianglun;Lu, Peng;Xue, Wenyue;Wu, Dawei;Wen, Chao;Zhou, Yanmin
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제30권8호
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    • pp.1135-1142
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    • 2017
  • Objective: The objective of this study was to evaluate effects of heat treatment and soybean oil inclusion on protein oxidation of soy protein isolate (SPI) and of oxidized protein on redox status of broilers at an early age. Methods: SPI mixed with soybean oil (SPIO) heated at $100^{\circ}C$ for 8 h was used to evaluate protein oxidation of SPI. A total of two hundred and sixteen 1-day-old Arbor Acres chicks were divided into 3 groups with 6 replicates of 12 birds, receiving basal diet (CON), heat-oxidized SPI diet (HSPI) or mixture of SPI and 2% soybean oil diet (HSPIO) for 21 d, respectively. Results: Increased protein carbonyl, decreased protein sulfhydryl of SPI were observed as heating time increased in all treatments (p<0.05). Addition of 2% soybean oil increased protein carbonyl of SPI at 8 h heating (p<0.05). Dietary HSPI and HSPIO decreased the average daily gain of broilers as compared with the CON (p<0.05). Broilers fed HSPI and HSPIO exhibited decreased glutathione (GSH) in serum, catalase activity and total sulfhydryl in liver and increased malondialdehyde (MDA) and protein carbonyl in serum, advanced oxidation protein products (AOPPs) in liver and protein carbonyl in jejunal mucosa as compared with that of the CON (p<0.05). Additionally, broilers receiving HSPIO showed decreased glutathione peroxidase activity (GSH-Px) in serum, GSH and hydroxyl radical scavenging capacity in liver, GSH-Px activity in duodenal mucosa, GSH-Px activity and superoxide anion radical scavenging capacity in jejunal mucosa and increased AOPPs in serum, MDA and protein carbonyl in liver, MDA and AOPPs in jejunal mucosa (p<0.05). Conclusion: Protein oxidation of SPI can be induced by heat and soybean oil and oxidized protein resulted in redox imbalance in broilers at an early age.

한국성인 여성의 단백질 섭취수준과 동.식물성 급원이 칼슘 및 인대사에 미치는 영향 (Effects of Dietary Protein Levels and Sources on Calcium and Phosphorus Metabolism in Young Korean Women)

  • 구재옥
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제24권2호
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    • pp.124-131
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    • 1991
  • 식이 단백질 섭취수준 및 동·식물성 단백질 급원이 칼슘 및 인대사에 미치는 영향을 검토하기 위하여 10명의 한국성인 연성을 대상으로 26일간의 통제 식이실험을 실시하였다. 대사실험 연구는 6일간의 적응기간과 10일간의 중단백식이(60g 단백질 545mg Ca)와 10일간의 고단백질 식이(90g 단백질 575mg Ca)로 구성되었다 중·고단백 식이기간 동안 동물성 단백질(75% 동물성 단백질)과 식물성 단백질(75% 식물성 단백질) 식이군으로 나누어 같은 식이에서 중단백식이 후 고단백식이를 섭취토록 하였고 실험식이 마지막 4일간은 각 2명에게 300mg 칼슘을 보충시켰다. 칼슘 흡수율은 단백질 섭취량의 증가시 동물성 단백질 식이군에서 유의적으로 증가하였다, 칼슘 보충은 급원에 관계없이 칼슘 흡수를 증가시켰다. 중단백 식이기간 동안 동물성과 단백질 식이에서 칼슘흡수율은 약 30% 이었으며 고단백질식이 기간 동안 동물성 단백질에서 46% 식물성 단백질에서 37% 이었다. 칼슘을 보충시켰을 때 중단백 식이기간동안 칼슘 흡수율은 약 46% 이었으며 고단백 식이군에서 53%이었다 뇨중 칼슘배설은 단백질 섭취수준에는 영향을 받지 않았으나 동물성 단백질 식이에서 식물성 단백질 식이보다 칼슘배설양이 많았다. 칼슘 균형을 단백질 섭취증가와 칼슘 보충으로 호전되었다. 인의 흡수는 단백질 섭취수준에는 영향을 받지않았으며 인 섭취량에 따라 증가하였다. 인 흡수율은 동물성 단백질 식이군에서 약 77∼81% 로 식물성 단백질 식이군에서의 55∼65% 보다 높았다. 이상의 결과로 보아 단백질 섭취수준 60g에서 90g으로의 증가와 칼슘보충은 뇨중 칼슘 배설에는 영향을 주지않으며 칼슘 흡수를 증진시켜 칼슘균형을 호전시키는 것으로 나타났다.

