Mitochondrial genomes have been extensively studied for phylogenetic purposes and to investigate intra- and interspecific genetic variations. In recent years, numerous groups have undertaken sequencing of platyhelminth mitochondrial genomes. Haplorchis taichui (family Heterophyidae) is a trematode that infects humans and animals mainly in Asia, including the Mekong River basin. We sequenced and determined the organization of the complete mitochondrial genome of H. taichui. The mitochondrial genome is 15,130 bp long, containing 12 protein-coding genes, 2 ribosomal RNAs (rRNAs, a small and a large subunit), and 22 transfer RNAs (tRNAs). Like other trematodes, it does not encode the atp8 gene. All genes are transcribed from the same strand. The ATG initiation codon is used for 9 protein-coding genes, and GTG for the remaining 3 (nad1, nad4, and nad5). The mitochondrial genome of H. taichui has a single long non-coding region between trnE and trnG. H. taichui has evolved as being more closely related to Opisthorchiidae than other trematode groups with maximal support in the phylogenetic analysis. Our results could provide a resource for the comparative mitochondrial genome analysis of trematodes, and may yield genetic markers for molecular epidemiological investigations into intestinal flukes.
Park, Eun-Hee;Lee, Ha-Yeon;Ryu, Yeon-Woo;Seo, Jin-Ho;Kim, Myoung-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제21권10호
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pp.1064-1068
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2011
The osmotolerant yeast, Candida magnoliae, which was isolated from honeycomb, produces erythritol from sugars such as fructose, glucose, and sucrose. Erythrose reductase in C. magnoliae (CmER) reduces erythrose to erythritol with concomitant oxidation of NAD(P)H. Sequence analysis of the 5'-flanking region of the CmER gene indicated that one putative stress response element (STRE, 5'-AGGGG-3'), found in Saccharomyces cerevisiae, exists 72 nucleotides upstream of the translation initiation codon. An enzyme activity assay and semiquantitative reverse transcription polymerase chain reaction revealed that the expression of CmER is upregulated under osmotic and salt stress conditions caused by a high concentration of sugar, KCl, and NaCl. However, CmER was not affected by osmotic and oxidative stress induced by sorbitol and $H_2O_2$, respectively. The basal transcript level of CmER in the presence of sucrose was higher than that in cells treated with fructose and glucose, indicating that the response of CmER to sugar stress is different from that of GRE3 in S. cerevisiae, which expresses aldose reductase in a sugarindependent manner. It was concluded that regulation of CmER differs from that of other aldose reductases in S. cerevisiae.
The proteasome plays a major role in the degradation of abnormal proteins within the cell. Therefore, repressed proteasome function is accepted as one of factors contributing the pathogenesis of multiple degenerative diseases. In the present study, we have observed that xanthohumol C, which is one of prenylated flavonoids from hops, increases the expression of the proteasome subunits through the Nrf2 pathway. Treatment of murine renal epithelial TCMK-1 cells with xanthohumol C and its methoxymethoxy-derivative elevated the expression of the Antioxidant Response Element (ARE)-driven reporter gene, as well as Nrf2-target genes including NAD(P)H: quinoneoxidoreductaes 1 (Nqo1). Transcript levels for the catalytic subunits of the proteasome Psmb5 and Psmb6 were increased by these compounds. The activation of the psmb5 promoter by xanthohumol C was abolished when the ARE in this promoter was mutated, indicating that proteasome induction was mediated by the Nrf2-ARE pathway. These results suggest that xanthohumol compounds from hops have a potential benefit on various oxidative stress-associated human diseases through the induction of the proteasome.
De, Nguyen Van;Minh, Pham Ngoc;Duyet, Le Van;Bich, Nguyen Ngoc;Son, Trinh Nam;Jung, Bong-Kwang;Chai, Jong-Yil
Parasites, Hosts and Diseases
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제58권4호
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pp.451-456
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2020
This is a report of 2 cases of human hydatidosis caused by Echinococcus ortleppi in Vietnam. The patients were a 12-year-old male (case 1) having a cyst of 10.0×9.0 cm size in the lung and a 50-year-old female with a 3.0×3.3 cm-sized cyst in the heart. Eosinophilia was 33.7% in the male and 45.8% in the female patient. C-reactive protein was increased to 16.5 mg/L in the male and 18.2 mg/L in the female. Both patients were positive for ELISA at OD=2.5 and 3.1, respectively. Echinococcus protoscolices were collected from the cysts by amniocentesis and surgery. The protoscolices were identified as E. ortleppi by morphology and analysis of mitochondrial NADH dehydrogenase 1 (nad1) gene sequence. Both patients were cured by surgical resection of the hydatid cyst combined with albendazole medication. The E. ortleppi infection in lung is the second report, and the other in the heart is the first in Vietnam.
