In the medium containing 7% rice powder, 0.15% $NH_4NO_3$ and 0.1% $MnSO_4$ with initial pH 6.0, the red pigment production by Monascus anka albidus was observed. The mycelium were cultured at $30^{\circ}C$ for 5 days with reciprocal shaking (130 rpm). As a carbon source, glutinous rice gave the highest production of pigment. Ammonium nitrate and $KH_2PO_4$ as a nitrogen source and phosphate source, respectively, stimulated best the production of the red pigment. The optimum C:N ratio was found to be 18:1. The production of the pigment by the strain was 2.6 mg/ml in a flask, but 1.8 mg/ml in 5l fermentor, respectively.
Monascus anka strains with higher pigment production were developed using UV mutation and natural selection. To obtain organic solvent soluble pigments from Monascus anka, the following culture conditions were compared : standing and shaking culture with Nishikawa's medium, and shaking culture with Lin's medium. Shaking culture in Lin's medium exhibited decrease in solvent-soluble intracellular pigments after initial increase. The decrease was accompanied by the increase in water-soluble extracellular pigments. Monascus anka preferred sucrose and ethanol among 7 carbon sources tested. Treatment of sterol biosynthesis inhibitors, $({\pm})$-miconazole and chlorocholine chloride(CCC) , directed carbon pool to the biosynthetic pathway leading to the pigments with CCC's more pronounced effect. Two dimensional TLC revealed at least 7 yellow pigments suggesting existence of hereto unreported pigment. One of the most abundant yellow pigments was isolated and found to be ankaflavin by NMR and MS analysis.
Optimal media and cultural conditions for the production of red pigment were established using Monasurs anka KFCC 4478. The optimal temperature and initial pH for the production of red pigment were 30$^{\circ}C$ and 7.0, respectively. Glucose turned out to be most suitable carbon source for red pigment production. Optimal glucose concentration was 3.0%. Addition combined of nitrogen sources of peptone and NaNo3 induced good red pigment production. Thiamine-HCI and nicotinic acid were increased the production of red pigment. Under optimal conditions, maximum red pigment production and cell growth were observed after 5 days of incubation.
Mycelial growth, color difference and productivity of red pigment of beni-koji by Monascus anka KCCM 11832 were examined with respect to it's pigment in submerged culture with various medium and culture conditions. Shaking incubation was more promoted mycelial growth and the production of pigments than that for non-shaking incubation, and red color became ten times deeper. The production of red pigment was the highest when incubated at 25$\circ$C for 7 days in pH 6.0, but mycelial growth was showed the highest at 32.5$\circ$C. The levels of carbon and nitrogen source for maximum red pigment production were 2% rice powder and 0.05% peptone, respectively and the level of peptone for maximum pigment production was lower than that for maximum mycelial growth. Among pigmentation promoting agents tested, MgSO$_{4}$, was found to be suitable for the production of red pigment, and the optimum level was 0.1%.
In order to develop the method for mass production of natural food colorant from Monascus anka, optimum cultivation conditions for producing red and yellow pigments by cultiva- ting the mold in a jar fermenter and their color characteristics were investigated. The mold produced red and yellow pigments both intracellularly and extracellularly. These pigments showed unique light absorption characteristics with maximum absorption of 494, 380, 506, and 388 nm for extracellular red pigment (ERP), extracellular yellow pigment (EYP), intracellular red pigment (IRP), and intracellular yellow pigment (IYP), respectively. Optimum conditions for producing red pigments were found to be temperature 30$\circ$C, initial pH 6.0, rice powder 3-5%, peptone 0.05%, magnesium sulfate 0.25%, aeration rate 0.1 vvm. Optimum temperature for producing yellow pigments was around 35$\circ$C which is higher than that of producing red pigments. The initial pH and rice powder concentration for producing yellow pigments were the same as those of producing red pigments. The higher concentration of nitrogen source and inorganic salt, aeration rate, the more the yellow pigments were produced. The optimum agitation speed was 100 - 300 rpm for pigment production.
In order to produce Hongkuk-ju, the production and characterization of Hongkuk (Monascus red koji) by Monascus anka KCTC 6121 were investigated. The optimum cultural conditions for the production of enzyme (${\alpha}$-amylase and glucoamylase) and pigment (yellow and red) from this strain on solid culture (steamed rice) were examined. The results showed that the production of ${\alpha}$-amylase and glucoamylase reached the highest for 9 days and 8 days, respectively. Since then, the productions decreased slightly. The production of yellow and red pigments reached the highest for 8 days, decreasing slightly soon after. The optimal content of the initial moisture equally presented 30% in the enzyme and pigment production. After that, the enzyme production decreased slowly, whereas pigment production decreased sharply. The optimal temperature of the culture also showed $30^{\circ}C$ in the production of enzyme and pigment. It was found that the initial inoculum size in enzyme and pigment production was 10% and 20%, respectively. Under these optimal conditions, the production of monacolin K and citrinin was 74.35 mg/kg and 5 mg/kg for 12 days, respectively.
Optimal conditions of producing red pigment by Monascus anka, Nakazawa, et Sato, IFO 4478 and 6540 were found to be at pH 6.0 and $30^{\circ}C$ for 10 days. When 3.0% steamed rice and 1.0% defatted sesame exfracts were used as substrates, the highest production of red pigment was yielded. Furthermore, mutants such as Monascus anka 4475-27 and 6540-185 induced by N -methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) treatment were found to produce pigment much more than parent strains.
The Effect of pH red pigment production by Monascus purpureus ATCC 16365 has been studied in pH-controlled batch fermenter culture. A maximum of yellow and red pigments were detected using UV-Vis spectrophotometer at 385nm and 495nm, respectively. Fungal growth and pigment production were favoured at low pH(pH 4.0-5.5). Especially extracellular formation rate of orange to yellow pigment was decreased compared with that of orange to red pigment at pH 7.0. In addition, the enhancement of ratio of extracellular to intracellular pigment and the red pigment production in pH 7.0-controlled batch fermenter was observed. However, the pH 7.0-controlled batch cultures depressed the total production of pigments. The pH change from 4.0 to 7.0 during batch fermenter cultivations sharply increased both red pigment production and the extracellular composition.
The optimum cultural conditions for production of yellow pigment by Monascus purpureus MMK2 were investigated in liquid culture. Monascus purpureus MMK2 was shown to give the maximum production of yellow pigment in the medium containing of 3.0% wheat flour, 0.15% $NaNO_3$, 0.25% $Na_2HPO_4\;12H_2O\;and\;0.15%\;MgSO_4\;7H_2O$. The optimal culture conditions for temperature and initial pH were $30^{\circ}C$ and 6.5, respectively. The yellow pigment production reached a maximum level at the 7th day of cultivation.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.1
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pp.60-66
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1997
The characteristics and stability of pigments produced by Monascus anka in a jar fermenter were examined The pigments produced by the mold were fractionated into four pigments, i.e., extracellular red pigment(ERP) extracellular yellow Pigment(EYP), intracellular red pigment(IRP) and intracellular yellow pigment(IYP) by the solvent fractionation method. These pigments showed characteristic absorption spectrum indicating that they were composed of different components of pigments. Each of these four pigments separated from Monascus anka were stable under ultraviolet light, fluorescent light and in dark conditions, but their color was faded rapidly under sun light. They were also very stable against temperature below 8$0^{\circ}C$, above which temperature the stability of the Pigments was decreased rapidly. Among the eight organic acids tested, tartaric and citric acids were found to be detrimental against the Monascus anka Pigments. And Cu$^{2+}$ ion showed the most deleterious effect on the color change of the pigments.s.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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