• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제10권3호
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• pp.198-204
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• 2005

Seeds of neem were collected from different parts of India and analyzed for their azadirachtin content by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). In order to assess the effects of genotypic and geographical variation on azadirachtin content in cell cultures, callus development was attempted in the seeds containing high and low concentration of azadirachtin. The concentration of azadirachtin in callus cultures was significantly affected by the explant source. Seed kernels with higher azadirachtin content produced higher azadirachtin content in callus cultures and lower azadirachtin content was seen in callus cultures produced from seed kernels with low azadirachtin content. The protocol for development of elite stock culture of Azadirachta indica was established with the objective of selecting a high azadirachtin-producing cell line. The highest azadirachtin-producing cell line was selected and the effects of different media and illumination conditions on growth and azadirachtin production were studied in shake flask suspension culture. Detailed batch growth kinetics was also established. These studies provided elite starter culture and associated protocols for cultivation of A. indica plant cell culture in the bioreactor.

• 한국자원식물학회지
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• 제10권2호
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• pp.122-127
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• 1997

가시오갈피의 조직배양을 통한 대량증식방법체계 확립의 한 방법으로 미숙배 배성숙정도 및 배지의 종류가 callus 형성 및 식물체 분화에 미치는 영향을 구명코자 실시한 실험결과는 다음과 같다. 1. 미숙배배양으로부터 캘러스형성은 MS, WPM 배지보다 SH 배지가 더 효과적이었으며, SH 배지에 2,4-D 1mg$\iota$를 첨가시 83.3%의 캘러스형성율을 보였다. SH배지에 TDZ을 단독처리하였을 때 보다 양호한 신초 분화를 나타났고 배의 성숙정도가 C단계 (2mm이상)인 미숙배를 치상하였을 때가 미숙배의 크기가 2mm 이하인 A, B단계의 미숙배를 치상하였을 때보다 식물체 분하가 더 잘되었다. 2. SH배지를 기본으로 하여 2,4-D와 TDZ을 조합처리하였을 때 배의 성숙정도가 C(2mm이상)인 배를 2,4-D 0.1mg/$\iota$+TDZ 3mg/$\iota$ 처리시 양호한 신초 분화를 보였다. 3. WPM 배지를 기본으로 하여 2,4-D와 TDZ을 처리하였을 때 배의 성숙정도가 C(2mm이상)인 배를 TDZ 0.1mg/$\iota$ 처리시 4.7개의 신초로 양호한 결과를 보였다.

• 한국초지조사료학회지
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• 제26권4호
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• pp.187-192
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• 2006

오차드그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 8가지 품종의 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터의 식물체 재분화 효율을 조사하였다. 4주 동안 배양한 종자로부터 캘러스 유도율은 Frontier, Roughrider, 93E, Frode, Potomac, Ambassador, Hapsung 2, Amba 순으로 높은 캘러스 유도율을 보였고 식물체로의 재분화율은 Roughrider, Frontier, Potomac, Frode, Amba, Hapsung2, 93E, Ambassador 순으로 나타났다. 전체적으로는 캘러스 유도율이 높은 품종이 식물체 재분화율도 높은 경향을 나타내었다. 본 연구를 통하여 밝혀진 캘러스 유도와 식물체 재분화율이 우수한 품종은 분자육종을 통한 신품종 오차드그래스의 개발에 유용하게 이용될 수 있을 것이다.

• Plant Biotechnology Reports
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• 제3권1호
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• pp.67-74
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• 2009

