Park, Chun-Geun;Yan, Zhi-Yi;Lee, Sang-Chul;Shon, Tae-Kwon;Park, Hee-Woon;Jin, Dong-Chun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.13
no.2
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pp.115-120
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2005
Broadening the genetic base of Platycodon grandiflorum DC. cultivar to sustain improvement requires assessment of genetic diversity available in P. grandiflorum DC.. The objective of this study was to analyze the genetic variation, genetic relationship among 48 samples collected from East-Asian Area by means of RAPD-PCR (random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction) markers. From the 18 primers tested, produced total 211 bands with an average of 11.7 bands per primer and obtained 103 polymorphic band with an average of 5.7 bands per primer,s revealed relatively high percentage of polymorphic bands (48.8%). The genetic similarities calculated from RAPD data varied from 0.688 to 0.994 and were clustered to six major groups on a criterion of 0.78 similarity coefficient. The present study has revealed the significant genetic similarity among the samples tested. The analysis of genetic relationships in P. grandiflorum using RAPD-PCR banding data can be useful for the breed improvement.
This study was carried out to develop DNA probe for specific detection of Erwinia carotovora subsp. carotovora. Universal rice primer (URP, 20 mer) developed from repetitive sequence of rice was applied for producing PCR DNA fingerprints of Erwinis spp. In E. carotovora subsp. carotovora strains, primer URP2F amplyfied polymorphic bands which are distinguisable from other Erwinia spp. A PCR band of 0.6 kb selected from PCr polymorphic bands of E. carotovora subsp. carotovora strains was cloned and evaluated as a diagnostic DNA probe. Among 28 bacterial strains including 22 Erwinia spp, the probe (pECC2F) only hybridized to total DNAs from e. carotovora subsp. carotovora strains and E. carotovora subsp. wasabiae, but sizes of hybridized bands were different between these subspecies, 10.0 kb and 3.5 kb respectively. In dot blot assays using probe pECC2F, as few as 103 colony forming units (CFU) of E. carotovora subsp. carotovora could be detected in a suspension containing about 1$\times$103 CFU of soil bacteria.
Proceedings of the Korean Society of Fisheries Technology Conference
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2001.05a
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pp.559-560
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2001
The objective of the present study was to analyze genetic variation and characteristics in rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) using amplified fragment length polymorphism(AFLP) method as molecular genetic technique, to evaluate the usefulness of AFLP as genetic markers, and to compared the efficiency of agarose and polyacrylamide sequencing gels. The amplified products were performed by agarose and sequencing gel electrophoresis to detect AFLP band patterns, respectively. Using 9 primer combinations, total of 141 AFLP bands were produced, 108 bands(82.4%) of which were polymorphic in agarose gels. In sequencing gels, total of 288 bands were generated, and 220 bands (76.4%) were polymorphic. The level of bandsharing(BS) ranged from 0.18 to 0.32 for the 9 primer combinations tested, with a mean of 0.24. Consequently, AFLP markers of these rainbow trout could be used as genetic information such as species identification, genetic relationship or analysis of genome structure, and selection aids for genetic improvement of economically importment traits in fish species.
We evaluated the phenetic relationships within six taxa of genus Oxalis L. in Korea with random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. Ten primers produced 125 bands for six taxa, and the mean number of bands per primer was 12.5. Across the six taxa, 121 (96.8%) bands were polymorphic, and only four were monomorphic. The mean number of RAPD phenotypes across the six taxa varied from 3.6 (O. stricta and O. corymbosa) to 4.8 (O. corniculata for. rubrifolia). In a simple measure of intraspecies variability according to the percentage of polymorphic bands, O. stricta and O. corymbosa exhibited the lowest variation (28.8%), and O. corniculata for. rubrifolia showed the highest (38.4%). A mean of 32.7% of the loci was polymorphic within taxa. The total interspecies genetic diversity ($H_T$) and intraspecies genetic diversity ($H_S$) was 0.362 and 0.122, respectively. On a per-locus basis, the proportion of total genetic variation due to differences among species ($G_{ST}$) was 0.663. This indicates that about 66.3% of the total variation was among species. The node of O. stricta and O. corniculata for. rubrifolia was strongly supported, with a high bootstrap value in the NJ tree and sistered with O. corniculata. According to RAPD analysis, the number of chromosomes was not congruent with a phenetic relationship.
