다양한 배양조건을 이용하여 당근 모상근의 생장과 carotenoid 함량을 조사하였으며, 이러한 배양조건을 airlift형생물 반응기에 적용하여 모상근의 다량 배양을 시도하였다. 고형배지 배양에서의 carotenoid 함량은 광조건에서 배양된 모상근이 암조건에서 배양된 모상근보다 10배 정도 증가하였으며, 모상근의 생장은 광조건이 암조건보다 낮은 수준이었다. 공기 유출기 배양에서는 모상근이 광조건과 암조건 모두에서 매우 빠르게 생장하여 생줄량의 차이가 없었으며, 모상근의 생장과 carotenoid 함량에 있어서 빛의 조사는 모상근의 전체적인 생중량을 증가시키기 보다는 배양 후기 생장단계에서 carotenoid 함량을 증가시켜서 암조건에 비하여 10배 정도의 carotenoid(11 $\mu\textrm{g}$/g)를 생산하였다. 모상근을 생물 반응기에서 배양하였을 때, 모상근이 지수함수적으로 빠르게 생장하여 배양 25일 동안에 처음 무게의 11배를 나타내었다. 그리고 pH는 처음 5.5에서 5일후 4.9로 떨어지다가 그 이후에 일정한 수준(pH 4.8)을 보여주었으며, 광주기와 광도을 조절하지 않은 상태에서의 carotenoid 함량은 2$\mu\textrm{g}$/g으로 나타났다.
Suspension cultures of Digitalis lanata were successfully performed in an aqueous two-phase system (ATPS) of 4.5% polyethylene glycol (PEG) 20,000 and 2.8% crude dextran. Cell growth in the medium containing an individual ATPS-forming polymer was inhibited due to the toxicity of PEG and a high viscosity of dextran. Formation of ATPS supported cell growth by showing a considerably decrease in viscosity and partitioning of cells into a PEG-lean dextran phase. It was found that an aqueous two-phase cultivation of plant cells in a stirred tank bioreactor could be successfully applied.
Ginseng(Panax ginseng C. A. Meyer) is important medicinal plant but requires 4-year cultivation for root harvest because of slow growth. In contrast, ginseng hairy roots induced by introducing Ri-plasmid of Agrobacterium rhizogenes into genomic DNA of plant cells show vigorous growth, and the hairy roots produce the same or more saponins than natural ginseng roots. Therefore, hairy roots can be used for commercial purposes. The present study was carried out to induce hairy roots with both active growth and high saponin contents. Numerous hairy roots of Panax ginseng were obtained after root disks of three-year old roots were infected with Agrobacterium rhizogenes R1000 A4T in dark condition after one month of culture. About 3 hundred lines of hairy roots were selected according as morphological characters on medium with carbenicillin. After pre-selection of fifteen lines of hairy roots with active growth, KGHR-l and KGHR-8 lines were finally selected which had characters of high content of ginsenoside-Rd and ginsenoside-Re, respectively. The optimum growth of hairy roots was achieved in the culture of 1/2 MS liquid medium in dark (22 $^{\circ}C$) under 60 rpm gyratory shaking. Hairy roots grew well in 5L Erlenmeyer flasks, lL roller drums, 10L jar-fermenters, and especially in 20L air-lift culture vessels.
This paper reported the establishment of mass production system of adventitious roots of Codonopsis lanceolata through shake flask and bioreactor culture. Induction of adventitious roots was started from the explants of leaf, stem and root on 1/2 strength Murashing and Skoog (MS) solid medium. Stem segments were the best explants for induction of adventitious roots compared to leaf and root segments. Among the different auxins tested (NAA, IBA and IAA), number of adventitious root per explant was highest on solid medium with 1.0 mg/L IBA, and produced $9.9{\pm}1.2$ roots per explant. However, growth of adventitious roots was fast in the presence of IBA at low concentration (0.1 mg/L). In shake flask culture, maximum production of adventitious roots (fresh weight) was obtained in half-strength MS medium compared to full-strength and one-third MS medium. When the adventitious roots produced in shake-flask culture were transferred to 5 L air-lift bioreactor, 16 times of fresh weight increase was gained after one month of culture. These results indicate that this protocol for the production of C. lanceolata adventitious roots can be applied to large scale culture for practical application.
