It was known that normal-haemolymph from the 3rd instar larvae of Lucillia illustris contain a lysozyme (or lysozyme-like substance) with bactericidal activity to fram positive bacteria, and the bactericidal activity of injured-haemolymph was increased significantly after injuring the body wall. To elucidate the defence mechanism of insect against the nonpathogenic bacteria, the immune-haemolymph against Escherichia coli K-12 was prepared after immunization. The bactericidal activity between injured and immune-haemolymph was compared, and it was revealed that the immune-haemolymph showed higher titer of bactericidal activity to fram positive bacteria as well as to Escherichia coli. The bactericidal substance from the immune-haemolymph was purified through a successive chromatographies on Sephacryl S-300 and CM-Sepharose CL-6B, and it was characterized as a basic protein in nature with heat stable property at acidic conditions.
ABSTRACT$.$ Ethylene oxide (E.O) fumigation and gamma irradiation were applied to compar$.$ ative researches on the microbiological, physical and cooking quality of dried oak mushroom stored at $25^{\circ}C$ and different relative humidities. The equivalent moisture contents of dried oak mushroom for the limiting growth of general molds and xerophilic mold at $25^{\circ}C$ were shown to be 17% and 27% respectively. Total aerobic bacteria, molds and coliforms were sterilized at 5 kGy irradiation but E.O. fumigation was proved insufficient to eliminate the molds. The hydration rate of dried oak mushroom increased according to the increase of irradiation dose and soaking temperatures. and an irradiation by 5 kGy could shorten the hydration time of the sample as compared to E.O. treatment and control group. Sensory evaluation for the irradiated cooked sample was not significantly different in flavour but the texture of the gamma irradiated sample was significantly better(p < 0.01) than that of E. O. fumigated sample.sample.
Kim, Yong-Sang;Jeong, Jin-Oh;Cho, Sung-Ho;Jeong, Do-Yeon;Uhm, Tai-Boong
Korean Journal of Microbiology
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v.48
no.2
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pp.163-170
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2012
In order to inhibit the growth of pathogens and degrade biogenic amines during the fermentation of soybean products, an isolate with antimicrobial activity against pathogens and biogenic amine-degrading property was obtained from 83 traditionally fermented soybean products. The morphological and biochemical tests and the phylogenetic relationship among 16S rRNA gene sequences indicated that the isolate named as the strain SCK B11 was most closely related to Bacillus licheniformis. The cell-free supernatant of two day cultures was active against several pathogens including Enterococcus faecalis, Listeria monocytosis, Micrococcus luteus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus, and Staphylococcus aureus. PCR analysis was conducted to determine relatedness to antimicrobial lantibiotics and biosurfactants produced by Bacillus spp., but showed negative for the genes encoding surfactin, lichenysin, and lichenicidine. Electron microscopic observation indicated that the antimicrobial agent seemed to attack the membrane of the pathogens, leaving the ghost or shrunken cells. The strain was found to degrade histamine by 72% and tyramine by 66% in the cooked soybean containing 5.3% of biogenic amine over 10 days of fermentation time. The use of selected strain would be a potential control measure in manufacturing traditionally fermented soybean products that are difficult to control pathogens and biogenic amine levels.
Twenty-five bacterial strains that secrete mucous materials were isolated from sediment obtained from King George Island, Antarctica. Seven of these strains proved capable of producing cryoprotective exopolysaccharides. The strain KOPRI 21653 was selected for the further study of an anti-ice-nucleating polysaccharide (ANP), which originated from a polar region. KOPRI 21653 was identified as Pseudoalteromonas arctica as the result of 16S rRNA analysis. The exopolysaccharide, P-21653, was purified completely from the KOPRI 21653 cell culture via column chromatography and protease treatment. The principal sugar components of P-21653 were determined to be galactose and glucose, at a ratio of 1:1.5, via GC-MS analysis. The cryoprotective activity of P-21653 was characterized via an E. coli viability test. In the presence of 0.1% (w/v) P-21653, the survival ratio of E. coli cells was as high as 82.6% over three repeated freeze-thaw cycles. The survival ratio decreased drastically to 71.5 and 48.1 %, respectively, in five and seven repeated cycle conditions; however, the survival ratios were greater over three (96.6-92.1%) to seven (100.5-91.6%) freeze-thaw cycles in the presence of 0.5 and 1.0% (w/v) P-21653. In addition, at much lower concentrations (0.1-1.0%), P-21653 resulted in survival ratios (83.1-98.4%) similar to those of two commercially available cryoprotectants ($V_{EG}$ plus X-1000, 92.9% and $V_{M3}$, 95.3%), which were utilized at the recommended concentrations (90%). The biochemical characteristics of exopolysaccharide P-21653 reflect that this compound may be developed as a useful cryoprotectant for use in medical applications and in the food industry.