The distribution of ambient air particles varies according to climate, industries, and other sources. In this study, ambient air particles (less than 12.1 ${\mu}m$) were monitored from February to August, 2007 as 12 different fractions sorted by a cascade impactor. Particles in the size range from 0.33 ${\mu}m$ to 0.76 ${\mu}m$ comprised the main fraction of ambient air particles in Seoul, Korea. On the day of an Asian dust event, the particle fraction size increased to 1.25~2.5 ${\mu}m$. The different sized particle fractions were also monitored for metals and were found to contain toxic heavy metals including Pb, Cd, Hg, Cr and As. Particle preparations were significantly cytotoxic when exposed to cultured BEAS-2B cells. Microarray analysis of the treated cells indicated a significant up-regulation of a number of genes associated with oxidative stress, including metallothionein, heme oxygenase-1, heat shock protein 70, and NAD(P)H dehydrogenase-1.
In the genome annotation of Escherichia coli MG1655, the orf382 (1,149 bp) is designated as a gene encoding an alcohol dehydrogenase that may be Fe-dependent. In this study, the gene was amplified from the genome by PCR and overexpressed in Escherichia coli BL21(DE3). The recombinant $6{\times}$His-tag protein was then purified and characterized. In an enzymatic assay using different hydroxyl-containing substrates (n-butanol, $\small{L}$-threonine, ethanol, isopropanol, glucose, glycerol, $\small{L}$-serine, lactic acid, citric acid, methanol, or $\small{D}$-threonine), the enzyme showed the highest activity on $\small{L}$-threonine. Characterization of the mutant constructed using gene knockout of the orf382 also implied the function of the enzyme in the metabolism of $\small{L}$-threonine into glycine. Considering the presence of tested substrates in living E. coli cel ls and previous literature, we believed that the suitable nomenclature for the enzyme should be an $\small{L}$-threonine dehydrogenase (LTDH). When using $\small{L}$-threonine as the substrate, the enzyme exhibited the best catalytic performance at $39^{\circ}C$ and pH 9.8 with $NAD^+$ as the cofactor. The determination of the Km values towards $\small{L}$-threonine (Km = $11.29{\mu}M$), ethanol ($222.5{\mu}M$), and n-butanol ($8.02{\mu}M$) also confirmed the enzyme as an LTDH. Furthermore, the LTDH was shown to be an ion-containing protein based on inductively coupled plasma-atomic emission spectrometry with an isoelectronic point of pH 5.4. Moreover, a circular dichroism analysis revealed that the metal ion was structurally and enzymatically essential, as its deprivation remarkably changed the ${\alpha}$-helix percentage (from 12.6% to 6.3%).
Formate dehydrogenase(FDH)는 포름산이온을 이산화탄소로 산화하는 반응을 촉매하는 효소로서, 건조와 저온 그리고 병원균 감염 등에 반응하는 스트레스 단백질로 알려져 있다. 본 연구에서는 현사시나무에서 FDH의 cDNA를 분리하여 구조와 발현 특성 등을 조사하였다. 현사시나무의 FDH cDNA(PagFDH1)는 1,499개의 염기쌍으로 이루어져 있으며, 388개의 아미노산으로 구성되는 예상 분자량 42.5 kDa의 단백질을 암호화한다. PagFDH1 단백질은 미토콘드리아 신호펩티드와 $NAD^+$ 결합부위를 가지고 있다. PagFDH1은 현사시나무의 염색체에 1 copy가 존재하며, 배양세포에서 가장 높게 발현되고 뿌리와 꽃 그리고 잎에서도 발현되었다. 현탁배양세포의 생장주기에서 유도기와 초기 지수생장기에 높게 발현하였다. PagFDH1은 건조와 염 스트레스에 반응하여 ABA를 경유한 신호전달경로에 의해 발현이 유도되는 것으로 나타났다. 본 연구결과는 FDH 유전자의 도입과 발현조절을 통한 환경 스트레스 저항성나무의 개발에 도움을 줄 것으로 생각된다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Myocardial infarction (MI) is caused by extensive myocardial damage attributed to the occlusion of coronary arteries. Our previous study in a rat model of ischemia/reperfusion (I/R) demonstrated that administration of arabinoxylan (AX), comprising arabinose and xylose, protects against myocardial injury. In this study, we undertook to investigate whether psyllium seed husk (PSH), a safe dietary fiber containing a high level of AX (> 50%), also imparts protection against myocardial injury in the same rat model. MATERIALS/METHODS: Rats were fed diets supplemented with PSH (1, 10, or 100 mg/kg/d) for 3 d. The rats were then subjected to 30 min ischemia through ligation of the left anterior descending coronary