Kim, Eunji;Seo, Yunhee;Kim, Yong Su;Park, Yong;Kim, Young Ho
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.1
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pp.66-74
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2017
This study was conducted to examine infectivity (penetration and gall and egg-mass formations) of the root-knot nematodes, Meloidogyne incognita and M. hapla, on carrots grown in soil conditions of 5 different soil textures consisting of bed-soil (b) and sand (s) mixtures (b-s mixtures) at the ratios of 10:0, 7:3, 5:5, 3:7, and 0:10. For M. incognita, the nematode penetration rates in b-s of 0:10 (100% sand) were significantly higher than in the other b-s mixtures, more greatly at 2 and 5 days after inoculation than at 10 DAI, while no significant differences in the penetration rates were mostly shown for M. hapla at the above DAI. However, for both nematodes, gall and egg-mass formations were remarkably increased in the b-s mixture of 0:10, compared to the other b-s mixtures, which is coincided with the general aspects of severe nematode infestations in sandy soils. This suggests the increased gall and egg-mass formations of M. incognita should be derived from the increased penetration rates in the sandy soil conditions, which provide a sufficient aeration due to coarse soil nature for the nematodes, leading to their mobility increased for the enhanced root penetration. For M. hapla, it is suggested that the sandy soil conditions affect positively on the healthy plant growth with little accumulation of the inhibitory materials and sufficient aeration, enhancing the nematode growth and feeding activities. All of these aspects provide information reliable for the development screening techniques efficient for the evaluation of the nematode resistance in the breeding programs.
This study sought to control the root-knot nematode (RKN) Meloidogyne incognita using benign organo-chemicals. Second-stage juveniles (J2) of RKN were exposed to dilutions (1.0%, 0.5%, 0.2%, and 0.1%) of acetic acid (AA), lactic acid (LA), and their mixtures (MX). The nematode bodies were disrupted severely and moderately by vacuolations in 0.5% of MX and single organic acids, respectively, suggesting toxicity of MX may be higher than AA and LA. The mortality of J2 was 100% at all concentrations of AA and MX and only at 1.0% and 0.5% of LA, which lowered slightly at 0.2% and greatly at 0.1% of LA. This suggests the nematicidal activity of MX may be mostly derived from AA together with supplementary LA toxicity. MX was applied to chili pepper plants inoculated with about 1,000 J2, for which root-knot gall formations and plant growths were examined 4 weeks after inoculation. The root gall formation was completely inhibited by 0.5% MX and standard and double concentrations of fosthiazate; and inhibited 92.9% and 57.1% by 0.2% and 0.1% MX, respectively. Shoot height, shoot weight, and root weight were not significantly ($P{\leq}0.05$) different among all treatments and the untreated and non-inoculated controls. All of these results suggest that the mixture of the organic acids may have a potential to be developed as an eco-friendly nematode control agent that needs to be supported by the more nematode control experiments in fields.
Root-knot nematode species, such as Meloidogyne hapla, M. incognita, M. arenaria, and M. javanica are the most economically notorious nematode pests, causing serious damage to a variety of crops throughout the world. In this study, DNA sequence analyses were performed on the D3 expansion segment of the 28S gene in the ribosomal DNA in an effort to characterize genetic variations in the three Meloidogyne species obtained from Korea and four species from the United States. Further, PCR-RFLP (Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism), SCAR (Sequence Characterized Amplified Region) PCR and RAPD (Randomly Amplified Polymorphic DNA) were also utilized to develop methods for the accurate and rapid species identification of the root-knot nematode species. In the sequence analysis of the D3 expansion segment, only a few nucleotide sequence variations were detected among M. incognita, M. arenaria, and M, javanica, but not M. hapla. As a result of our haplotype analysis, haplotype 5 was shown to be common in M. arenaria, M. incognita, M. javanica, but not in the facultatively parthenogenetic species, M. hapla. PCR-RFLP analysis involving the amplification of the mitochondrial COII and large ribosomal RNA (lrRNA) regions yielded one distinct amplicon for M. hapla at 500 bp, thereby enabling us to distinguish M. hapla from M. incognita, M. arenaria, and M. javanica reproduced via obligate mitotic parthenogenesis. SCAR markers were used to successfully identify the four tested root-knot nematode species. Furthermore, newly attempted RAPD primers for some available root-knot nematodes also provided some species-specific amplification patterns that could also be used to distinguish among root-knot nematode species for quarantine purposes.