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Effect of water temperature on protein requirement of Heteropneustes fossilis (Bloch) fry as determined by nutrient deposition, hemato-biochemical parameters and stress resistance response

  • Fatma, Shabihul;Ahmed, Imtiaz
    • Fisheries and Aquatic Sciences
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    • 제23권1호
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    • pp.1.1-1.14
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    • 2020
  • Background: Dietary protein requirements are dependent on a variety of factors and water temperature is one of the most important abiotic factors affecting protein requirement of fish. This study was, therefore, conducted to investigate effects of water temperature on dietary protein requirement of fry Heteropneustes fossilis which has high demand in most of the Asian markets. Methods: Quadruplicate groups of 30 fish per treatment (2.97 ± 0.65 cm; 5.11 ± 0.34 g) were fed seven isoenergetic diets (17.9 kJ g-1 gross energy; 14.99 kJ g-1 digestible energy) containing dietary protein levels ranging from 28 to 52% at two water temperatures (18 and 26 ℃). Experimental diets were fed to apparent satiation as semi-moist cakes thrice daily at 17:00, 12:00, and 17:30 h for 12 weeks. For precise information, various growth parameters, protein deposition, hematological parameters, metabolic enzymes, and stress response were analyzed, and effects of water temperature on dietary protein requirement was recommended on the basis of response from above parameters. Results: Groups held at 26 ℃ attained best growth, feed conversion, and protein deposition at 44% dietary protein indicating that temperature affected dietary protein requirement for optimum growth of H. fossilis fry and protein requirement seems to be satisfied with 44% dietary protein. Interestingly, interactive effects of both dietary protein levels and temperature were not found (P > 0.05). Fish reared at 18 ℃ had comparatively higher values for aspartate and alanine transferases than those reared at 26 ℃ water temperature which exhibited normal physiological value for these enzymes indicating that body metabolism was normal at this temperature. Hematological parameters also followed same pattern. Furthermore, fish reared at 26 ℃ water temperature exhibited more resistant to thermal stress (P < 0.05). The 95% maximum plateau of protein deposition data using second-degree polynomial regression analyses exhibited dietary protein requirement of fry H. fossilis between 40.8 and 41.8% of diet at 26 ℃ water temperature. The recommended range of dietary protein level and protein/digestible energy ratio for fry H. fossilis is 40.8-41.8% and 27.21-27.88 mg protein kJ-1 digestible energy, respectively. Conclusions: Information developed is of high significance for optimizing growth potential by making better utilization of nutrient at 26 ℃ and, to develop effective management strategies for mass culture of this highly preferred fish species.

Protein Evaluation of Dry Roasted Whole Faba Bean (Vicia faba) and Lupin Seeds (Lupinus albus) by the New Dutch Protein Evaluation System: the DVE/OEB System

  • Yu, P.;Egan, A.R.;Leury, B.J.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제12권6호
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    • pp.871-880
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    • 1999
  • The effects of dry roasting (110, 130, $150^{\circ}C$ for 15, 30, 45 min) on potential ruminant protein nutritional values in terms of: a), rumen bypass protein (BCP); b), rumen bypass starch (BST); c), fermented organic matter (FOM); d), true absorbed bypass protein (ABCP); e) microbial protein synthesized in the rumen based on available energy (E_MP); f), microbial protein synthesized in the rumen based on available nitrogen (N_MP); g), true protein supplied to the small intestine (TPSI); h), true absorbed rumen synthesized microbial protein (AMP); i), endogenous protein losses (ENDP); j), true digested protein in the small intestine (DVE); k), degraded protein balance (OEB) of whole lupin seeds (WLS) and faba beans (WFB) were evaluated by the new Dutch DV/OEB protein evaluation system. Dry roasting significantly increased BCP, BST, TPSI, ABCP, DVE (p<0.001) and decreased FOM, E_MP, AMP, N_MP and OEB (p<0.001) with increasing temperatures and times except that when temperature was at $110^{\circ}C$. The values of BCP, BST, TPSI, ABCP and DVE at $150^{\circ}C/45min$ for WLS and WFB were increased 2.2, 3.7; -, 2.0; 1.7, 1.7; 2.3, 3.7 and 1.7, 1.7 times and the values of FOM, E_MP, AMP, N_MP and OEB at $150^{\circ}C/45min$ for WLS and WFB were decreased by 15.3, 25.8; 18.1, 25.8; 18.7, 25.8; 54.6, 41.6 and 82.3% 54.7%, respectively, over the raw WLS and WFB. The results indicated that though dry roasting reduced microbial protein synthesis due to reducing FOM, TPSI didn't decrease but highly increased due to increasing BCP more than enough for compensation of the microbial protein decreasing. Therefore the net absorbable DVE in the small intestine was highly increased. The OEB values were significantly reduced for both WLS and WFB but not to the level of negative. It indicated that microbial protein synthesis might not be impaired due to the sufficient N supplied in the rumen, but the high positive OEB values in the most treatments except of $150^{\circ}C$ for 30 and 45 min of WLS (The OEB values: 54.8 and 26.0 g/kg DM) indicated that there were the large amounts of N loss in the rumen. It was concluded that dry roasting at high temperature was effective in shifting protein degradation from rumen to intestines and it increased the DVE values without reaching the negative OEB values. No optimal treatment was found in WLS due to the too high OEB values in all treatments. But dry roasting at $150^{\circ}C$ for 30 and 45 min might be optimal treatments for WLS due to the very lower OEB values.

