• 생명과학회지
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• 제17권10호
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• pp.1441-1446
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• 2007

본 연구는 서로 다른 상염색체에 위치하고 있는 초위성체유전 표지를 활용하여 제주마 집단의 타 품종과의 차별적 유전특성분석과 제주마 집단에서 활용할 수 있는 효율적인 개체 식별 시스템 설정을 위해 수행되었다. 공시재료로서는 5품종에서 총 191두가 사용되었으며 13종의 좌위에 대한 개체별 유전자형을 분석하였다. 이들 13종에서 출현된 총 대립 유전자수는 제주마의 경우 155종이 나타났다. 한국 제주마 집단에서 나타난 평균 이형접합도는 0.317-0.902였으며 marker 다형성 정보량은 0.498-0.799로 나타났다. 제주마 집단에서 나타난 대립 유전자 발현 특성은 다른 외래 품종 집단과 매우 상이한 결과를 나타냈다. ATH4 좌위의 경우 제주마 집단에서는 5종의 대립 유전자가 고른 분포를 나타낸 반면 QUA종의 경우와 THO종집단에서 특정 좌위의 극단적 발현 빈도를 나타냈다. 품종특이성을 나타내는 분자표지의 대립유전자 발현양상이 확인되었으며 이러한 품종특이성 발현 분자표지는 집단 내 개체에 대한 품종식별 유전자표지로 활용이 가능한 것으로 나타났다. 9종의 초위성체 유전 표지를 활용할 경우 누적 개체 식별력은 99.9%를 나타냈으며 두 마리의 서로 다른 개체가 서로 같은 유전자형을 가질 짝확률은 $0.60\;{\times}\;10^{10}$으로 추정되었다. 따라서 9종의 선정된 유전표지는 제주마 품종 집단에서 적정 신뢰도를 제공할 수 있는 개체 식별 시스템을 설정할 수 있을 것으로 생각된다.

• 원예과학기술지
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• 제19권1호
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• pp.29-33
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• 2001

감자 DNA의 다형성을 통한 품종 및 육종 계통의 구분이 가능한 특이적 분자 마커를 찾기 위해 URP primer를 이용한 RAPD 분석을 실시하였다. 8 가지의 감자 품종과 5가지의 감자 육종계통을 분석 재료로 이용하였으며, 이들 중 '조풍', '대관70호', '가원'과 '대관 72호'는 '수미', '남작', '남서'와 '대서'를 각각 모본으로 이용되어 육성되었으며, 다양한 표현형질에서 유사성을 가지고 있다. 따라서 생육단계별 표현형질들 만으로는 각각을 구분하기 곤란한 경우가 있다. 벼(Oriza sativa)의 repetitive sequence로부터 고안된 URP primer는 비교적 높은 annealing 온도를 가지며, 20 mer의 비교적 길이가 긴 RAPD용 primer로써 증폭산물의 다형성과 재현성이 높아 다양한 생물종의 구분이 가능한 것으로 보고되고 있다. 국내에서 상품화되어 시판되는 URP primer 들 중에 URP2, URP4, URP8 등이 감자에 적용될 수 있을 것으로 확인하였다. 전기영동된 DNA 밴드들의 유사성을 분석해본 결과 유전적 유사도와는 차이를 나타내고 있었다. 그러나 높은 재현성을 갖는 URP primer들에 의해 증폭된 DNA 밴드의 다형성은 감자의 종내변이를 구분할 수 있는 분자 마커로서 이용할 수 있을 것으로 확인되었다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제19권11호
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• pp.1546-1550
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• 2006

The purpose of this study was to assess the genetic variation and establish the relationship amongst breeds and strains using 15 chicken specific microsatellite markers. A total of 285 unrelated DNA samples from four Korean native chicken strains (Black strain of Korean native chicken; KL, Red Brown strain of Korean native chicken; KR, Ogol strain of Korean native chicken; KS and Yellow Brown strain of Korean native chicken; KY) and three introduced chicken breeds (F strain of White Leghorn; LF, K strain of White Leghorn; LK, Rhode Island Red; RC and Cornish; CN) were genotyped to estimate within and between breed genetic diversity indices. All the loci analyzed in 15 microsatellite markers showed a polymorphic pattern and the number of alleles ranged from 5 to 14. The polymorphism information content (PIC) of UMA1019 was the highest (0.872) and that of ADL0234 was the lowest (0.562). The expected total heterozygosity (He) within breed and mean number of observed alleles ranged from 0.540 (LF) to 0.689 (KY), and from 3.47 (LK) to 6.07 (KR), respectively. The genetic variation of KR and KY were the highest and the lowest within Korean native strains, respectively. The genetic distance results showed that Korean native chicken strains were separated with the three introduced chicken breeds clustered into another group. The lowest distance (0.149) was observed between the KR and KL breeds and the highest distance (0.855) between the KR and LK breeds. The microsatellite polymorphism data were shown to be useful for assessing the genetic relationship between Korean native strains and other foreign breeds.