An efficient micropropagation protocol based on multiple shoot induction and callus regeneration has been standardized in Sarcostemma brevistigma, a rare medicinal plant. The nodal cuttings were cultured on MS medium supplemented with BA ($0.5-8{\mu}M$) or Kn ($0.5-8{\mu}M$) alone or in combination with NAA ($0.5-1.5{\mu}M$). Maximum multiple shoot induction was observed on MS medium supplemented with $4{\mu}M$ BA. On this medium, 100% cultures responded with an average number of 11.3 shoots per explant. However, the average shoot length was limited to only 0.9 cm on this medium. The addition of $1{\mu}M$ NAA along with $4{\mu}M$ BA gave rise to an average number of 10.9 shoots with an average shoot length of 1.8 cm. Luxuriantly growing callus was obtained on MS medium supplemented with BA ($5{\mu}M$) and 2,4-D ($2{\mu}M$). The callus was subcultured on MS medium supplemented with BA ($2-15{\mu}M$) or Kn ($2-15{\mu}M$) alone or in combination with NAA ($0.5-2{\mu}M$) for shoot organogenesis. Optimum callus regeneration was obtained on MS medium supplemented with $10{\mu}M$ BA and $1{\mu}M$ NAA. On this medium, 100% cultures responded with an average number of 13.4 shoots per culture. The shoots obtained via multiple shoot induction and organogenesis were rooted on half-strength MS medium supplemented with NAA ($1-7{\mu}M$) or IBA ($1-7{\mu}M$). IBA was better than NAA in terms of both the percentage of cultures that responded and the average number of roots per explant. The rooted shoots were successfully transplanted to soil with 86% success. This standardized protocol will help to conserve this rare medicinal plant.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제39권3호
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• pp.182-188
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• 2012

Iris dichotoma Pall. is an important endangered plant belonging to the family Iridaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of I. dichotoma through plant regeneration from leaf, rhizome, and root explant-derived calli. Leaf, rhizome, and root segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D; $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for callus induction. Callus production was highest at $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D, where 73.8% and 45.5% of cultured rhizome and root cuttings, respectively, produced calli. The viable calli were maintained at an induced concentration of 2,4-D ($3.0mg{\cdot}L^{-1}$). They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of 2,4-D ($0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with 6-benzyladenine (BA: 0, 1.0 and $3.0mg{\cdot}L^{-1}$) for adventitious shoot regeneration. The addition of a low concentration of 2,4-D into BA-containing medium significantly increased the frequency of shoot regeneration in leaf, rhizome, and root-derived calli. The highest number of adventitious shoots (26.4 per callus) formed at $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg/l BA. For rooting of the shoots, half- strength MS medium supplemented with different concentrations of indole 3-butyric acid (IBA) $0-3.0mg{\cdot}L^{-1}$ was tested. The optimal results were observed using half-strength MS medium supplemented with $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ IBA, on which 98% of the regenerated shoots developed roots with an average of 3.5 roots per shoot within 45 days. The plantlets raised in vitro were acclimatized and transferred to soil with 95% success. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.

• 한국초지조사료학회지
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• 제24권3호
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• pp.265-270
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• 2004

켄터키 블루그래스의 종자배양에서 캘러스 형성 및 식물체 재분화 체계를 확립하기 위하여 배지조성 및 배양조건 등에 따른 배양효율의 차이를 'Kenblue'를 공시품종으로 사용하여 수행한 실험의 결과를 요약하면 다음과 같다. 성숙종자로부터 캘러스 유도를 위한 생장조절제로는 2 mg/L 2,4-D와 0.2 mg/L BAP 조합이 가장 효과적이었으며, 유도된 캘러스로부터 식물체 재분화를 위해서는 1 mg/L NAA와 5mg/L kinetin 조합이 가장 효과적이었다. 캘러스 유도시 암상태에서 배양하는 것이 약한 광 상태에서 배양하는 것보다 효과적이었으며, 캘러스 유도와 식물체 재분화에 있어 기본배지로 N6 배지나 B5 배지보다 MS 배지를 사용하는 것이 식물체 재분화에 효과적이었다. 배지 내에 첨가되는 탄소원으로는 maltose가 sucrose 보다 효과적이었다.