쥐 소뇌에 있어서 raf protein kinases 의 면역세포 화학적 분포와 단백질 양상 (Immunocytochemical distribution of raf protein kinases and protein pattern in rat cerebellum)

  • 박정순;최원철
    • 생명과학회지
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    • 제8권1호
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    • pp.14-26
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    • 1998
  • 본 연구에서는 SDS/polyacrylamide 젤 전기영동에 의한 쥐의 성장과정에 따른 소뇌의 단백질양상의 변화양상과 immunocytochemistry를 이용하여 c-raf a-raf kinase의 정상 소뇌에서의 분포에 대해 관찰 하였으며 western blot을 이용하여 소뇌의 단백질들에서 c-raf의 존재에 대해 살펴보았다. 단백질 양상에서 쥐의 성장에 따라 crude에선,ㄴ 49,200 dalton과 169,000 dalton 사이의 bands가 양적 증가를 보였으며 cytosolic fraction 에서는 37,800 dalton의 band가 양적 증가를 보이는데 비해 membrane fraction 에서는 260,600 dalton의 band가 증가하였다. 이러한 결과로 성장 발달에 따라 고분자 량의 물질들이 이들 소뇌 부위에서 기여하였을 것으로 추정할 수 있었다. Immunocytochemistry에 의한 분석에서는 c-raf와 a-raf가 소뇌의 피질주위에서 조롱박 세포(Purkinje cell) 의 세포질 특히 핵 주변부위에서 강하게 검출되었으며 a-raf에 비해 c-raf가 더 강하게 나타났었다. 그리고 그 외에 Nucleus embolifornis의 큰 neuronal cell의 세포질 부위의 나타남을 볼 수 있었다. Immunoblot에 의한 분석에서는 crude와 cytosolic fraction에서 raf protein kinase의 존재를 확인할 수 있었으며, 이상의 결과들을 종합해 보았을 때 소뇌의 정상의 많은 신경세포(neuronal cell)에 raf protein kinase가 분포되어 있으며 이들이 정상의 cell에서 기능을 가질 것으로 추정된다.

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야생 호밀 염색체 첨가 밀 계통의 단백질 발현 양상 비교 분석 (Identification of the Protein Function and Comparison of the Protein Expression Patterns of Wheat Addition Lines with Wild Rye Chromosomes)

  • 이대한;조건;우선희;조성우
    • 한국작물학회지
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    • 제64권4호
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    • pp.373-383
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    • 2019
  • 야생 호밀 염색체 첨가 계통의 단백질 발현 양상을 보통 밀과 비교함으로써 발현의 차이를 보이는 단백질의 기능을 동정함으로써 야생 호밀의 작물학적 유용 가치를 확인하고자 이 연구를 수행하였다. 전반적으로 야생 호밀 염색체 첨가계통은 보통 밀의 유전적 배경을 바탕으로 건조와 열에 대한 비생물학적 스트레스에 대한 저항성 관련 단백질과 바이러스성 병원균에 대한 저항성 관련 단백질 및 척박한 환경에 적응하는 생리대사에 관련된 단백질을 가지고 있는 것을 확인하였다. 하지만 아직 야생 호밀의 단백질 기능에 대한 정보와 작물학적 이용에 대한 연구가 미흡한 상태이다. 앞으로 국내 야생 호밀의 유용 유전자원으로써의 작물학적 이용과 기능에 대한 지속적인 연구가 필요하다.

