The relationship between relative water contents of lettuce leaves and biochemical activities in lettuce was examined in this study to explore an adaptation response of lettuce to water stress from soils. Soil water contents and relative water contents of leaves were positively related to show $R^2$=0.8728. Hydrogen peroxide contents of leaves rapidly increased with reduction of soil water content, whereas soluble protein contents and dry matters rapidly decreased. And chlorophyll a and b contents of leaves decreased with increase in carotenoid content. Furthermore, the activities of ascorbate peroxidase (APX), monodehydroascorbate reductase (MDHAR), and dehydroascorbate reductase (DHAR) increased dramatically, and mRNA transcript levels of APX, MDHAR and DHAR also increased. Relationship of relative water content of lettuce leaves to hydrogen peroxide, to ascorbate peroxidase activity, to dehydroascorbate reductase activity, and to monodehydroascorbate reductase activity was shown to be positively correlated. It is highly plausible from this study that these enzyme activities could be developed as an indicator of water states in soils.
식물의 저온 적응 메카니즘에서 아스코브산과 관련된 효소 중 MDHA 환원효소의 활성도와 과산화수소, 아스코브산의 함량, mRNA의 발현수준과의 연관성을 연구한 결과는 다음과 같다. MDHA 환원효소의 활성도 변화는 저온에 노출되는 시간이 길어질수록 증가하였으며 6시간 이후에 엽록체분획과 세포질분획에서 급격하게 증가하는 경향을 보였으나 실온으로 회복시켰을 때 효소의 활성도가 상대적으로 감소하는 경향을 보였다. 저온에 노출된 동안 아스코브산의 함량은 비교적 일정한 경향을 보이다가 실온으로 회복시키면 그 이후에는 급격하게 증가하는 경향을 보였다. 반면 저온에 노출되는 동안 급격히 dehydroascorbate 함량이 감소하였다가 실온으로 회복되면 약간 증가하는 경향을 보였다. 아스코브산의 함량과 엽록체분획과 세포질분획의 MDHA 환원효소의 활성도와의 상관관계는 각각 정의 상관($R^2$=0.9240, 0.9108)을 나타내었으나 디하이드로아스코브산의 함량과 MDHA 환원효소의 활성도 사이에는 각각 부의 상관($R^2$=0.8638, 0.8980)을 나타내었다. MDHA 환원효소 활성도와 과산화수소의 함량과의 상관관계를 과산화수소의 생성량이 증가하면 MDHA 환원효소의 활성도가 증가하는 정의 상관($R^2$=0.9443, 0.9647)을 나타내었다. 저온스트레스 처리 시간이 증가할수록 MDHA 환원효소의 mRNA의 발현 수준과 총 MDHA 환원효소의 활성도가 증가하는 경향을 나타내었다.
Three-week grown Arabidopsis thaliana leaves were wounded by cutting whole leaves with a razor blade into pieces (about$3\;mm\;{\times}\;3\;mm$) submerged in various solutions, and incubated in a growth chamber for 24 h. We measured and compared activities of several enzymes such as phenylalanine ammonia-lyase (PAL), tyrosine ammonia-lyase (TAL), thioredoxin, thioredoxin reductase, thioltransferase, glutathione reductase, and $NADP^+$ -malate dehydrogenase. PAL activity was decreased in $HgCl_2$-, $CdCl_2$-, and glyphosate-treated leaf slices, and could not be detected after treatment with $CdCl_2$. TAL activity was found to be maximal in the $CdCl_2$-treated leaf slices. Activity of thioredoxin, a small protein known as a cofactor of ribonucleotide reductase and a regulator of photosynthesis, was significantly increased in the $CdCl_2$-treated leaf slices, while thioredoxin reductase activity was maximal in the $HgCl_2$-treated leaf slices. Thioltransferase and glutathione reductase activities were significantly decreased in the $HgCl_2$-treated leaf slices. $NADP^+$ -malate dehydrogenase activity remained relatively constant after the chemical treatments. Our results strongly indicate that sulfhydryl-related and phenylpropanoid-synthesizing enzyme activities are affected by chemical treatments such as hydrogen peroxide, heavy metals, and glyphosate.