artery, followed by 3 h reperfusion through release of the ligation. The hearts were harvested and cut into four slices. To assess infarct size (IS), an index representing heart damage, the slices were stained with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC). To elucidate underlying mechanisms, Western blotting was performed for the slices. RESULTS: Supplementation with 10 or 100 mg/kg/d of PSH significantly reduces the IS. PSH supplementation (100 mg/kg/d) tends to reduce caspase-3 generation and increase BCL-2/BAX ratio. PSH supplementation also upregulates the expression of nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (NRF2), and its target genes including antioxidant enzymes such as glutathione S-transferase mu 2 (GSTM2) and superoxide dismutase 2 (SOD2). PSH supplementation upregulates some sirtuins ($NAD^+$-dependent deacetylases) including SIRT5 (a mitochondrial sirtuin) and SIRT6 and SIRT7 (nuclear sirtuins). Finally, PSH supplementation upregulates the expression of protein kinase A (PKA), and increases phosphorylated cAMP response element-binding protein (CREB) (pCREB), a target protein of PKA. CONCLUSIONS: The results from this study indicate that PSH consumption reduces myocardial I/R injury in rats by inhibiting the apoptotic cascades through modulation of gene expression of several genes located upstream of apoptosis. Therefore, we believe that PSH can be developed as a functional food that would be beneficial in the prevention of MI.
우리나라 사과 및 배 주산단지 12개 지역을 대상으로 ASSVd에 대한 진단 결과, 사과 및 배나무 전체 1,193주에서 20주가 바이로이드가 검출되어 1.7%의 이병율을 나타내었다. 품종별 감염상황을 살펴본 결과, 사과는 '홍로' 품종이 이병율이 3.6%로 타 품종에 비해 많이 감염되어 있음을 알 수 있었다. 국내에서 확인된 후지 등 주요 품종에서의 ASSVd 병징은 주로 과피 얼룩반점 증상이었으나, 후지품종 과피에 발생한 코르크(corking) 반점증상이 ASSVd 감염과 연관된 것으로 새롭게 확인하였다. 본 증상은 앞으로 유관으로 바이로이드 감염여부를 판단하는 중요한 지표가 될 것으로 판단된다. ASSVd에 감염된 사과를 대상으로 real time RT-PCR을 이용하여 ASSVd을 진단하고 시료간 상대 정량값을 분석하였다. real time RTPCR은 기존 RT-PCR에 비하여 전기영동이 필요없이 신속하고 간편하게 해석할 수 있으며, 오염의 위험성이 적었다. 특히 시료 간에 상대적인 정량값을 알 수 있기 때문에 시료를 비교 분석하는데 유효하다.
Seo, Ji-Yeon;Lim, Soon-Sung;Park, Ji-A;Lim, Ji-Sun;Kim, Hyo-Jung;Kang, Hui-Jung;YoonPark, Jung-Han;Kim, Jong-Sang
Nutrition Research and Practice
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제4권2호
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pp.93-98
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2010
Our previous study demonstrated that methanolic extract of Chrysanthemum zawadskii Herbich var. latilobum Kitamura (Compositae) has the potential to induce detoxifying enzymes such as NAD(P)H:(quinone acceptor) oxidoreductase 1 (EC 1.6.99.2) (NQO1, QR) and glutathione S-transferase (GST). In this study we further fractionated methanolic extract of Chrysanthemum zawadskii and investigated the detoxifying enzyme-inducing potential of each fraction. The fraction (CZ-6) shown the highest QR-inducing activity was found to contain (+)-(3S,4S,5R,8S)-(E)-8-acetoxy-4-hydroxy-3-isovaleroyloxy-2-(hexa-2,4-diynyliden)-1,6-dioxaspiro [4,5] decane and increased QR enzyme activity in a dose-dependent manner. Furthermore, CZ-6 fraction caused a dose-dependent enhancement of luciferase activity in HepG2-C8 cells generated by stably transfecting antioxidant response element-luciferase gene construct, suggesting that it induces antioxidant/detoxifying enzymes through antioxidant response element (ARE)-mediated transcriptional activation of the relevant genes. Although CZ-6 fraction failed to induce hepatic QR in mice over the control, it restored QR activity suppressed by $CCl_4$ treatment to the control level. Hepatic injury induced by $CCl_4$ was also slightly protected by pretreatment with CZ-6. In conclusion, although CZ-6 fractionated from methanolic extract of Chrysanthemum zawadskii did not cause a significant QR induction in mice organs such as liver, kidney, and stomach, it showed protective effect from liver damage caused by $CCl_4$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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