Inheritance of P34 Allergen Protein in Mature Soybean Seed

  • Sung, Mi Kyung;Seo, Jun Soo;Kim, Kyung Roc;Han, Eun Hui;Nam, Jin Woo;Kang, Dal Soon;Jung, Woo Suk;Kim, Min Chul;Shim, Sang In;Kim, Kyung Moon;Chung, Jong Il
    • 한국육종학회지
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    • 제43권2호
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    • pp.115-119
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    • 2011
  • Soybean proteins are widely used for human and animal feeds worldwide. The use of soybean protein has been expanded in the food industry due to their excellent nutritional benefits. But, antinutritional and allergenic factors are present in the raw mature soybean. P34 protein, referred as Gly m Bd 30K, has been identified as a predominant immunodominant allergen. The objective of this research is to identify the genetic mode of P34 protein for the improvement of soybean cultivar with a very low level of P34 protein. Two $F_2$ populations were developed from the cross of "Pungsannamulkong" ${\times}$ PI567476 and "Gaechuck2ho" ${\times}$ PI567476 (very low level of P34 protein). Relative amount of P34 protein was observed by Western blot analysis. The observed data for the progeny of "Pungsannamulkong" and PI567476 were 133 seeds with normal content of P34 protein and 35 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=1.157$, P=0.20-0.30). For the progeny of "Gaechuck#1" and PI567476, the observed data were 177 seeds with normal content of P34 protein and 73 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=2.353$, P=0.10-0.20). From pooled data, observed data were 310 seeds with normal content of P34 protein and 108 seeds with very low level of P34 protein (${\chi}^2=0.156$, P=0.50-0.70). The segregation ratio (3:1) and the Chi-square value obtained from the two populations suggested that P34 protein in mature soybean seed is controlled by a single major gene. Single gene inheritance of P34 protein was confirmed in 32 $F_2$ derived lines in $F_3$ seeds, which were germinated from the low level of P34 protein obtained from the cross of "Pungsannamulkong" and PI567476. These results may provide valuable information to breed for new soybean line with low level of P34 protein and identification of molecular markers linked to P34 locus.

단백질 서열의 상동 관계를 가중 조합한 단백질 이차 구조 예측 (Prediction of Protein Secondary Structure Using the Weighted Combination of Homology Information of Protein Sequences)

  • 지상문
    • 한국정보통신학회논문지
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    • 제20권9호
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    • pp.1816-1821
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    • 2016
  • 단백질은 대부분의 생물학적 과정에서 중대한 역할을 수행하고 있으므로, 단백질 진화, 구조와 기능을 알아내기 위하여 많은 연구가 수행되고 있는데, 단백질의 이차 구조는 이러한 연구의 중요한 기본적 정보이다. 본 연구는 대규모 단백질 구조 자료로부터 단백질 이차 구조 정보를 효과적으로 추출하여 미지의 단백질 서열이 가지는 이차 구조를 예측하려 한다. 질의 서열과 상동관계에 있는 단백질 구조자료내의 서열들을 광범위하게 찾아내기 위하여, 탐색에 사용하는 프로파일의 구성에 질의 서열과 유사한 서열들을 사용하고 갭을 허용하여 반복적인 탐색이 가능한 PSI-BLAST를 사용하였다. 상동 단백질들의 이차구조는 질의 서열과의 상동 관계의 강도에 따라 가중되어 이차 구조 예측에 기여되었다. 이차 구조를 각각 세 개와 여덟 개로 분류하는 예측 실험에서 상동 서열들과 신경망을 동시에 사용하여 93.28%와 88.79%의 정확도를 얻어서 기존 방법보다 성능이 향상되었다.

Purification and Characterization of a Novel Antifungal Protein from Paenibacillus macerans PM1 Antagonistic to Rice Blast Fungus, Pyricularia oryzae

  • Bae, Dong-Won;Kawk, Weon-Sik;Lee, Joon-Taek;Son, Dae-Young;Chun, Sung-Sik;Kim, Hee-Kyu
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제10권6호
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    • pp.805-810
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    • 2000
  • An antifungal protein antagonistic to the rice blast fungus, Pyricularia oryzae was purified from Paenibacillus macerans PM-1 by ammonium sulfate fractionation, Q Sepharose Fast Flow column chromatography, Phenyl Sepharose CL-4B column chromatography and Superose 12 gen filtration. An apparent molecular mass of the purified antifungal protein was determined as 8 kDa by SDS-PAGE and 9 kDa by analytical gel filtration, respectively, suggesting that the purified protein is a monomer. The antifungal protein was stable at pH range from 7-12 and up to $100^{\circ}C$. The protein was also stable at 0.1-1% Tween 20 and Triton X-100. The N-terminal amino acid sequence of the antifungal protein was Thr-Glu-Leu-Pro-Leu-Gly-Ile-Val-Met-Asp-Lys-Tyr-Thr-Asp-Ala-Phe-Lys-Phe-Asp-Met-Phe. Comparison of the determined sequence with other peptide and DNA sequences did not reveal homology at all. Therefore, the purified antifungal protein was speculated to be a novel protein. The condidial germination in vitro of P. oryzae KJ301:93-39 by the purified protein ($5.9{\mu} g/ml$) was limited to $9{\pm}3.2%$ only, compared with $69{\pm}2.4%$ of the control. Ungerminated conidia were swollen at basa and mid cell by the purified protein. In vivo bioassay for inhibition of conidial germination of P. oryzae KJ 301, one of the most predominating racesin Korea. the purified protein ($5.9{\mu} g/ml$)strongly inhibited the conidial germination. The conidia, even though germinated, could not develop any further to produce appressoria efficiently.

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