• 한국식품영양과학회지
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• 제41권1호
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• pp.41-48
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• 2012

본 연구에서는 흰점박이꽃무지 함유 음료의 총폴리페놀함량과 항산화활성(DPPH 라디칼 소거능, TRAP, ORAC assay, comet assay) 및 사용에 대한 안전성을 검증하기 위하여 ICR mouse를 사용하여 흰점박이꽃무지 무첨가군과 첨가군 단회 투여(2 g/kg) 시 나타나는 치사율, 체중, 생리적 증상, 장기무게, 생화학적 분석(triglyceride, total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, aspartate transaminase, alanine transaminase)을 통해 급성독성시험을 실시하였다. 흰점박이꽃무지를 함유한 호박, 알로에, 돼지감자음료 1 pack의 총 페놀함량은 66.35~100.98 mg/pack, DPPH 라디칼 소거능은 67.1~90.0%/1 pack, TRAP 값은 $1.46\sim1.54{\mu}M$/trolox equivalent(TE)를 보였으며, 모든 음료의 ORAC 값은 1500보다 높았다. 모든 음료는 인체 임파구에서 세포독성을 보이지 않았으며, $H_2O_2$에 대한 DNA 손상에 대한 보호효과는 유의적이었다. 흰점박이꽃무지 첨가/무첨가 음료의 ICR mouse 암수 각각에 경구투여(2 g/kg) 후 14일까지 치사된 실험동물은 관찰되지 않았으며, 체중, 생리적, 병리적 및 생화학적 분석에서 대조군과 비교 시 그룹들 간의 유의한 변화는 관찰되지 않았다. 그러므로 2 g/kg의 흰점박이꽃무지 첨가/무첨가 음료를 ICR mouse에 단일 경구투여시 독성이 없는 것으로 판명되었다. 본 연구에서 규명된 흰점박이꽃무지 함유 음료의 항산화활성과 안전성은 산업적측면에서 약용 및 식용 자원으로 적극적인 활용을 기대할 수 있을 것으로 사료된다.

• 디지털융복합연구
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• 제16권7호
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• pp.309-316
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• 2018

본 연구는 지질다당류에 의해 유도된 대식세포주인 RAW 264.7 세포에서 자화지정 추출물이 염증 매개체 생성에 미치는 영향을 조사하고자 하였다. 자화지정 추출물이 대식세포주인 RAW 264.7 세포의 세포 생존 능력에 미치는 영향을 조사 하기 위하여 MTT assay를 실시하였다. 또한, Bio-Plex 사이토카인 분석(cytokine assay)을 통하여 NO, 인터루킨 $(IL)-1{\beta}$, 종양 괴사 인자($TNF-{\alpha}$) 및 IL-6와 같은 다양한 사이토카인(cytokine)의 농도에 의한 자화지정 추출물의 항염증 효과를 조사 하였다. 자화지정 추출물은 LPS로 유도 된 대식세포에서 NO, $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6의 농도를 $25{\mu}g/mL$ 이상으로 유의하게 저해하였으며 세포 생존율에는 변화가 없었다. 이러한 결과는 자화지정 추출물이 LPS로 유도된 대식세포에서 $IL-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ 및 IL-6와 같은 염증성 사이토카인(cytokine)의 억제와 관련된 항염증 효과를 갖는다는 것을 시사한다. 앞으로 자화지정을 이용한 염증질환에 관련된 치료제개발에 새로운 연구가 더 필요한 바이다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제16권2호
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• pp.117-124
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• 2001

