Plant matrix metalloproteases (MMPs) are a family of apoplastic metalloproteases closely related to human matrilysins. Up-regulation of Nicotiana benthamiana matrix metalloprotease 1 (NMMP1) expression by treatment with pathogens, ethephon and aging indicates that the gene is related to plant defense and the aging process through ethylene signaling. NMMP1 expression was higher than in normal growth leaves following infection with an incompatible pathogen Pseudomonas syringae pv. tomato T1 or a compatible pathogen P. syringae pv. tabaci and in aged leaves. Transient overexpression of NMMP1 in N. benthamiana leaves lowered the growth of P. syringae pv. tabaci. However, NMMP1-silenced leaves showed increased growth of P. syringae pv. tabaci. These data strongly suggest that NMMP1 in N. benthamiana is a defense related gene, which is positively regulated by ethylene.
Objectives : This study was designed to investigate the relation between the matrix metalloprotease-1 gene polymorphism and facial nerve palsy in Korean population. Methods : This study was carried out on 102 facial nerve palsy patients who were treated with oriental medicine therapy at the department of acupuncture & moxibustion, hospital of Oriental medical college, Daegu Hanny University and 104 healthy control subjects. Blood samples from all subjects were obtained for DNA extraction. We have investigated the genotyping of matrix metalloprotease-1 by using Pyrosequencing. Results : The genotypes of matrix metalloprotease-l gene were G/G homozygotes, A/G heterozygotes and A/A homozygotes. There was no significant difference between the control and facial nerve palsy groups. Conclusion: We concluded that there was no significant association between matrix metalloprotease-1 gene polymorphism and facial nerve palsy in Korean population. However, the findings of this study need to be confirmed in more patients and further studies.
Dentin, a major component of teeth, is formed by odontoblasts which produce the dentin matrix beneath the dental epithelium and induce the mineralization of dentin. To date, the biochemical properties of dentin matrix proteins have been well characterized, but upstream regulators of these proteins are not yet well known. Recently in this regard, several transcription factors have been identified as potential regulators of matrix proteins. Most transcription factors are generally involved in diverse biological processes and it is essential to identify those that are odontoblast-specific transactivators to further understand the process of dentin formation. We thus analyzed the expression pattern of dentin matrix proteins and the activities of established transactivators containing a Cre-locus. Expression analyses using in situ hybridization showed that dentin matrix proteins are sequentially expressed in differentiating odontoblasts, including type-I collagen, Dmp-1 and Dspp. The activities of the transactivators were evaluated using ${\beta}$-galactosidase following the generation of double transgenic mice with each transactivator and the ROSA26R reporter line. The ${\beta}$-galactosidase activity of each transactivator paralled the expression of the matrix proteins. These results thus showed that these transactivators could be utilized for odontoblastspecific conditional gene targeting. In addition, time- and tissue-specific conditional gene targeting might also be achieved using a combination of these transactivators. Odontoblast-specific conditional gene targeting with these transactivators will likely also provide new insights into the molecular mechanisms underlying dentin formation.
이기종인 온주감귤 유전자(A=20.57, C=32.71, G=30.01, U=16.71%)와 커피 유전자(A=20.66, C=31.76, G=30.187, U=16.71%)는 95%이상이 유전자비가 동일하다. 이기종이면 일반적으로 유전자 결합이 안 되는 것으로 알려졌다. 그러나 유전자 기능적-유사성이 95%이상에서 Chargaff 룰과 Shannon Entropy 조건을 만족하면 접목이 가능하며, 새품종인 Coffrange가 된다. 우리는 DNA-RNA를 세계최초 BCJM 행렬로 풀어 미국특허 및 국제저널에 발표했다. 모든 동식물과 바이러스도 사람이 유전자와 비슷하다. 이점에 착안, 코로나-19와 인체의 유전자 특성을 풀어 영국 행렬교재에 6월 발표했다. 식물에서는 유전자 위치를 쉽게 바꾸는 기법인 BCJM-Transposon으로 처리한다. 시뮬레션에서는 행렬이 Cut & Paste와 Transpose로 성공할 수 있음을 예측했다.
Escherichia coli K-12 (E. coli K-12) is a representative indicator globally used for distinguishing and monitoring dynamic fates of pathogenic microorganisms in the environment. This study investigated how to most critically quantify lacZ ($\beta$-galactosidase) gene in E. coli K-12 by two different real-time polymerase chain reaction (real-time PCR) in association with three different DNA extraction practices. Three DNA extractions, i.e., sodium dodecyl sulfate (SDS)/proteinase K, magnetic beads and guanidium thiocyanate (GTC)/silica matrix were each compared for extracting total genomic DNA from E. coli K-12. Among them, GTC/silica matrix and magnetic beads beating similarly worked out to have the highest (22-23 ng/${\mu}L$) concentration of DNA extracted, but employing SDS/proteinase K had the lowest (10 ng/${\mu}L$) concentration of DNA retrieved. There were no significant differences in the quantification of the copy numbers of lacZ gene between SYBR Green I qPCR and QProbe-qPCR. However, SYBR Green I qPCR obtained somewhat higher copy number as $1{\times}10^8$ copies. It was decided that GTC/silica matrix extraction or magnetic beads beating in combination with SYBR Green I qPCR can be preferably applied for more effectively quantifying specific gene from a pure culture of microorganism.