In the acidic LB plate, a bacterial strain was isolated from homemade soybean paste as a producer of the extracellular mannanase. The isolate YB-1402, which was a Gram-positive rod-shaped bacterium with spore, has been identified as Bacillus amyloliquefaciens on the basis of its 16S rDNA sequence and biochemical properties. Maximum mannanase productivity of the isolate YB-1402 was reached approximately 150 U/ml in LB broth supplemented with konjac (3.0%). The molecular mass of YB-1402 mannanase was estimated to approximately 38.0 kDa by zymogram of the culture filtrate on SDS-PAGE. The mannanase of culture filtrate was the most active at $55^{\circ}C$ and pH 5.5. The mannanase activity was completely maintained after pre-incubation at pH 3.0 to 10.0 for 1 h. The predominant products resulting from the mannanase hydrolysis were mannose, mannobiose and mannotriose for LBG or mannooligosaccharides. The enzyme could hydrolyze mannooligosaccharides larger than mannobiose.
Nitric oxide (NO), which has been recognized as an integral molecule in maintaining homeostasis, plays an important role in host defense against microbes. NO has diverse antimicrobial mechanisms by directly and/or indirectly interacting with microbes. Under the circumstance that there is an urgent need for a new class of antimicrobial agents due to antibiotic resistance, much effort has been made to develop a NO-based antimicrobial agent. In order to make it possible, strategies to store and release NO in a controlled manner are required because NO has a gaseous property and a very short half-life. In this review, we described NO biochemistry and its mechanisms of antimicrobial activity. In additions, we introduced various NO-releasing systems that improve NO's antimicrobial activity.
A bacterium producing the extracellular mannanase and xylanase was isolated from Korean farm soil by successive subcultures in a minimal medium supplemented with palm kernel meal (PKM) and rice bran. The isolate YB-1106 showed 98% similarity with Microbacterium arabinogalactanolyticum on the basis of 16S rRNA gene sequences. The additional carbohydrates including locust bean gum (LBG) and PKM increased the mannanase productivity of the YB-1106, while the xylanase productivity of the isolate was increased by wheat bran, oat spelt xylan, rice bran and xylose. Particularly, maximum mannanase and xylanase activities were obtained in the culture filtrate of tryptic soy broth supplemented with 1% LBG or 2% wheat bran, respectively. Both enzyme activities were produced at stationary growth phase. The mannanase of culture supernatant was the most active at $50^{\circ}C$ and pH 6.0, while xylanase of culture supernatant was the most active at $55^{\circ}C$ and pH 6.5. The predominant products resulting from the mannanase or xylanase hydrolysis were oligosaccharides for LBG or xylan, respectively.
Jeon, SaeBom;Ryu, MyeongSeon;Kim, Yong Sang;Jo, Seung Wha;Jeong, Do Yeon;Uhm, Tai-Boong
Korean Journal of Microbiology
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v.49
no.3
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pp.286-291
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2013
Soybean pastes with 8% (w/w) salinity were prepared instead of soybean paste with 14% (w/w) salinity to meet the growing demands of Korean's low sodium diet. After aging, white films had appeared on the surface of all low-salted soybean pastes [8% (w/w) salinity] unlike high-salted soybean pastes [14% (w/w) salinity]. All of eight microbes isolated from the surface film were identified as Pichia kudriavzevii. Eleven Bacillus strains with good characteristics of fermentation were isolated from traditionally fermented soybean pastes in order to preserve their unique flavors and aromas after aging, and as a result of analyzing the biochemical characteristics and 16S rRNA sequences, those were identified as B. subtilis, B. licheniformis, and B. methylotrophicus. All of the Bacillus isolates had antagonistic activities against 8 isolates of the film-forming yeasts and harbored the genes for synthesis of antimicrobial surfactants including lichenysin and/or surfactin.
A gene encoding the xylanase (XynA) predicted from partial genomic sequence of Paenibacillus woosongensis was cloned into Escherichia coli by PCR. This xynA gene consisted of 633 nucleotides, encoding a polypeptide of 211 amino acid residues. The deduced amino acid sequence exhibited 85-89% identity with those of several Paenibacillus xylanases, belonging to the glycosyl hydrolase family 11. As a results of expression of the structural gene by T7 promoter of a pET23a(+) expression vector, xylanase activity was higher in cell-free extract than culture filtrate of a recombinant Escherichia coli BL21(DE3) CodonPlus. However, the expression level of xylanase was not sufficient be detected by SDS-PAGE. The cell-free extract showed maximal xylanase activity at $60^{\circ}C$ and pH 5.5. The predominant products resulting from xylan and xylooligosaccharide hydrolysis were xylose and xylotriose. The enzyme could hydrolyze xylooligosaccharides larger than xylbiose.
This study compared the effects of autoclaving (AC; $121^{\circ}C$ for 15 min), gamma (GR), and electron beam irradiation (EB; 0-20 kGy) on the microbial, physicochemical, and sensory properties of ready-to-eat bulgogi during storage at $35^{\circ}C$ for 90 d. No viable cells were observed (p<0.05) upon AC, GR or EB at more than 15 kGy. However, adverse effects such as tenderization and deterioration of sensory properties were induced in bulgogi upon AC and high dose irradiation. Especially, the hardness and sensory qualities (texture and taste) of the AC-treated samples were extremely deteriorated (p<0.05). These results indicate that use of GR and EB (15 kGy) can ensure the microbial safety of bulgogi without compromising the hardness and sensory properties (texture, taste and flavor).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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