녹차의 주요 성분인 catechin은 항돌연변이, 항종양, 항균, 항바이러스 활성 및 콜레스테를 저하, 혈압 상승 억제, 해독, 방사선 차단 작용 등과 같은 다양한 생물학적 작용들이 보고되고 있다. 최근 환경 오염의 급증으로 인한 오존층의 파괴로 지표에 도달하는 자외선이 증가됨에 따라 피부노출 위험이 증가하고 있다. 따라서 피부암의 발생이 증가하는 추세이며 역학적 및 실험실적 연구에서 자외선 조사가 가장 큰 원인이라고 보고되고 있다. 이에 본 연구는 catechin이 UVB에 의해서 손상된 피부조직에 미치는 영향을 연구하였고 광발암과정에서 catechin의 억제효과가 apoptosis에 어떤 영향을 주어 작용하는지를 in vivo hairless mouse skin에서 연구하였다. 녹차잎에서 추출한 catechin을 hairless mouse를 대조군, catechin을 처리한 군, 자외선을 처리한 군, catechin과 자외선을 처리한 군으로 나누었으며 catechin의 농도는 3mg/mouse로 피부에 도포한 후 자외선을 100 mJ/$ extrm{cm}^2$ 조사하였다. 자외선에 의한 피부조직에 미치는 catechin의 영향을 H&E stain을 실시하여 확인하였고, apoptosis에 미치는 catechin의 보호효과를 알아보기 위해 DNA laddering 형성 여부와 TUNEL assay로 확인하였으며 western blot을 이용하여 apoptoic activity와 관련된 단백질인 p53연구하였다. 또한 자외선에 의한 세포증식에 미치는 catechin을 영향을 bromodeoxyuridine(BrdU) 면역염색방법을 이용하여 살펴보았다. 본 연구결과 자외선에 의하여 피부는 진피층의 교원섬유의 증가가 정상피부보다 2~3배 비후되었고, 염증세포의 침윤과 섬유화세포 등이 관탈되었으며 표피층은 두꺼워졌으나 상피세포가 소실되어 1~2층으로 되었다. UVB조사와 catechin을 2주간 처리한 후의 mouse의 피부는 표피층이 9~12층으로 이루어져 있었고, 세포의 핵은 과염색성을 보이며 커져있어 손상된 표피층 상피세포가 재생되고 있음을 확인하였다. Apoptosis에 미치는 결과에서 UVB 조사군은 apoptosis의 대표적 특징인 DNA fragmentation이 관찰되었고, UVB와 catechin을 처리한 군에서는 생성되지 않아 뚜렷한 보호효과를 나타내었다. TUNEL assay를 실시한 결과 UVB군과 catechin 군을 비교하였을 때 UVB+catechin군에서 apoptotic cells이 유의성 있는 차이(p<0.05)를 보였다. Apoptosis 관련 단백질인 p53발현을 살펴본 결과 대조군과 비교해볼 때 UVB군과 UVB와 catechin을 처리한 군간에서는 차이가 없었다. 자외선에 의한 세포증식에 미치는 catechin의 영향을 살펴본 결과 BrdU에서는 UVB군과 UVB+catechin군을 비교하였을 때 UVB+catechin군에서 BrdU 세포수가 유의성 있는(p<0.05) 감소를 보였다. 본 연구 결과에 의해 녹차의 주요성분인 catechin은 자외선에 의해 유도되는 세포증식 및 apoptosis를 억제하고, 세포손상, 세포증식 및 apoptosis를 억제시킴을 확인하였다.

• 한국동물학회지
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• 제29권3호
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• pp.181-189
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• 1986

본 연구는 adenylate cyclase의 촉진제인 forskolin과 cholera toxin이 생쥐난자의 핵막붕괴 및 cAMP 합성에 미치는 영향을 조사하고자 수행되었다. 체외난자 배양방법과 adenylate cyclase assay 방법을 이용한 연구의 결과는 아래와 같다. 생쥐난자를 4시간 배양한 결과 대조군의 핵막붕괴율은 93%인데 반해서 forskolin (20-40$\\mu$g/ml)이 함유된 배양액에서 배양한 난자의 핵막붕괴율은 56-36%로써, forskolin의 농도에 비례하여 생쥐난자의 핵막붕괴가 현저하게 억제되었다. Forskolin (80 $\\mu$g/ml)을 3시간 처리한 후, 난자를 forskolin이 제거된 배양액으로 옮겼을 때 난자의 핵막붕괴율이 대조군과 비슷한 정도를 나타내고 있어 forskolin에 의한 핵막붕괴 억제현상은 가역적이었다. 한편, cholera toxin (10-1,000 ng/ml)은 생쥐난자의 핵막붕괴를 억제시키지 못했다. Forskolin (10-80 $\\mu$g/ml)을 생쥐난자 추출물에 첨가할 경우 cAMP합성이 5-18배 증가되었으나, cholera toxin (10-1,000 ng/ml)은 효과가 없었다. 덧붙여, adenylate cyclase의 regulatory unit의 촉진제인 guanidylimido-diphosphate (100$\\mu$M)를 forskolin과 함께 처리하여도 forskolin만 처리한 실험군에 비하여 cAMP합성정도에 변화가 없었다. 또한, cholera toxin과 guanidylimido-diphosphate(100$\\mu$M)를 함께 처리하여도 생쥐난자의 cAMP합성은 증가되지 않았다. 이상의 결과에서 forskolin에 의한 생쥐난자의 핵막붕괴 억제 현상은 난자내의 cAMP농도가 높아짐으로써 야기된 것이라 추측되며, 난자내의 cAMP 농도의 변화가 생쥐난자 성숙에 중요한 역할을 수행할 것이라고 사료된다.