Fifty nine strains of Agrobacterium vitis, the causal agent of crown-gall disease on grapevine, originating from different geographical regions and 16 grapevine cultivars including 35 Kyoho cultivar of Korea, were characterized by PCR polymorphic analysis using Universal Rice Primer(URP). Of 12 URP primers, primers URP1F, URP2R, URP2F, and URP4R, URP17R were available for detecting PCR polymorphic bands among the A. vitis strains. PCR polymorphic bands produced by primers URP2F and URP17R were profiled to 12 strain types. A. vitis strains originated from Kyoho cultivar of grapevine showed relatively simple genetic diversify of the four PCR types, while the A. vitis strains originated from other grapevine cultivars and type culture strains showed various genetic diversity with 8 types. Unweighted Pair-Group Method with Arithmetic mean(UPGMA) cluster analysis using the URP-PCR polymorphic bands showed 59.4. vitis strains are genetically clustered into large seven groups.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2001.08a
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pp.34-35
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2001
RAPD analysis based on numerous markers have been used to investigate patterns of genetic differentiation ann and within two cultured and wild populations represented by the species crucian carp(Carassius carassius). From RAPD analysis using five primers, a total of 442 polymorphic bands were obtained in two populations and 273 were found to be specific to a wild population. According to RAPD-based estimates, average number of polymorphic bands in wild population was approximately 1.5 times as diverse as that in cultured. The average level of bandsharing values was $0.40 \pm 0.05$ in wild population, but was $0.69 \pm 0.08$ in cultured population, With reference to bandsharing values and banding patterns, wild population was considerably more diverse than cultured population. Knowledge of the genetic diversity of crucian carp should help in formulating more effective strategies for managing this aquacultural fish species.
For preliminary molecular typing, PCR-based fingerprinting using random amplified polymorphic DNA (RAPD) is the method of choice. In this study, 14 bacterial strains were isolated from different Korean food sources, identified using 16S rRNA gene sequencing, and characterized through RAPD-PCR. Two PCR primers (239 and KAY3) generated a total of 130 RAPD bands, 14 distinct PCR profiles, 10 polymorphic bands, one monomorphic band, and four unique bands. Dendrogram-based analysis with primer 239 showed that all 14 strains could be divided into seven clades out of which clade VII had the maximum of seven. In contrast, dendrogram analysis with the primer KAY3 divided the 14 L. citreum strains into four clades out of which clade IV consisted of a maximum of 10 strains out of 14. This research identified and characterized bacterial populations associated with different Korean foods. The proposed RAPD-PCR method, based on sequence amplification, could easily identify and discriminate the lactic acid bacteria species at the strain-specific level and could be used as a highly reliable genomic fingerprinting tool.
Polymerase chain reaction (PCR) amplification of DNA as 30 different arbitrary primers and random amplified polymorphic DNAs (RAPD) analysis were performed on genomic DNA extracted from the blood of the marine rockfish (Sebastes schlegeli) from the Yellow Sea and the Southern Sea. The unique properties of the genomic DNA were used to investigate the features of the population dynamics and origins of the species. Out of 30 primers, seven generated 207 highly reproducible RAPD polymorphic products, producing approximately 2.7 polymorphic bands per primer. About 67.4% of total amplified products (307) were either polymorphic (207) to rockfish. The degree of similarity varied from 0.22 to 0.63 as calculated by bandsharing analysis. Also, the average level of bandsharing was 0.39$\pm$0.02 within the rockfish strains. The electrophoretic analysis of RAPD-PCR products showed the relatively high levels if variation between different individuals in rockfish from the Yellow Sea. However, the RAPD outlines obtained with DNA of different rockfish strains from the Yellow Sea and the Southern Sea in Korea were very similar. Also, a small number of polymorphic bands were identified. Even if further analyses or more rockfish populations are required, this result implies RAPD analysis reflects genetic differences between the geographical strains of the rockfish.
Twelve garlic cultivars collected from Korea and Mongolia were evaluated genetic similarity and diversity by RAPD method using oligo-nucleotide random primers. Genomic DNA isolated from twelve garlic cultivars were amplified by polymerase chain reaction using 143 primers, and 55 primers showed polymorphic DNA bands. Among a total of 187 bands amplified by 55 primers, 128 polymorphic bands were subjected to analysis for genetic relationship of garlic cultivars. Garlic cultivars were classified into three groups, such as group-I corresponded to Euiseong, Seosan, Samchuk and Yecheon-A, Yechun-B, Euiseong-norang, Jeongsun, Namdo, Yookback and Danyang cultivars, and group-II to Mongolia and group-III to Daeseo cultivars. Thirty DNA bands showing unique specificity to the specific cultivars are likely to be useful for identification of garlic local cultivars as DNA markers.
Cho, Young-Chan;Shin, Young-Seop;Ahn, Sang-Nag;Gleen B. Gregorio;Kang, Kyong-Ho;Darshan Brar;Moon, Huhn-Pal
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.44
no.1
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pp.26-31
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1999
This experiment was conducted to evaluate genetic variation in 48 rice accessions (Oryza sativa L.) using AFLP and RAPD markers. For AFLP, a total of 928 bands were generated with 11 primer combinations and 327 bands (35.2%) of them were polymorphic among 48 accessions. In RAPD analyses using 22 random primers 145 bands were produced, and 121 (83.4%) were polymorphic among 48 accessions. Each accession revealed a distinct fingerprint by two DNA marker systems. Cluster analysis using AFLP-based genetic similarity tended to classify rice cultivars into different groups corresponding to their varietal types and breeding pedigrees, but not using RAPD-based genetic similarity. The AFLP marker system was more sensitive than RAPD in fingerprinting of rice cultivars with narrow genetic diversity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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