Hang Dao Thi;Choo, Ho-Yul;Lee, Dong-Woon;Lee, Sang-Myeong;Kaya Harry K.;Park, Chung-Gyoo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.3
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pp.420-427
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2007
We investigated the temperature effects on the virulence, development, reproduction, and otility of two Korean isolates of entomopathogenic nematodes, Steinernema glaseri Dongrae strain and S. longicaudum Nonsan strain. In addition, we studied the growth and virulence of their respective symbiotic bacterium, Xenorhabdus poinarii for S. glaseri and Xenorhabdus sp. for S. longicaudum, in an insect host at different temperatures. Insects infected with the nematode-bacterium complex or the symbiotic bacterium was placed at $13^{\circ}C,\;18^{\circ}C,\;24^{\circ}C,\;30^{\circ}C,\;or\;35^{\circ}C$ in the dark and the various parameters were monitored. Both nematode species caused mortality at all temperatures tested, with higher mortalities occurring at temperatures between $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$. However, S. longicaudum was better adapted to cold temperatures and caused higher mortality at $18^{\circ}C$ than S. glaseri. Both nematode species developed to adult at all temperatures, but no progeny production occurred at $13^{\circ}C\;or\;35^{\circ}C$. For S. glaseri, nematode progeny production was best at inocula levels above 20 infective juveniles/host at $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$, but for S. longicaudum, progeny production was generally better at $24^{\circ}C$. Steinernema glaseri showed the greatest motility at $30^{\circ}C$, whereas S. longicaudum showed good motility at $24^{\circ}C\;and\;30^{\circ}C$. Both bacterial species grew at all tested temperatures, but Xenorhabdus sp. was more virulent at low temperatures $(13^{\circ}C\;and\;18^{\circ}C)$ than X. poinarii.
Diploscapter coronatus (Cobb, 1893) Cobb, 1913 was first reported on oriental melon (Cucumis melo vars. makuwa Makino) roots from plastic film houses, Gyeongsangbuk-do, Andong, Korea (latitude $N36^{\circ}33^{\prime}$. longitude $E128^{\circ}29^{\prime}$). Diploscapter coronatus is most similar to D. pachys. Species in the genus Diploscapter have a visibly annulated cuticle. The stoma of D. coronatus is 1.5 times longer than the lip region width. The pharyngeal corpus is clearly separated from the isthmus and the vulva is situated around the mid-body. However, it differed by higher ratio of "a", filiform tail and had relatively blunt labial hooks. The Korean population is well matched and within the range of D. coronatus as described from Iran and Ethiopia in de Man's of L, b, c, c', and V. Female length, however, varied between populations: the Ethiopia population female length is longer than in the Korea population (396.4 vs 427.0) while females in the Iran population are smaller than in the Korea population (396.4 vs 350.0). Nematode size may vary due to environmental conditions such as food sources. The position of excretory pores in the Korean population were shorter 53.9-72.5 than in other populations (67-82 and 70-89). Males were uncommon. Males in the Korean population are smaller than females but larger(356.0) than males in the Indian population (306.0).
Studies were conducted to investigate the race distribution of soybean cyst nematode (Heterodera glycines Ichinohe) in Korea. The results are abstracted as follows. The soybean cyst nematode populations collected from Kangwon Province were identified as races 1 and 3; the nematode populations collected from Kyunggi Province were identified as race 3, 5 and c and those collected from Chungnam Province were identified as races 1 and 5. From the total 21 populations 11 populations or 52.4% of the total were race 1; 6 populations or 28.6% of the total were race 5; 3 populations or 14.3% of the total were race 3 and one population or 4.8% of the total were race c. Soybean cyst nematode populations from the same district, at least from the same 'myeon' district were identified as same race. Of these 4, race 3 has not been recorded in Korea yet.