Sprague-dawley 숫쥐를 식이지방을 달리하여(I:Soybean oil p/s 4.0, II:beef tallow p/s 0.08) 이유후 8주동안 사육하였다. 이때 I,II군은 각각 기초식이군, 기초식이군에 0.3% butylated hydroxytoluene(BHT)를 첨가신킨 군, 생후 5~7주 사이에 4번의 2-Acetylaminofluorene(2-AAF)를 투여한 군 2-AAF를 투여하고 BHT도 먹인 군으로 나누었다. BHT는 이유 후부터 식이에 섞어 먹였으며 2-AAF를 투여하지 않은 군읜 2-AAF 주사에 의해 얻는 stress와 같은 효과를 주기위해 placebo로 polyethylene glycol 300을 투여하였다. Mixed function oxidase(MFO)계의 효소인 cytochrome p-450, cytochrome b$_5$및 cytochrome p-450 reductase와 과산화지질 등을 측정하였다. 성장기에 2-AAF의 투여는 성장지연을 초래하였으며 지질과산화물은 지방의종류, 2-AAF,BHT 등에 의해 큰 차는 없었다. Cytochrome p-450은 2-AAF에 의해 I-BHT-AAF와 II-AAF군에서 증가되었고 BHT에 의해서는 차이가 나지 않았다. 불포화지방을 먹인경우 cytochrome p-450과 cytochrome p-450 reductase가 2-AAF에 의해 증가되기보다는 오히려 감소하거나 I,II군에 비해 별 차이가 없었는데 2-AAF의 농도와 식이의 불포화도가 높아 세포막이 손상되었기 때문이라 사료된다. Cytochrome $b_5$는 각군 사이에 별 차가 없었다. Cytochrome p-450과 과산화지질(r=0.2475, p<0.05), cytochrome p-450 reductase와 cytochrome $b_5$ (r=0.2475, P<0.05)가 각각 양의 상관관계를 나타내었다. 따라서 2-AAF를 대사시키는 MFO계는 식이지방의 종류 및 BHT의 존재에 따라 영향을 받고, 특히 불포화지방식이인 경우 2-AAF를 대사시킬 수 있는 cytochrome p-450 유도 및 합성능력이 매우 저조함을 알 수 있으며 2-AAF는 어린 쥐의 성장을 지연시켰다.
Eight compounds were isolated from the fruiting bodies of Ganoderma applanatum, and were identified as 2-methoxyfatty acids (1), 5-dihydroergosterol (2), ergosterol peroxide (3) $3{\beta},7{\beta},20,23{\zeta}-tetrahydroxy-11,15-dioxolanosta-8-en-26-oic$ acid (4), $7{\beta},20,23{\zeta}-trihydroxy-3,11,15-trioxolanosta-8-en-26-oic$ acid (5), cerevisterol (6), $7{\beta},23{\zeta}-dihydroxy-3,11,15-trioxolanosta-8,20E(22)-dien-26-oic$ acid (7), and $7{\beta}-hydroxy-3,11,15,23-tetraoxolanosta-8,20E(22)-dien-26-oic$ acid methyl ester (8) by spectral analysis. All compounds were isolated for the first time from this fruiting bodies, and their effect on rat lens aldose reductase (RLAR) activity was tested. Among these eight compounds, ergosterol peroxide (3) was found to exhibit potent RLAR inhibition, its $IC_{50}$ value being $15.4\;{\mu}g/mL$.
This study determined hepatic microsomal lipid peroxide values glucose 6-phosphatase NA-DPH-cytochrome P450 reductase and cytosolic glutathione S-transferase activites to examine the effects of methyl group deficiency on hepatic lipid peroxidation in rats treated with diethylni-trosamine(DEN) and 2-acetylamionfluorene(AAF) Weanling sprague Dawley male rats were fed the diet with methyl group supplemented or deficient. Two weeks after feeding rate were injected with a single of 200mg/kg body weight DEN intraperitoneally and after four weeks 0.02% AAF containing diets were fed for two weeks. Animals were sacrificed at 6th week. Microsomal lipid peroxide values were tended to increase in methyl group deficiency(MD). Especially in case of carcinogen tratments lipid peroxide values were increased significantly in MD. Microsomal glucose 6-phophatase activities were decreased by MD and carcinogens and in MD with carcinogen group (MD+C) the enzyme activites were the lowest Glucose 6-phosphatase activities were negatively correlated with lipid peroxidation. Microsomal NADPH-cytochrome P450 reductase activities were the highest in MD+C and correlated positively with lipid peroxidation. Cytosolic glutathione S-transferase activities were the highest in MD+C Methyl group deficiency induces lipid peroxidation especially in case of being exposed to carcinogens. Therefore the results suggest that lipid peroxidation may be one of the meachanisms of carcinogensis by methyl group deficiency.
Cho, Song-Mi;Kim, Yong Hwan;Anderson, Anne J.;Kim, Young Cheol
The Plant Pathology Journal
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제29권4호
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pp.427-434
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2013
2R,3R-Butanediol, a volatile compound produced by certain rhizobacteria, is involved in induced drought tolerance in Arabidopsis thaliana through mechanisms involving stomatal closure. In this study, we examined the involvement of nitric oxide and hydrogen peroxide in induced drought tolerance, because these are signaling agents in drought stress responses mediated by abscisic acid (ABA). Fluorescence-based assays showed that systemic nitric oxide and hydrogen peroxide production was induced by 2R,3R-butanediol and correlated with expression of genes encoding nitrate reductase and nitric oxide synthase. Co-treatment of 2R,3R-butanediol with an inhibitor of nitrate reductase or an inhibitor of nitric oxide synthase lowered nitric oxide production and lessened induced drought tolerance. Increases in hydrogen peroxide were negated by co-treatment of 2R,3R-butanediol with inhibitors of NADPH oxidase, or peroxidase. These findings support the volatile 2R,3R-butanediol synthesized by certain rhizobacteria is an active player in induction of drought tolerance through mechanisms involving nitric oxide and hydrogen peroxide production.
