Background: Notoginseng stem-leaf (NGL) ginsenosides have not been well used. To improve their utilization, the biotransformation of NGL ginsenosides was studied using ginsenosidase type-I from Aspergillus niger g.848. Methods: NGL ginsenosides were reacted with a crude enzyme in the RAT-5D bioreactor, and the dynamic changes of multi-ginsenosides of NGL were recognized by HPLC. The reaction products were separated using a silica gel column and identified by HPLC and NMR. Results: All the NGL ginsenosides are protopanaxadiol-type ginsenosides; the main ginsenoside contents are 27.1% Rb3, 15.7% C-Mx1, 13.8% Rc, 11.1% Fc, 7.10% Fa, 6.44% C-Mc, 5.08% Rb2, and 4.31% Rb1. In the reaction of NGL ginsenosides with crude enzyme, the main reaction of Rb3 and C-Mx1 occurred through Rb3${\rightarrow}$C-Mx1${\rightarrow}$C-Mx; when reacted for 1 h, Rb3 decreased from 27.1% to 9.82 %, C-Mx1 increased from 15.5% to 32.3%, C-Mx was produced to 6.46%, finally into C-Mx and a small amount of C-K. When reacted for 1.5 h, all the Rb1, Rd, and Gyp17 were completely reacted, and the reaction intermediate F2 was produced to 8.25%, finally into C-K. The main reaction of Rc (13.8%) occurred through Rc${\rightarrow}$C-Mc1${\rightarrow}$C-Mc${\rightarrow}$C-K. The enzyme barely hydrolyzed the terminal xyloside on 3-O- or 20-O-sugar-moiety of the substrate; therefore, 9.43 g C-Mx, 6.85 g C-K, 4.50 g R7, and 4.71 g Fc (hardly separating from the substrate) were obtained from 50 g NGL ginsenosides by the crude enzyme reaction. Conclusion: Four monomer ginsenosides were successfully produced and separated from NGL ginsenosides by the enzyme reaction.
본 연구에서는 차선도료로 MMA (methyl metacrylate) 수지계 열경화성 수지를 선정하여 차선의 내구성능과 재귀반사성능을 개선할 수 있는 최적의 열경화성 차선도료를 설계하고자 하였다. 특히 현장 적용성을 향상시키기 위하여 차선도료의 경화시간을 8 min으로 단축하기 위해 주재의 구성요소를 설계하였다. 실험 결과 MMA 모노머($Tg=105^{\circ}C$) 15.6 wt%에 PMMA (ploymethyl metacrylate, MW = 70,000, $Tg=60^{\circ}C$) 6.0 wt%와 TMPTA (trimethylolpropane triacrylate, MW = 338, $Tg=27^{\circ}C$) 1.2 wt%를 배합한 TSRM-6가 부착강도 등 도료물성이 우수하여 최적 배합비율로 결정하였다. 열경화성 차선도료의 도장조건은 분사 전 반드시 균일한 혼합이 이루어져야 하며 최적 설계된 TSRM-6에 우천용 유리알을 사용한 경우 마모시험 횟수 20만 회에서 야간재귀반사성능계수는 $431mcd{\cdot}m^{-2}{\cdot}lux^{-1}$ (건조 조건), $354mcd{\cdot}m^{-2}{\cdot}lux^{-1}$ (젖은 조건), $172mcd{\cdot}m^{-2}{\cdot}lux^{-1}$ (비오는 조건)으로 우수한 성능을 나타내었다.
Thermotropic liquid-crystalline polyurethanes were synthesized by the polyaddition reaction of such para-substiuted diisocyanate monomer as 1,4-phenylene diisocyanate(1,4-PDI) and 2,5-tolylene diisocyanate(2,5-TDI), with 4,4'-bis($\omega$-hydroxyalkoxy)biphenyls(BPm: $HOC_{m}OC_{6}H_{4}C_{6}H_{4}OC_{m}H_{2m}OH$; m is the carbon number of the hydroxyalkoxy group). These polyurethanes have mesogenic biphenyl units in the main chain. Properties of polymers were studied by differential scanning calorimetry, wide-angle X-ray scattering, thermogravimetic analysis, polarizing microscopy, and infraed spectroscopy. DSC thermograms for these polymers exhibited two endothermic peaks corresponding to phase transitions of melting and isotropization. Mesomorphic behavior of the polyurethanes were also observed under the polarizing microscope. For example, polyurethane 2,5-YDI/BP5 with [$\theta$]=0.44 prepared from 2,5-TDI and BP5 exhibited a liquid crystalline phase from 194 to 205$^{\circ}C$. Infrared spectrum study indicated that the hydrogen bonding between urethane linkages affected the mesomorphism. The thermostabilities of polyurethanes 2,5-TDI/BP5 and 1,4-PDI/BP5 were measured at a heating rate of 1$0^{\circ}C$/min in air. The temperatures of 5% weight loss for 2,5-TDI/BP5 and 1,4-PDI/BP5 were 297 and 334$^{\circ}C$, respectively.