• Toxicological Research
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• 제17권
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• pp.293-297
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• 2001

The international pharmaceutical and regulatory communities had been recognizing the limited utility of conventional rodent carcinogenicity study particularly on the second species, mouse, after intense investigation of carcinogenicity data base worldwide, and a new scheme for carcinogenicity testing for pharmaceuticals was proposed at the Expert Working Group on Safety in the International Conference on Harmonization (ICH) in 1996. CB6F 1-Tg rasH2 mouse carrying human prototype c-Ha-ras gene with its own promoter/enhancer is one oj the new carcinogenicity assay model for human cancer risk assessment. Studies have been conducted since 1992 to validate the transgenic (Tg) mice for rapid carcinogenicity test-ing, short term (26 weeks) studies with genotoxic (by Salmonella), non-genotoxic carcinogens, genotoxic non-carcinogens, non-genotoxic non-carcinogens revealed relatively high concordance oj the response of the Tg mouse with classical bioassay across classes of carcinogenic agents. Mechanistic basis for carcinogensis in the model are being elucidated in terms of the role of overexpression and/or point mutation of the transgene. This report review the initial studies of validation of the model and preliminary results of on-going ILSI HESI ACT project will be presented.

• 동의생리병리학회지
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• 제17권1호
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• pp.101-104
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• 2003

It has been suggested that oxidative stress of reactive oxygen species(ROS) may play a key role in the pathogenesis of neuronal complications. The aim of this study was to examine the cytotoxic effect of hydrogen peroxide(H₂O₂) in the cultured mouse cerebral neurons and the protective effect of Schisandrae Fructus(SF) on ROS-induced neurotoxicity. Cytotoxic effect of H₂O₂ and neuroprotective effect of SF were determined by MTT assay. H₂O₂ decreased cell viability in dose-and time-dependent mannner, and SF decreased H₂O₂-induced neurotoxicity in these cultures. From above the results, H₂O₂ has toxic effect, and herb extract, SF is very effective against H₂O₂-induced neurotoxicity in cultured cerebral neurons of mouse.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제1권2호
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• pp.165-172
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• 1997

the pupose of this study was to investigate the effects of gonadotropin and nitric oxide (NO) on the expression of mouse follicular bad and bax genes that are known induce apoptosis. Large and midium size follicles of immature mice were obtained at 0, 24, and 48 hours time intervals after Pregnant Mare's Serum gonadotropins(PMSG, 5 I.U.) injection. Preovulatory follicles collected at 24 hrs after PMSG injection were cultured with or without various chemicals such as gonadotropin, gonadotropin Releasing hormone(GnRH), testosterone, Sodium nitroprusside (SNP) for 24 hrs at $37^{\circ}C$. After 24 hrs culture, the culture media was used for nitrite assay and total RNA was extracted, subjected to RT-PCT for the analyses of bad and bax expression. We found that expression of bad and bax genes in follicles was markedly reduced before and after in vivo priming with hCG. When the preovulatory follicles were cultured for 24 hrs in culture media with PMSG and hCG, the expression of bad and bax genes was decreased. Moreover, SNP (NO generating agent) can significantly suppress the expression of bad and bax genes in follicles when apoptosis was induced by GnRH agonist and testosterone. At the same time, nitrite production of culture media was increased in GnRH agonist + SNP, testosterone + SNP and SNP treated groups than control group. These data demonstrated for the first time that peptide hormones and NO may play important roles in the regulation of mouse follicular differentiation and may prevent apoptosis via supressing the expression of bad and bax genes.