Shin, Teak Soo;Yu, Nan Hee;Lee, Jaeho;Choi, Gyung Ja;Kim, Jin-Cheol;Shin, Chul Soo
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.3
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pp.337-344
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2017
To develop a commercial product using the mycoparasitic fungus Simplicillium lamellicola BCP, the scale-up of conidia production from a 5-l jar to a 5,000-l pilot bioreactor, optimization of the freeze-drying of the fermentation broth, and preparation of a wettable powder-type formulation were performed. Then, its disease control efficacy was evaluated against gray mold diseases of tomato and ginseng plants in field conditions. The final conidial yields of S. lamellicola BCP were $3.3{\times}10^9conidia/ml$ for a 5-l jar, $3.5{\times}10^9conidia/ml$ for a 500-l pilot vessel, and $3.1{\times}10^9conidia/ml$ for a 5,000-l pilot bioreactor. The conidial yield in the 5,000-l pilot bioreactor was comparable to that in the 5-l jar and 500-l pilot vessel. On the other hand, the highest conidial viability of 86% was obtained by the freeze-drying method using an additive combination of lactose, trehalose, soybean meal, and glycerin. Using the freeze-dried sample, a wettable powder-type formulation (active ingredient 10%; BCP-WP10) was prepared. A conidial viability of more than 50% was maintained in BCP-WP10 until 22 weeks for storage at $40^{\circ}C$. BCP-WP10 effectively suppressed the development of gray mold disease on tomato with control efficacies of 64.7% and 82.6% at 500- and 250-fold dilutions, respectively. It also reduced the incidence of gray mold on ginseng by 65.6% and 81.3% at 500- and 250-fold dilutions, respectively. The results indicated that the new microbial fungicide BCP-WP10 can be used widely to control gray mold diseases of various crops including tomato and ginseng.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.32
no.10
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pp.949-956
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2010
A method for simultaneous removal of nitrogen and phosphate from sewage by elemental sulfur denitrification with membrane bioreactor was proposed, and capacity $10\;m^3$/day of pilot plant was operated for 350 days. This study was investigated to have the effect of denitrification rate and T-P removal with the addition of Alum in Sulfur denitrification Reactor (SDR). The addition of Alum and alkalinity ($NaHCO_3$) in the effluent of MBR was tried to remove simultaneous phosphate and nitrogen in SDR. Characteristics of total nitrogen (T-N) and total phosphate (T-P) removal was compared without and with the addition of Alum as a coagulant. T-N removal without and with the addition of Alum was 92.1% and 87.8%, respectively. And denitrification efficiency was 93.8% and 87.1%, respectively. T-P removal rate was increased to 75.6% in SDR by addition of Alum (2.6~4 mg/L as Al), but T-P removal rate was about 26.7% without the addition of Alum. Therefore, denitrification rate was 6.7% of reduction but T-P removal rate was increased by addition of Alum.
Kim, Seon-Ja;Park, So-Young;Moon, Heung-Kyu;Lee, Wi-Young
Journal of Korean Society of Forest Science
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v.99
no.1
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pp.125-130
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2010
The application of bioreactor culture techniques for plant micropropagation is regarded as one of the ways to reduce production cost by scaling-up and automation. In an attempt to optimize mass proliferation systems in Eucalyptus pellita, four types of bioreator systems including temporary immersion system with or without net were tested. Highest growth was achieved with 30-min flushes of medium at every 4-h intervals in TIN (temporary immersion with net) system. Results indicate over three-fold increase in shoot growth with the TIN system when compared with TIX (control: temporary immersion without net) system which is without net in bioreactor. Furthermore, plants produced from the TIN system increased total chlorophyll content, chlorophyll a/b and dry matter, giving higher yields of acclimatized plants. Our findings suggest that plantlet growth increases with appropriate exposure to media at correct intervals, as well as use of net for maintaining aerobic condition in the vessels. The TIN system thus has great potential for in vitro mass production of Eucalyptus clones commercially.
