To determine the amount of genetic variation among populations of Penaeus chinensis (Osbeck) in the Yellow Sea, 342 bp region of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I gene was amplified and sequenced. Six haplotypes, which differ by from one to four nucleotide sustitutions, were detected from 34 individuals of 4 populations examined. Mean sequence divergence between pairs of haplotypes was $0.68\%$. Most individuals from 4 populations were shared by the most common genotype. This genotype was distributed evenly in the Korean and Chinese populations. This result is in accordance with findings observed using RFLPs analysis of mtDNA (Hwang et al., 1997). Therefore, it is suggested that P. chinensis should be treated as one unit stock in the Yellow Sea.
White Spot Baculovirus(WSBV) 미감염 새우 건강 종묘를 생산하기 위하여 난의 요오드 소독을 실시하였다. 유효 요오드농도 20,50,100,200 ppm에서 각 시험구의 대하(Penaeus chinensis) 수정난을 각각 30,60초 처리한 결과 각 농도의 30초 처리구에서는 50%이상의 상대부화율을 보였고, 60초 처리구에서는 20ppm 처리구에서만 약 50% 상대 부화율을 보인 반면 50 ppm이상에서는 부화율이 거의 없었다. 보리새우(Penaeus japoni cus)에서도 비슷한 결과를 보였다. 대하의 경우 세란만 실시한 대조구의 부화율은 33.3%이었지만, 보리새우는 55.2%로 상대적으로 높았다. 부화후 생존율을 보면 수정난의 소독으로 부화율은 낮아지지만 수정란 소독후 부화된 유생은 초기생육에는 문제점이 없었다. WSBV 미감염 건강종묘를 생산하기 위해서는 수정난을 세척하고 저농도의 요오드를 짧은 시간에 소독해야 한다.
대하 새우양식장의 대하에 흰반점 증상을 나타내는 원인바이러스는 막대형의 이중막을 가지고 있었으며, 전자 현미경 관찰 결과 평균 크기가 $250\~300\times70\;nm$였고, 조직학적 병변은 위상피 등에서 핵이 비대해지는 것이 관찰되었다. 공격실험에서는 건강체의 새우에 많은 누적 폐사율을 보였다. 원인 바이러스 단백질은 21개의 밴드를 보였으며, 핵산 분석 결과 total 분자량은 114 kb로 나타났다.
자연산 모하의 White Spot Baculovirus(WSBV)보균을 Polymerase Chain Reaction(PCR)에 의한 검출에서 Penaeus chinensis 모하가 52%, Penaeus japonicus 모하는 20%나타났다. 새우 양식장의 서식생물의 본 바이러스의 보균을 조사한 결과 Upogebia major 37%, Calliamassa japonica 29%를 보였다. 본 바이러스의 해수 생존시험에서는 $4^{\circ}C$에서는 장기간 생존하였고 $25^{\circ}C$에서는 시간이 지남에 따라 점차 활성을 잃었다.
대하 아가미의 형태와 미세구조를 광학현미경과 전자현미경으로 조사하였다. 대하는 수지형 아가미를 가진 다. 아가미는 출새관과 입새관을 구분하는 세로 격벽을 가진다. 각각의 새판은 전자밀도가 다른 다층구조의 큐터클로 싸여 있다. 새판 기저세포들은 편평형이며, 전자밀도가 높은 세포질을 가진다. 상피세포층은 단층으로 큰 핵을 가진 편평상피로 구성된다. 새판의 기둥구조는 세로방향의 미세소관들과 측면 membrane interdigitation을 가진다. AB-PAS음성 분비세포들은 다세포선의 형태이다. 활성화된 선에서 각 세포의 경계부는 뚜렷하지 않으며, 세포질에는 활면소포체, 미토콘드리아, 전자밀도가 낮으며 막을 가진 분비소포들과 granular rosettes를 가진다. 비 활성화된 선에서는 세포 경계가 뚜렷하며, 세포질에서는 전자밀도가 높은 다수의 작은 과립들이 산재한다. 그리고 alcian blue에 양성인 단세포 분비세포들은 세포질에 발달된 다수의 골지체와 조면소포체들을 함유한다.
Because of the great concern over the possibility of contamination from the rod-shaped nuclear virus (PRDV) from Japan and white spot virus (WSSV) from Taiwan, most eggs used in Korean shrimp farms are currently obtained from local broodstock. In addition, the screening of imported broodstock for any viral presence at the National Fisheries Research and Development Institute is also mandatory. Nonetheless, massive mortality from white spot syndrome continues in Korea. In the present study, we present an improved PCR method to use tissue-extracted DNA instead of viral DNA extracted from a purified virus based on a sucrose density gradient, and produced results within 8 h. In 1998, this modified PCR method was able to detect that diseased Penaeus japonicus were infected within 8 h. In 1998, this modified PCR method was able to detect that diseased Penaeus japonicus were infected only with PRDV, while Fenneropenaeus chinensis were infected with both PRDV and WSSV. In 1999, PRDV and WSSV were detected in F. chinensis with signs of infection, but not with WSSV alone.