• 생명과학회지
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• 제14권3호
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• pp.521-524
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• 2004

본 연구는 short oligonucleotide primer를 이용하여 마 품종간 유전 분석을 실시 하고자 PCR증폭 기법을 확립하고, 확립된 기술을 이용하여 제주도에 사육중인 천념기념물 347호로 등록된 제주말과 경주마로 잘 알려진 더러브렛간의 유전적인 다양성을 분석한 결과 마 품종간 차이를 보이는 DNA marker는 9개의 primer에서 확인되었으며, 이중 6개의 primer에서 더러브렛 특이 밴드와 나머지 3개에서 제주 마 특이 RAPD 밴드가 확인되어 cloning과 sequencing후에 SCAR primer를 제작하여 마 품종 식별에 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 본 연구결과 RAPD표지인자는 마 품종간의 유전 분석에 매우 유용한 것으로 판단되었다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제22권1호
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• pp.36-45
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• 2006

Twenty isolates of Didymella bryoniae were isolated from infected cucurbit plants in various growing areas of southern Korea in 2001 and 2002. Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) group [RG] I of D. bryoniae was more virulent than RG IV to watermelon. Virulence of the RG I isolate was strong to moderate to cucumber, whereas that of the RG IV varied from strong, moderate to weak. Two hundred seventy-three amplified fragments were produced with 40 primers, and were analyzed by a cluster analysis using UPGMA method with an arithmetic average program of NTSYSPC. At the distance level of 0.7, two major genomic DNA RAPD groups were differentiated among 20 isolates. The RG I included 7 isolates from watermelon and one isolate from melon, whereas the RG IV included 12 isolates from squash, cucumber, watermelon and melon. Amplification of internal transcribed spacer (ITS) region and small subunit rRNA region from the 20 isolates yielded respectively a single fragment. Restriction pattern with 12 restriction enzymes was identical for all isolates tested, suggesting that variation in the ITS and small subunit within the D. bryoniae were low. Amplification of the genomic DNAs of the tested isolates with the sequence characterized amplified regions (SCAR) primer RG IF-RG IR specific for RG I group resulted in a single band of 650bp fragment for 8 isolates out of the 20 isolates. Therefore, these 8 isolates could be assigned into RG I. The same experiments done with RG IIF-RG IIR resulted in no amplified PCR product for the 20 isolates tested. An about 1.4 kb-fragment amplified from the RG IV isolates was specifically hybridized with PCR fragments amplified from genomic DNAs of the RG IV isolates only, suggesting that this PCR product could be used for discriminating the RG IV isolates from the RG I isolates as well other fungal species.

• 한국균학회지
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• 제29권1호
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• pp.9-14
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• 2001

Colletotrichum spp.는 광범위한 기주 범위를 갖는 다범성 균으로 각종 작물에 피해를 야기시키는 중요한 식물병원 진균이다. 최근 국내에서 널리 재배되고 있는 단감, 사과, 복숭아, 포도 등에 탄저병이 발생하여 많은 경제적 손실을 초래하고 있다. 탄저병 병원균의 경우 기존에는 주로 형태적 특성이나 배지상에서의 특성, 기주에 대한 병원성의 차이에 의존하여 분류를 해 왔다. 그러나 최근에는 병원균의 분류에 있어 문제점을 해결하기 위하여 분자생물학적 방법을 이용하고 있다. 최근에는 RAPD(ramdomly amplified polymorphic DNAs)와 RFLP(restriction fragment length polymorphism)의 장점만을 살린 AFLP(amplified fragment length polymorphism)기법이 유연관계 분석에 있어서 각광을 받고 있고 rDNA부위를 증폭하여 제한효소를 이용하여 다양성을 보는 방법이 많이 이용되고 있다. 이에 본 실험에서는 AFLP 기법 이용하여 단감나무에 탄저병을 일으키는 균들간에 유연관계를 밝혔다. AFLP결과에서 variation이 심하여 각각의 특징적인 band를 검출할 수 있었다. 특히 단감나무에 병해를 일으키는 탄저병 병원균 2개의 종이 복합적으로 관여하는 사실을 알 수 있었다.