Parameters related to dissolved oxygen for the production of pullulan by Aureobasidium pullulans HP-2001 were optimized in 7 l and 100 l bioreactors. The optimal concentrations of glucose and yeast extract for the production of pullulan were 50.0 and 2.5 g/l, respectively, and its conversion rate from glucose was 37% at a flask scale. The optimal initial pH of the medium and temperature for cell growth were 7.5 and $30^{\circ}C$, whereas those for the production of pullulan were 6.0 and $25^{\circ}C$. The optimal agitation speed and aeration rate for cell growth were 600 rpm and 2.0 vvm in a 7 l bioreactor, whereas those for the production of pullulan were 500 rpm and 1.0 vvm. The production of pullulan with an optimized agitation speed of 500 rpm and aeration rate of 1.0 vvm was 18.13 g/l in a 7 l bioreactor. Maximal cell growth occurred without inner pressure, whereas the optimal inner pressure for the production of pullulan was 0.4 kgf/$cm^2$ in a 100 l bioreactor. The production of pullulan under optimized conditions in this study was 22.89 g/l in a 100 l bioreactor, which was 1.38 times higher than that without inner pressure.
Kim, Hye Jin;Lee, Jong Nam;Kim, Ki Deog;Kwon, Gi Bum;Yoo, Dong Lim;Lim, Hak Tae;Yeoung, Young Rok
Horticultural Science & Technology
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v.33
no.4
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pp.585-590
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2015
This study was conducted to improve the acclimatization rate of in vitro strawberry plantlets through bioreactor culture using the growth retardant flurprimidol. Different concentrations [0 (Control), 0.1, 0.5, 1.0, and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$] of flurprimidol were added during bioreactor culture. After six weeks of treatments, various growth characteristics were investigated and in vitro plantlets were acclimated in the greenhouse. The growth rate of treated plantlets was much lower than that of control, and as the treatment concentration increased, the growth rate was much decreased. Shoots of plantlets treated with flurprimidol were shorter (2.2-3.7 cm) than those of control (7.9 cm). The number of roots per treated plant was around 11.6-34.2, compared with 51.8 in the control. Root length was also lower (0.88-3.08 cm) than control (4.36 cm). However, the number of new shoots and leaves increased in all treatments except for $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ concentration. The root was partially decayed in $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ concentration and was completely decayed in $2.0mg{\cdot}L^{-1}$. The survival rate in $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ and $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ concentrations was 100% and 23.3% respectively. After four weeks of acclimatization, the plantlets restarted growth, and growth characteristics of shoots and roots recovered to the levels of control, except for fresh weight. Based on our results, a concentration of $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ flurprimidol is appropriate for improvement of acclimatization rate of in vitro strawberry plantlets in bioreactor culture.
An, Jin-Young;Kwon, Joong-Chun;Kim, Yun-Hak;Jeng, Yoo-Hoon;Kim, Doo-Eon;Ryu, Sun-Ho;Kim, Byung-Woo
Clean Technology
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v.12
no.2
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pp.67-77
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2006
A simple dual sludge process, called as $KNR^{(R)}$ (Kwon's Nutrient Removal) system, was developed for small sewage treatment. It is a hybrid system that consists of an UMBR (Upflow multi-layer bioreactor) as anaerobic and anoxic reactor with suspended denitrifier and a post aerobic biofilm reactor, filled with pellet-like media, with attached nitrifier. To evaluate the stability and performance of this system for small sewage treatment, the pilot-scale $KNR^{(R)}$ plant with a treatment capacity of $50m^3/d$ was practically applied to the actual sewage treatment plant, which was under retrofit construction during pilot plant operation, with a capacity of $50m^3/d$ in a small rural community. The HRTs of a UMBR and a post aerobic biofilm reactor were about 4.7 h and 7.2 h, respectively. The temperature in the reactor varied from $18.1^{\circ}C$ to $28.1^{\circ}C$. The pilot plant showed stable performance even though the pilot plant had been the severe fluctuation of influent flow rate and BOD/N ratio. During a whole period of this study, average concentrations of $COD_{cr}$, $COD_{Mn}$, $BOD_5$, TN, and TP in the final effluent obtained from this system were 11.0 mg/L, 8.8 mg/L, 4.2 mg/L, 3.5 mg/L, 9.8 mg/L, and 0.87/0.17 mg/L (with/without poly aluminium chloride(PAC)), which corresponded to a removal efficiency of 95.3%, 87.6%, 96.3%, 96.5%, 68.2%, and 55.4/90.3%, respectively. Excess sludge production rates were $0.026kg-DS/m^3$-sewage and 0.220 kg-DS/kg-BOD lower 1.9 to 3.8 times than those in activated sludge based system such as $A_2O$ and Bardenpho.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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