Genomic DNA samples were obtained from cultured penaeid shrimp (Penaeus chinensis) individuals such as fresh shrimp population (FSP) and deceased shrimp population (DSP) from Shinan regions in the Korean peninsula. In this study, 233 loci were identified in the FSP shrimp population and 162 in the DSP shrimp population: 33 specific loci (14.2%) in the FSP shrimp population and 42 (25.9%) in the DSP population. A total of 66 (an average of 9.4 per primer) were observed in DSP shrimp population, whereas 55 unique loci to each population (an average of 7.9 per primer) in the FSP shrimp population. The Hierarchical dendrogram extended by the seven oligonucleotides primers indicates three genetic clusters: cluster 1 (FRESH 01, 02, and DECEASED 12, 13, 15, 16, 17, 19, 20, 22) and cluster 2 (FRESH 03, 04, 05, 06, 07, 08, 09, 10, 11, and DECEASED 14, 18, 21). Among the twenty-two shrimp, the shortest genetic distance that exposed significant molecular differences was between individuals 20 and 16 from the DSP shrimp population (genetic distance=0.071), while the longest genetic distance among the twenty-two individuals that established significant molecular differences was between individuals FRESH no. 02 and FRESH no. 04 (genetic distance=0.477). In due course, PCR analysis has revealed the significant genetic distance among two penaeid shrimp populations.
K. V. Rajendran;S. J. Jung;Kim, Y. J.;Kim, S. R.;M. J. Oh
한국어업기술학회:학술대회논문집
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한국어업기술학회 2001년도 춘계 수산관련학회 공동학술대회발표요지집
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pp.521-523
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2001
White spot syndrome virus (WSSV) causes the most serious epizootic in cultured penaeid shrimp. The epizootic started in 1992, and spread through east and south east Asia and into other shrimp growing countries of the region. WSSV has also been reported from Penaeus chinensis cultured in Korean peninsula (Park et al., 1998; Kim et al., 1999). However, this paper deals with the WSSV infection in cultured and wild P. chinensis, purification and characterization of the pathogen, and the occurrence of other concomitant infection. (omitted)
황해 서식 대하(P. chinenesis) 각 개체군의 유전 구조를 파악하기 위하여 미토콘드리아 DNA(mtDNA)를 추출한 후 BamHI등 15종의 제한효소를 이용한 제한효소 절편 다형 현상 (Restriction Fragment Length Polymer-phisms; RFLPs)을 분석하였으며 보리새우 (P. japonicus)와의 염기 치환 정도를 비교하기 위하여 일본 나가사키 1 집단의 절편 양상도 함께 분석하였다. 한국의 대천, 진도, 나로도 집단과 중국의 발해, 청도 집단 등 5개 집단을 분석한 결과, 대하에서는 3종의 haplotype이 발견되었으나 5개 집단 모두가 하나의 haplotype에 의해 지배되고 있는 것으로 나타났다. 나타난 변이는 2종류로 Cla I과 Pvu II 인식부위가 부가된 변이가 청도와 나로도 집단에서 출현하였을 뿐 전 집단에 대한 나머지 13종의 제한 효소 절편 양상은 모두 동일한 것으로 나타났다. 이와 같은 결과에서 보면 황해산 대하의 각 집단 사이에는 활발한 유전자 교류가 있는 것으로 판단되며, 3개 계군에 대한 지금까지의 구분은 재검토되어야 할 것으로 판단된다. 대하와 보리새우의 mtDNA 공통절편을 이용한 p 값에 의한 염기치환은 $13.7\%$ 정도인 것으로 나타났으며, 제한 효소별 절편의 크기를 비교한 결과 대하의 mtDNA의 크기는 평균 16.44kb였고 보리새우는 약 16.31kb였다.
Penaeid shrimp (Penaeus chinensis), economically important aquacultural species, belonging to family Penaeidae including genus Fenneropenaeus, widely inhabit the West Sea and South Sea in the Korean Peninsula and the Gulf of Pohai in China under the natural ecosystem. Consequent of the rapid increase in seed production, there is a need to understand the genetic traits and composition of this fish species in order to evaluate exactly the patent genetic effects induced by seed production operations. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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