• 미생물학회지
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• 제40권2호
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• pp.65-72
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• 2004

진핵생물의 특정 염기배열을 원핵생물 내에서 증폭시킬 때 불안정성이 비교적 빈번히 관찰되어진다. 특히 long inverted repeats나 AT-rich sequences그리고 Z-DNA와 같은 구조를 지닌 염기배열은 대장균 내에서 매우 불안정하다. 이러한 염기서열은 대장균 내에서 부분적으로 결실되거나 완전히 손실된다. 본 연구실에서 human SCKI 유전자에 존재하는 몇 개의 tandem repeat (TR)에 대하여 다형성을 조사하였을 때, 어떤 TR 부분은 플라스미드로부터 빈번히 결실되어 그에 대한 염기서열 결정이 어려웠다. 그 결과 이러한 부분은 클론닝 될 수 없는 염기서열로 남게 되었다. 본 연구에서는 클론닝이 어려운 두 개의 TR 영역을 저온에서 클론닝하고 nebulizer나 sonicator를 이용하여 두 개의 library를 만들어 DNA 염기서열을 결정하였다. 이러한 연구는 복잡한 고등생물의 게놈연구에서 불안정한 게놈부분의 염기서열을 결정하는데 도움을 줄 것으로 사료된다.

• 한국환경농학회지
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• 제17권3호
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• pp.195-199
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• 1998

이온화방사선을 이용하여 느타리(Pleurotus ostreatus)의 담자포자(basidiospore)로부터 섬유소 분해능이 뛰어난 변이주를 유도하고자 본 실험을 수행하였다. 담자포자를 감마선조사 후 MUF(4-methylumbelliferyl) 반응기를 이용하여 세포외분비효소의 활성도를 측정하였다. 방사선유기 변이주에서 RAPD(random amplified polymorphic DNA)의 양상을 조사하여 유전유사도를 분석하였다. 검색한 45종의 균주들은 MUF의 기질에 따라 다양한 기질분해도를 보였으며, 이 중에서 섬유소 분해능이 뛰어난 3개의 변이주 2KG-1, 2KG-2와 20KG-1를 선발하였다. RAPD 양상을 통해 조사한 변이주의 유전유사도는 대조군에 대해 $50%{\sim}52%$였고, 변이주간에는 $49%{\sim}57%$로 나타나 방사선조사에 의해 유전적 다양성이 증가되었음을 알 수 있었다. 본 연구에서 방사선조사에 의해 유기된 변이주는 섬유소성 생물폐자원의 재활용에 있어서 매우 유용하게 활용될 수 있을 것으로 기대된다.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제17권6호
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• pp.733-736
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• 2004

The study was carried out on eight Bos indicus cattle breeds namely, Sahiwal, Tharparkar, Nimari, Khilari, Deoni, Amritmahal, Hariana and Hilly cattle; two Bos taurus cattle breeds namely, Jersey and Holstein Friesian and Indicine${\times}$Taurine crossbred cattle to find out the polymorphic pattern of beta-lactoglobulin gene. The polymorphism at beta-lactoglobulin gene was detected by conducting PCR-RFLP studies on 398 bp fragment spanning over 104 bases of exon IV and 294 bases of intron IV. Two alleles A and B and three genotypes AA, AB and BB were observed in all the cattle breeds. The frequency of B allele was comparatively higher than that of A allele. The allelic frequency of A varied from 0.20 to 0.30 in Bos indicus cattle breeds and 0.19 to 0.34 in Bos taurus breeds while in crossbred cattle the frequency was estimated as 0.21. The weighted frequency of A allele was highest in Indian cattle and lowest in crossbred cattle while the frequency in taurine cattle was found to be in between indicus and crossbred cattle. The non-significant differences of allelic frequency amongst Bos indicus, Bos taurus and crossbred cattle was observed. The effect of genotype on fat percentage was also found to be non-significant in cattle.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제28권8호
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• pp.1066-1074
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• 2015

In contrast to high genetic diversity of mitochondrial DNA (mtDNA), equine Y chromosome shows extremely low variability, implying limited patrilines in the domesticated horse. In this study, we applied direct sequencing and restriction fragment length polymorphism (RFLP) methods to investigate the polymorphisms of 33 Y chromosome specific loci in 304 Chinese indigenous horses from 13 breeds. Consequently, two Y-single nucleotide polymorphisms (SNPs) (Y-45701/997 and Y-50869) and one Y-indel (Y-45288) were identified. Of those, the Y-50869 (T>A) revealed the highest variation frequency (24.67%), whereas it was only 3.29% and 1.97% in Y-45288 (T/-) and Y-45701/997 (G>T) locus, respectively. These three mutations accounted for 27.96% of the total samples and identified five Y-SNP haplotypes, demonstrating genetic diversity of Y chromosome in Chinese horses. In addition, all the five YSNP haplotypes were shared by different breeds. Among 13 horse breeds analyzed, Balikun horse displayed the highest nucleotide diversity (${\pi}=5.6{\times}10^{-4}$) and haplotype diversity (h = 0.527), while Ningqiang horse showed the lowest nucleotide diversity (${\pi}=0.00000$) and haplotype diversity (h = 0.000). The results also revealed that Chinese horses had a different polymorphic pattern of Y chromosome from European and American horses. In conclusion, Chinese horses revealed genetic diversity of Y chromosome, however more efforts should be made to better understand the domestication and paternal origin of Chinese indigenous horses.