• 대한한의학회지
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• 제22권1호
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• pp.53-62
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• 2001

Objective : The aim of this study was to evaluate the efficacy of Injinchunggan-tang on Hepatitis C virus infection, and to clarify the mechanism of treatment by indentifying the effect of Injinchunggan-tang on cytokine secretion. Methods : In vitro model of HCV infection in MOLT 4 cell was used. The effect of Injinchunggan-tang on the attachment of HCV on MOLT 4 cell was studied by PCR method. The change of cytokine secretion according to Injinchunggan-tang treatment was investigated by ELISA. Results : Injinchunggan-tang inhibited the attachment of HCV on MOLT 4 in the concentration of $10-2{\mu\textrm{g}}/\mu\textrm{\ell}$ and $10-1{\mu\textrm{g}}/\mu\textrm{\ell}$. In cytokine assay, Injinchunggan-tang increased the secretion of IL-4 of mouse splenocytes and PBMC in 48 hour culture as well as the secretion of IL-12 of mouse splenocytes and PBMC in 48 hour culture, whereas it decreased the secretion of $IFN-{\gamma}$ of mouse splenocytes in 24 and 48 hour culture. Conclusion : The results of this study show that Injinchunggan-tang has an inhibitory effect on the attachment on HCV on Mo1t4 Cell, and that it increases the secretion of IL-4 and IL-12 of mouse splenocyte and PBMC.

• 한국가축번식학회지
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• 제12권1호
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• pp.31-36
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• 1988

There studies were conducted using inbred ICR mice to examine the sex of preimplantation mouse embryo. The morphological normality of mice embryos treated with the culture medium containing rat H-Y antiserum(10%, v/v) plus complement(20%,v/v) was observed and also the sexing of embryos was investigated by chromosomal analysis. The results obtained were summarized as follows: 1. The viability of preimplantation mouse embryos, which were incubated in vitro with different media condition, was scored 68.9-85.5% in control group. However, 151 embryos normally developed up to blastocyst and 160 embryos were retarded growth or destroyed out of total 311 embryos treated in the medium containing H-Y antiserum(10%, v/v) plus complement(20%,v/v). 2. H-Y antiserum was prepared from inb red rats (Wistar and Donryu strain) with different immunization times (4, 5 and 6th) to examine the specific titer of embryos by the number of immunization. Precentage of normally developed embryos incubated either in the medium containing the antiserum of Wistar plus complement or Donryu plus complement was revealed 50.9, 47.4 and 50.0% (4, 5 and 6th immunization and 47.8, 41.2 and 48.7%, respectively. 3. Twenty two females and five males were identified out of fourty-eight normally developed embryos incubated in the medium containing H-Y antiserum plus complement by chromosomal analysis.

• 대한본초학회지
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• 제21권2호
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• pp.165-173
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• 2006

Objectives : Coptidis Rhizoma has been known traditional medicine with antimicrobial activities. We investigated inhibitory effects of Coptidis Rhizoma extract on lipopolysaccharide(LPS)-induced nitric oxide production from mouse macrophages. Methods : After Coptidis Rhizoma extract was pretreated in BV2, mouse brain macrophages and RAW264.7 mouse macrophages, cells were activated with LPS. To investigate cytotoxicity Coptidis Rhizoma extract, cell viability was measured by MTT assay. The production of nitric oxide(NO) and inducible nitric oxide synthase(iNOS) was determined in each culture supernatant and mRNA by Griess reaction and RT-PCR. The production of $TNF-{\alpha}$ from cells was measured by ELISA. Results : Coptidis Rhizoma extract significantly inhibited LPS-induced NO production in BV2 and RAW264.7 cells. Coptidis Rhizoma extract also greatly suppressed mRNA expression of iNOS in BV2 and RAW264.7 cells activated by LPS. Conclusion : These data suggests that Coptidis Rhizoma extract may have an anti-inflammatory effect through the inhibition of NO production.