The soybean cyst nematode, Heterodera glycines, is a major plant-parasitic nematode that has caused important economic losses to Korea's soybean production. Four species of cyst nematodes, H. schachtii, H. glycines, H. trifolii, and H. sojae, all belong to schachtii group are coexist in field soil in Korea. The rapid identification of the nematode is crucial for preventing crop damage and in decision making for controlling this nematode. This study aimed to develop a species-specific primer set for quantitative PCR (qPCR) assay of H. glycines. The specific primer set (HGF1 and HGR1) for H. glycines was designed based on the cytochrome c oxidase subunit I (COI) sequence of mitochondrial DNA. After optimization, it is possible to identify the H. glycines using a qPCR assay with DNA extracted from a single cyst and single second-stage juvenile (J2). The specificity was confirmed by the absence of SYBR fluorescent signals of three other Heterodera species. A serial dilution of DNA extracted from a single cyst was obtained for the sensitivity test. The result showed that the standard curve of the test had a highly significant linearity between DNA concentration and Ct value (R2 = 0.996, slope = -3.49) and that the detection limit concentration of DNA of the primer set was 10 pg of DNA per reaction. Our findings suggested that H. glycines could be distinguished from H. sojae and other Heterodera species when a qPCR assay is used with a specific primer set.
Pathogenicity and multiplication of entomopathogenic nematode, Steinernema carpocapsae Weiser, ere analyzed in two insect hosts, Spodoptera exiga (Hubner) and Sp. litura(Fabricius). The estimated ${LC}^{50}s$(lethal concentration of the infective juveniles to kill 50% of the host insect population) were not different between tow insect species or among their developmental stages on the filter paper assay, thought the actual numbers of the infected nematodes were varied among them. The significant variation, however occurred in nematode multiplication between tow inset hosts. Temperature also gave sosignificatn effect on nematode multiplication rate that it took 6 days after infection at $25^{\circ}C$, but did 12 days at $20^{\circ}C$ to show the maximal nematode population peak($\approx$500,000 infective juveniles(IJ) in a 5th instar larva of Sp. litura and $\approx$-100,000 IJ in a 5th instar larva of Sp. exigua).
Seo, Yunhee;Park, Jiyeong;Kim, Yong Su;Park, Yong;Kim, Young Ho
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.1
/
pp.75-81
/
2014
In total, 170 carrot lines developed in Korea were screened for resistance to Meloidogyne incognita race 1 to select parental genetic resources useful for the development of nematode-resistant carrot cultivars. Using the gall index (GI), gall formation was examined on carrot roots inoculated with approximately 1,000 second-stage juveniles of the nematode 7 weeks after inoculation. Sixty-one carrot lines were resistant (GI ${\leq}1.0$), while the other 109 were susceptible (GI > 1.0) with coefficient of variance (CV) of GI for total carrot lines 0.68, indicating low-variation of GI within the lines examined. The histopathological responses of two carrot plants from resistant and susceptible lines were examined after nematode infection. In susceptible carrots, giant cells formed with no discernible necrosis around the infecting nematodes. In the resistant carrot line, however, no giant cells formed, although modified cells were observed with extensive formation of necrotic layers through their middle lamella and around the infecting nematodes. This suggested that these structural modifications were related to hypersensitive responses governed by the expression of true resistance genes. Therefore, the Korean carrot lines resistant to the nematode infection are potential genetic resources for the development of quality carrot cultivars resistant to M. incognita race 1.
Entomopathogenic nematodes were isolated through the investigation of soil samples from various biotopes in south Korea, the efficiency of isolation for highly pathogenic nematodes to silkworms (Bombyx mori) was as high as 28 %. Twenty-eight strains of nematodes, selected among 100 samples by silkworms were confirmed the pathogenicity, multiplicity, and tolerance against various condition of preservation. Pathogenicity of the nematode isolates to agricultural and environmental pests such as Calliphora vomitoria, Pseufaletia separata, Palomena angulosa, and Melolontha incana were high. Mortality was varied from 20 to 100% by the pest insects and nematode strains. The high detectablity of entomopathogenic nematodes resulted from the methods of collection for soil samples within 10 cm depth after eliminating dried soil surface and the use of silkworm trap. High population of entomopathogenic nematodes represented the strong activity and broad action radius in the environment. Most of the nematode isolates were successfully cultured on the silkworm host as well as on artificial media, and proved their potential for the use of biological control agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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