• 한국초지조사료학회지
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• 제24권1호
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• pp.29-36
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• 2004

들잔디(Zoysia japonica Steud.)의 최적 조직 배양 조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 최적 캘러스 유도 및 효율적인 식물체 재분화에 미치는 몇 가지 요인의 영향을 조사하였다. 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도율은 3mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 배지에서 85%로 가장 높았으며 NAA 또는 IAA를 첨가한 처리구보다 높게 나타났다. 배발생 캘러스로부터 식물체 재분화는 0.1 mg/L 2,4-D와 5 mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 73.3%로 가장 높게 나타났다. 기본배지의 종류에 따른 배양효율의 차이는 배발생 캘러스 유도에는 MS 배지가, 식물체 재분화에는 N6배지가 가장 효과적이었다. 재분화 된 식물체는 1/2 MS rooting 배지에서 뿌리를 형성되어 pot에 이식하였을 때 정상적으로 분화되어 생장하였다. 본 연구를 통하여 확립된 단기간 고효율 재분화 시스템은 분자육종을 통한 신품종 들잔디의 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.

• 한국초지조사료학회지
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• 제31권3호
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• pp.229-234
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• 2011

갈대의 성숙종자로부터 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 종자로부터 캘러스 유도 및 식물체 재분화 체계를 확립하였다. 종자로부터 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 2,4-D가 가장 효율적이었으며, 1.0 mg/L 2,4-D와 0.5 mg/L BA가 첨가된 MS 배지에서 가장 높은 빈도로 캘러스가 유도되었다. 캘러스로부터 식물체 재분화는 cytokinin류인 BA와 kinetin이 첨가되지 않은 MS 배지에서 59.6%로 높은 재분화 효율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 성숙종자로부터의 고효율 재분화 시스템은 유전자 형질전환기술을 이용한 신품종 갈대 개발에 유용하게 이용 될 수 있을 것이다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제1권1호
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• pp.31-38
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• 1999

An artificial symbiosis was established between diazotropic Azomonas insignis and strawberry (Fragaria x ananassa). The partnership was created by in vitro techniques through callus induction and organogenesis. The basis of this partnerships is the bacterial dependence on the plants metabolic activity, using maltose in the medium as a carbon and energy source which can be utilized by the plant cells only. The presence of bacteria in the intercellular spaces of the callus tissues and regenerated plants was proven by microscopic techniques. Nitrogenase activity could also be detected in the plant tissues. For successful and high frequency introduction of bacteria to the plant tissues, biolistic gun method was used. On the basis of the DNA transfer method, Azotobacter vinelandii bacteria were delivered directly into strawberry tissues by the particle bombardment. This was the first use of living bacteria as microprojectils for bombardment of plant tissues. The treatment was successful, the presence of bacteria in the developing callus tissue and regenerated plants were detected by light and electron microscopy.

• 한국약용작물학회지
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• 제4권2호
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• pp.126-131
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• 1996

약용식물(藥用植物)로써 이용 가능성 큰 어성초(魚腥草)의 이차(二次) 대사산물(代謝産物)의 생산에 기초가 되는 조직배양체계(組織培養體系)를 확립하고자 어성초(魚腥草)의 절간(節間), 절(節) 및 엽(葉)의 절편체(切片體)를 이용(利用)하여 캘러스를 형성(形成)시키고, 형성(形成)된 캘러스로부터 식물체(植物體) 재분화(再分化)를 시도하였다. 1. Embryogenic 캘러스 형성(形成)은 모든 절편체(切片體)에서 2, 4-D 1 mg/L와 kinetin 0. 5 mg/L을 첨가(添加)하였을 때 가장 효과적이었다. 2. 절간(節間)에서의 캘러스 형성(形成)이 엽(葉)보다 더 효과적이었다. 3. 어성초(魚腥草)의 절간(節間)으로부터 embryogenic 캘러스 형성(形成)은 ${\frac{1}{2}}\;MS$ 배지(培地)가 효과적이었다. 4. 배지내(培地內)에 1%의 활성탄(活性炭)을 첨가(添加)하였을 경우 캘러스를 형성(形成)시키지 않고 배양(培養)된 절(節)로 부터 직접 식물체(植物體)가 분화(分化)되었다. 5. Embryogenic 캘러스로부터 식물체(植物體) 재분화(再分化)는 0. 2 mg/L NAA와 1 mg/L BA를 첨가(添加)한 배지(培地)가 다른 조합(組合)의 배지(培地)보다 분화율(分化率)이 높았다.