The present study describes the ameliorating effect of $Ca^{++}\;on\;Cd^{++}$ toxicity on the germination, early growth of mungbean seedlings, nitrogen assimilation enzyme. s-nitrate reductase (NR), nitrite reductase (NIR), anti-oxidant enzymes (POD, CAT and SOD) and on the accumulation of hydrogen peroxide and sulphydryls. $Cd^{++}$ inhibited seed germination and root and shoot length of seedlings. While NR activity was down- regulated, the activities of NIR, POD and SOD were up- regulated with $Cd^{++}$ treatment. $Cd^{++}$ treatment also increased the accumulation of sulphydryls and peroxides, which is reflective of increased thiol rich proteins and oxidative stress. $Ca^{++}$ reversed the toxic effects of $Cd^{++}$ on germination and on early growth of seedlings as well as on the enzyme activities, which were in turn differentially inhibited with a combined treatment with calcium specific chelator EGTA. The results indicate that the external application of $Ca^{++}$ may increase the tolerance capacity of plants to environmental pollutants by both up and down regulating metabolic activities. Abbreviations: $Cd^{++}= cadmium,\;Ca^{++} = calcium$, NR= nitrate reductase, NIR=nitrite reductase, POD = peroxidse, SOD= superoxide dismutase, CAT= catalase, EGTA= ethylene glycol-bis( $\beta-aminoethyl ether$)-N,N,N,N-tetraacetic acid.
N-nitrosoethylurea(NEU)에 의한 지질 과산화물의 함량 변화와 알데히드 대사효소 및 항산화효소의 활성변화를 쥐 간세포에서 측정하였다. 알데히드 대사효소로는 alcohol dehydrogenase와 aldehyde dehydrogenase가 사용되었고 항산화효소로는 glutathione transferase, superoxide dismutase, glutathione reductase와 catalase가 사용되었다. 쥐 간세포에 다양한 농도의 NEU를 처리한 후 지질 과산화물의 함량변화를 측정하였다. 그 결과 6.25mM NEU에 의하여 지질 과산화물의 함량이 최대 2.5배 증가하였다. Alcohol dehydrogenase의 활성은 NEU처리에 의하여 대조군보다 최대 2.3배 증가하였고 aldehyde dehydrogenase의 활성은 약 2배 증가하였다. 전암성 병변의 지표로 이용되는 glutathione transferase와 catalase의 경우 NEU처리에 의한 활성증가가 미미하였다. 그러나 superoxide dismutase의 활성은 최대 1.5배 증가하였고, glutathione reductase의 활성은 약 3배 증가하였다. 그러므로 superoxide dismutase와 g1utathione reductase의 활성증가가 NEU의 독성에 대한 세포내 항산화 방어과정에서 중요한 역할을 할 것으로 추측된다
수분 공급을 제한하여 수분 부족 스트레스를 처리한 상추식물에서 산화적 스트레스와 관련된 monodehydroascorbate reductase (MDHAR)의 활성도, 엽록소 함량, 과산화수소의 함량 등과의 상관관계를 조사한 결과, 생육배지의 수분의 함량이 감소함에 따라 식물체내 과산화수소의 생성량이 증가($R^2$=0.8851)하였으며, 수용성단백질 함량은 점차 감소($R^2$=0.9826)하는 경향을 나타내었다. 총 엽록소함량은 수분 부족 스트레스를 처리한 공시작물에서의 함량이 정상 생육시 보다 그 함량이 대체적으로 낮은 경향을 보였으며, 엽록소 a와 엽록소 b함량 변화도 총 엽록소의 함량변화와 비슷한 경향을 보였다. 그러나 총 엽록소에 대한 카로티노이드의 비율은 수분 부족 스트레스를 처리한 식물에서 정상생육 시 보다 더 높은 경향을 보였다. 수분 부족 스트레스가 진행됨에 따라 아스코브산의 함량은 정상 생육 시 보다 더 높은 경향을 보였으나 환원형인 디하이드로아스코브산의 함량은 수분 부족 스트레스를 처리한 초기에 정상생육 시 보다 더 낮은 경향을 보였다. MDHAR의 활성도는 사이토졸(cytosolic) 분획과 엽록체(chloroplastic) 분획에서 공히 크게 증가하였으며 MDHAR의 mRNA 전사 정도도 수분 부족 스트레스가 진행됨에 따라 크게 증가하였다. 수분함량이 감소함에 따라 MDHAR의 활성도가 크게 증가하였으며, 또한 과산화수소의 함량이 증가함에 따라서도 MDHAR의 활성도가 크게 증가($R^2$=0.9937과 0.8645)되어 수분 부족 스트레스로 나타나는 요인들과 MDHAR 사이에 밀접한 관련이 있음을 확인할 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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