Ahn, Dong-Joo;Youm, Jung Won;Kim, Suk Weon;Yoon, Won Kee;Kim, Hyoung Chin;Hur, Tai-Young;Joung, Young Hee;Jeon, Jae-Heung;Kim, Hyun Soon
대한수의학회지
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제53권4호
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pp.217-224
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2013
Transgenic plants have been tested as an alternative host for the production and delivery of experimental oral vaccines. Here, we developed transgenic potatoes that express the major antigenic sites A and D of the glycoprotein S from transmissible gastroenteritis coronavirus (TGEV-$S_{0.7}$) under three expression vector systems. The DNA integration and mRNA expression level of the TGEV-$S_{0.7}$ gene were confirmed in transgenic plants by PCR and northern blot analysis. Antigen protein expression in transgenic potato was determined by western blot analysis. Enzyme-linked immunosorbent assay results revealed that based on a dilution series of Escherichia coli-derived antigen, the transgenic line P-2 had TGEV-$S_{0.7}$ protein at levels that were 0.015% of total soluble proteins. We then examined the immunogenicity of potato-derived TGEV-$S_{0.7}$ antigen in mice. Compared with the wild-type potato treated group and synthetic antigen treated group, mice treated with the potato-derived antigen showed significantly higher levels of immunoglobulin (Ig) G and IgA responses.
In this study, we identified the causative agent of stem-end rot in potatoes that were grown in Gangwon alpine areas of Korea in 2013. The disease symptoms included appearance of slightly sunken circular lesion with corky rot on the potato surface at the stem-end portion. The fungal species isolated from the infected potatoes were grown on potato dextrose agar and produced white aerial mycelia with dark violet pigments. The conidiophores were branched and monophialidic. The microconidia had ellipsoidal to cylindrical shapes and ranged from $2.6{\sim}11.4{\times}1.9{\sim}3.5{\mu}m$ in size. The macroconidia ranged from $12.7{\sim}24.7{\times}2.7{\sim}3.6{\mu}m$ in size and had slightly curved or fusiform shape with 2 to 5 septate. Chlamydospores ranged from $6.1{\sim}8.1{\times}5.7{\sim}8.3{\mu}m$ in size and were present singly or in pairs. The causal agent of potato stem-end rot was identified as Fusarium oxysporum by morphological characterization and by sequencing the internal transcribed spacer (ITS1 and ITS4) regions of rRNA. Artificial inoculation of the pathogen resulted in development of disease symptoms and the re-isolated pathogen showed characteristics of F. oxysporum. To the best of our knowledge, this is the first study to report that potato stem-end rot is caused by F. oxysporum in Korea.
Potato virus Y (PVY) is one of the most important viruses in many field crops in Korea. In this study, 31 PVY isolates were isolated from infected potato (Solanum tuberosum), tobacco (Nicotiana tabacum), pea (Pisum sativum), and weeds (Veronica persica, Lamium amplexicause and Capsella bursa-pastoris) showing different mosaic symptoms in Jeonbuk, Chungnam, Gangwon, and Gyeongbuk areas in Korea. The 640 nucleotide region containing the C-terminal portion of coat protein (CP) gene and 3'non-translated region (NTR) was amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) using PVY-specific oligonucleotide primers. Sequence analyses of the amplified DNA fragments showed that the C-terminal portion of CP gene was not significantly different from that of previously reported PVY strains from potato (PVY-OK and -T) and tobacco (PVY-VN) in Korea. Homologies of the deduced CP amino acid sequences were 93.3-99.0% to corresponding regions of the other PVY strains including PV $Y^{N}$, PV $Y^{o}$ , PV $Y^{OK}$ , PV $Y^{T}$ , and PV $Y^{VN}$ . In contrast the sequences located at the 3'-NTR showed more diverse sequence homologies (76.4-99.7%). These results indicate that the C-terminal portion of the CP gene was relatively conserved while sequences at the 3'NTR were more diverse and variable over the host species and the regions where they were isolated.e isolated.
Park, Sangryeol;Gupta, Ravi;Krishna, R.;Kim, Sun Tae;Lee, Dong Yeol;Hwang, Duk-ju;Bae, Shin-Chul;Ahn, Il-Pyung
The Plant Pathology Journal
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제32권1호
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pp.25-32
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2016
Potato is one of the most important crops worldwide. Its commercial cultivars are highly susceptible to many fungal and bacterial diseases. Among these, bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum causes significant yield loss. In the present study, integrated proteomics and genomics approaches were used in order to identify bacterial wilt resistant genes from Rs resistance potato cultivar CT-206-10. 2-DE and MALDI-TOF/TOF-MS analysis identified eight differentially abundant proteins including glycine-rich RNA binding protein (GRP), tomato stress induced-1 (TSI-1) protein, pathogenesis-related (STH-2) protein and pentatricopeptide repeat containing (PPR) protein in response to Rs infection. Further, semi-quantitative RT-PCR identified up-regulation in transcript levels of all these genes upon Rs infection. Taken together, our results showed the involvement of the identified proteins in the Rs stress tolerance in potato. In the future, it would be interesting to raise the transgenic plants to further validate their involvement in resistance against Rs in potato.
Meiyalaghan, Sathiyamoorthy;Pringle, Julie M.;Barrell, Philippa J.;Jacobs, Jeanne M.E.;Conner, Anthony J.