The matrix metalloproteinases (MMPs) are members of a unique family of proteolytic enzymes that degrade components of the extracellular matrix. Significant evidence has accumulated to directly implicate members of the MMPs in tumor invasion and metastasis formation. To investigate the correlation between ras oncogene and MMP gene expression in various tumor cells, we detected mRNAs for the ras, MMP-2 and MMP-9 (72 kD and 92 kD type IV collagenases, respectively) genes in nine human tumor cell lines. The ras gene was expressed in seven cell lines; MMP-2 in three; MMP-9 in two cell lines tested. There was no direct correlation between the ras oncogene and MMP expression. A clear difference in the mRNA expression between MMP-2 and MMP-9 was observed among the cell lines. As an approach to study the effect of the ras oncogene on metastasis, we examined the expressions of MMP-2 and MMP-9 in HT1080 cells transfected with the v-H-ras gene. MMP-9 expression was Significantly enhanced in the ras-transfected HT1080 cells compared with the nontransfectants while ras transfection did not affect the expression of MMP-2. These results suggest the possible inducing effect of the ras oncogene on the metastasis by activation of the MMP-9 gene in HT1080.
For the treatment of osteoarthritis, pulsed electromagnetic field stimulus has been suggested as a useful therapeutic method in rehabilitative medicine. Most studies have been performed under low-frequency and low-energy to find out biological properties for stimulating chondrocyte with pulsed magnetic field. In this study, the effect of strong pulse magnetic field on the human chondrosarcoma cells (SW-1353) has been investigated by means of cell counting, morphologies, and gene expression of cartilage extracellular matrix genes. The SW-1353 cells were exposed under the field intensities of 270, 100, 55, 36, and 26 mTesla during 6 hours a day in 5 consecutive days. The pulse magnetic field with an LRC oscillating signal has the pulse width of 0.126 msec and stimulation period of 1 sec. For the 270 and 100 mTesla stimulation, the cell proliferation significantly increased in 21-24% as compared with the non-stimulated cells. Gene expression of cartilage extracellular matrix genes (ACAN, COMP and COL2A1) was assayed by quantitative real time-PCR method. The ACAN gene expression showed a significant brightness, which means the increase on gene expression, compared with the non-stimulated cells. Our results suggest that the strong pulse magnetic field stimulation can be utilized to accelerate cell proliferation and gene expression on human chondrosarcoma cells.
Tumor cell invasion and metastasis are a complex multistep process that involves the degradation of extracellular matrix proteins by matrix metalloproteinases (MMPs). Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1) acts as a negative regulator of matrix metalloproteinase and thus prevents tumor cell invasion and metastasis by preserving extracellular matrix integrity.(omitted)
Kang, Dong-Geun;Lee, Hyun Jae;Kim, Kun Tae;Hwang, Sun-Chul;Lee, Choong Jae;Park, Jin Sung
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제21권2호
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pp.197-204
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2017
In the present study, we tried to examine whether oleanolic acid regulates the activity, secretion and gene expression of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) in primary cultured rabbit articular chondrocytes, as well as the production of MMP-3 in the knee joint of rat to evaluate the potential chondroprotective effect of oleanolic acid. Rabbit articular chondrocytes were cultured in a monolayer, and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to measure interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$)-induced gene expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs-4 (ADAMTS-4), ADAMTS-5 and type II collagen. In rabbit articular chondrocytes, the effects of oleanolic acid on IL-$1{\beta}$-induced secretion and proteolytic activity of MMP-3 were investigated using western blot analysis and casein zymography, respectively. The effect of oleanolic acid on in vivo MMP-3 protein production was also examined, after intra-articular injection to the knee joint of rat. The results were as follows: (1) oleanolic acid inhibited the gene expression of MMP-3, MMP-1, MMP-13, ADAMTS-4, and ADAMTS-5, but increased the gene expression of type II collagen; (2) oleanolic acid reduced the secretion and proteolytic activity of MMP-3; (3) oleanolic acid suppressed the production of MMP-3 protein in vivo. These results suggest that oleanolic acid can regulate the activity, secretion and gene expression of MMP-3, by directly acting on articular chondrocytes.
Bovine ephemeral fever virus (BEFV) causes bovine ephemeral fever, which can produce considerable economic damage to the cattle industry. However, there is limited experimental evidence regarding the underlying mechanisms of BEFV. Annexin A2 (AnxA2) is a calcium and lipid-conjugated protein that binds phospholipids and the cytoskeleton in a Ca2+-dependent manner, and it participates in various cellular functions, including vesicular trafficking, organization of membrane domains, and virus proliferation. The role of the AnxA2 gene during virus infection has not yet been reported. In this study, we observed that AnxA2 gene expression was up-regulated in BHK-21 cells infected with the virus. Additionally, overexpression of the AnxA2 gene promoted the release of mature virus particles, whereas BEFV replication was remarkably inhibited after reducing AnxA2 gene expression by using the small interfering RNA (siRNA). For viral proteins, overexpression of the Matrix (M) gene promotes the release of mature virus particles. Moreover, the AnxA2 protein interaction with the M protein of BEFV was confirmed by GST pull-down and co-immunoprecipitation assays. Experimental results indicate that the C-terminal domain (268-334 aa) of AxnA2 contributes to this interaction. An additional mechanistic study showed that AnxA2 protein interacts with M protein and mediates the localization of the M protein at the plasma membrane. Furthermore, the absence of the AnxA2-V domain could attenuate the effect of AnxA2 on BEFV replication. These findings can contribute to elucidating the regulation of BEFV replication and may have implications for antiviral strategy development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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