Plant Biotechnology Reports
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제4권4호
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pp.293-301
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2010
The feasibility of two strategies for transgene pyramiding using Agrobacterium-mediated transformation was investigated to develop a transgenic potato (Solanum tuberosum L. cv. Iwa) with resistance to potato tuber moth (PTM) (Phthorimaea operculella (Zeller)). In the first approach, cry1Ac9 and cry9Aa2 genes were introduced simultaneously using a kanamycin (nptII) selectable marker gene. The second approach involved the sequential introduction (re-transformation) of a cry1Ac9 gene, using a hygromycin resistance (hpt) selectable marker gene, into an existing line transgenic for a cry9Aa2 gene and a kanamycin resistance (nptII) selectable marker gene. Multiplex polymerase chain reaction (PCR) confirmed the presence of the specific selectable marker gene and both cry genes in all regenerated lines. The relative steady-state level of the cry gene transcripts in leaves was quantified in all regenerated lines by real-time PCR analysis. Re-transformation proved to be a flexible approach to effectively pyramid genes for PTM resistance in potato, since it allowed the second gene to be added to a line that was previously identified as having a high level of resistance. Larval growth of PTM was significantly inhibited on excised greenhouse-grown leaves in all transgenic lines, although no lines expressing both cry genes exhibited any greater resistance to PTM larvae over that previously observed for the individual genes. It is anticipated that these lines will permit more durable resistance by delaying the opportunities for PTM adaptation to the individual cry genes.
Sweet potato feathery mottle virus(SPFMV) is one of the most prevalent viruses infecting sweet potatoes and occurs widely in sweet potato cultivating areas in Korea. To assess their genetic variation, a total of 28 samples infected with SPFMV were subjected to restriction fragment length polymorphism(RFLP) analysis using DNAs amplified by RT-PCR with specific primer sets corresponding to the coat protein(CP) region of the virus. The similarity matrix by UPGMA procedure indicated that 28 samples infected with SPFMV were classified into three groups based on the number and size of DNA fragments by digestion of CP-encoding regions with 7 enzymes including SalI, AluI, EcoRI, HindIII, FokI, Sau3AI, and DraI bands. Four primer combinations out of 5 designed sets were able to differentiate SPFMV and sweet potato virus G infection, suggesting that these specific primers could be used to differentiate inter-groups of SPFMV. Sequence analysis of the CP genes of 17 SPFMV samples were 97-99% and 91-93% identical at the intra-group and inter-groups of SPFMV, respectively. The N-terminal region of the CP is highly variable and examination of the multiple alignments of amino acid sequences revealed two residues(residues 31 and 32) that were consistently different between SPFMV-O and SPFMV-RC.
A full-length cDNA encoding dihydroflavonol 4-reductase (st-dfr) of potato was isolated by rapid amplification of cDNA ends, and their expression was investigated from purple-fleshed potato (Solanum tuberosum L. cv. Jashim). The st-dfr exists as a member of a small gene family and its transcripts was abundant in the order of tuber flesh, stem, leaf, and root. The expressions of st-dfr gene were light inducible and cultivar dependant. Transgenic potato plants harboring antisense st-dfr (AS-DFR) sequences were analyzed. The accumulation of mRNA was nearly completely inhibited as a result of introducing an AS-DFR gene under the control of the 35S CaMV promoter into the red tuber skin Solanum tuberosum L. cv. Desiree. The anthocyanin content of the tuber peels of the transgenic lines was dramatically decreased by up to 70%. The possible production of flavonols in the peels of AS-DFR transgenic potatoes was discussed.
Seo, Sang-Gyu;Kim, Ji-Seong;Kang, Seung-Won;Shin, Mi-Rae;Yang, You-Sun;Lee, Gung-Pyo;Hong, Jin-Sung;Kim, Sun-Hyung
Plant Biotechnology Reports
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제2권4호
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pp.253-258
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2008
The cDNA of the touch-induced genes (TCH) of the sweet potato [Ipomoea batatas (L.) Lam.] has been cloned and analyzed. IbTCH1, which exists as at least two-copy genes in the genome of the sweet potato, encodes for 148-amino acid polypeptides, and harbors four conversed $Ca^{2+}-binding$ motif EF-hands. IbTCH1 was shown to be expressed in the flower, leaf, thick pigmented root, and particularly in the white fibrous root, but expressed only weakly in the petiole. IbTCH1 is upregulated upon exposure to environmental stresses, dehydration, and jasmonic acid. Furthermore, IbTCH1 is developmentally regulated in the leaf and root. These results strongly indicate that the gene performs functions in both plant development and in defense/stress-signaling pathways.
Kim, Dool Yi;Kim, Kyung Hwa;Choi, Man Soo;Ok, Hyun Choog;Kim, Jae Hyun
한국작물학회:학술대회논문집
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한국작물학회 2017년도 9th Asian Crop Science Association conference
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pp.153-153
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2017
Potato (Solanum tubersosum L.) is susceptible to various environmental stresses such as frost, high temperature, and drought. Enhancement of potato drought tolerance can reduce yield loss under drought that has negative effect on potato tuber growth. Genetic engineering can be utilized to achieve this goal, but such approaches using endogenous potato genes have rarely been applied. Since unpredictable global weather changes cause more severe and frequent water limiting conditions, improvement of potato drought tolerance can minimize such adverse effects under drought and can impact on sustainable potato production. Genetic engineering can be utilized to improve potato drought tolerance, but such approaches using endogenous potato genes have rarely been applied. We were obtained AtbZIP28 gene transgenic potato plants. It is identified transcript levels at various stress conditions, polyethylene glycol (PEG), NaCl, abscisic ${\underline{acid}}$ (ABA). Also, For identification to regulate ER stress response genes in AtbZIP28 gene transgenic potato plant, we screened seven potato genes from RNA-seq analysis under TM treatment. Five and two genes were up- and down-regulated by TM, respectively. Their expression patterns were re-examined at stress agents known to elicit TM, DTT, DMSO and salt stress.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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