Pluripotent stem cells (PSCs) have lots of potential in biomedical sciences owing to its potential to differentiate into any kind of cells in the body. However, it is still a challenge to culture PSCs on a large scale for application to regenerative medicine. Herein, we introduce a synthetic polymer that enables large-scale suspension culture of human PSCs. By employing suspension culture, it became unnecessary to use conventional substrata such as mouse embryonic fibroblast (MEF) or Matrigel$^{TM}$, which are believed to be main causative sources of xenogeneic contamination in cultured human PSCs in vitro. Human PSCs were cultured in the medium in which elastin-like polypeptide (ELP) dissolved. The ELP in the medium became harden as temperature increases by transforming the medium into a semi-solid gel that supported growth of human PSCs in suspension. Gel-sol transition temperature of ELP can be adjusted by modifying the peptide sequence in which 5 amino acids, Val-Pro-Gly-Xaa-Gly, repeated sequentially. We constructed 3D suspension media having transition temperature around $33{\sim}35^{\circ}C$ using an ELP consisted of 40, 60, or 80 repeats of a monomer, which was Val-Pro-Gly-Val-Gly. Among the ELPs, ELP80 was chosen as the best ELP to support growth of human PSCs in suspension culture. This result suggests that the ELP80 can be a medium component for culturing human PSCs in large-scale.
Shuangdan oral liquid (SDO) containing radix Salviae miltiorrhizae (Chinese name Danshen) and cortex moutan (Chinese name Mudanpi) is a traditional Chinese medicine using for treating vascular diseases. Danshensu (DSS) is a main effective monomer composition derived from radix Salviae miltiorrhizae and paeonol (Pae) from cortex moutan. Although the two herbs are widely used in traditional Chinese medicine, the pharmacological functions of their active compositions were not reported. Therefore, the research of DSS and Pae in mechanisms and pharmacodynamics interaction can provide scientific evidence to support clinical application. The diabetic nephropathy (DN) rats which were induced by streptozotocin (STZ) were treated with SDO, DSS, Pae, and DSS+Pae for eight weeks. The positive effects on DN animal models were investigated by detection of physiological and biochemical indexes and oxidative stress markers, within five treatments: SDO, DSS, Pae, DSS+Pae and insulin group. Compared with the model group, the DSS+Pae group improved the renal function, blood lipid metabolism and blood viscosity, increased the vitality of T-SOD or T-AOC and decreased the level of MDA or NO after the treatment. The study was successfully showed that the DSS+Pae group could delay the process of DN, especially in the renal injury part of histopathology changes. Our results suggest that the co-administration of DSS and Pae significantly may play a protective role in DN rats through decreasing the oxidative stress and improving the blood lipid metabolism mechanisms.
Bi metal deposited on $Bi_2MoO_6$ composite photocatalysts have been successfully synthesized via a simple reduction method at room temperature with using $NaBH_4$ as the reducing agent. The photocatalytic activity of the composite was evaluated by degradation of rhodamine B (RhB) and bisphenol A (BPA) solution under visible light. The rate constant of $Bi/Bi_2MoO_6$ composite to RhB is 10.8 times that of $Bi_2MoO_6$, and the degradation rate constant of BPA is 6.9 times of that of $Bi_2MoO_6$. Nitrogen absorption-desorption isotherm proved that the increase of specific surface area is one of the reasons for the improvement of photocatalytic degradation activity of $Bi/Bi_2MoO_6$ composites. The higher charge transfer efficiency of $Bi/Bi_2MoO_6$ is found through the characterization of the photocurrent and impedance, which are attributed to the surface plasmon resonance (SPR) effect produced by the introduction of the metal Bi monomer in the composite. Free radical capture experiments proved that cavitation is the main active species. Based on the above conclusions, a possible mechanism of photocatalytic degradation is proposed.
Background: Ginsenosides (GS) have potential value as cosmetic additives for prevention of skin photoaging. However, their protective mechanisms against skin barrier damage and their active monomeric constituents are unknown. Methods: GS monomer types and their relative proportions were identified. A UVB-irradiated BALB/c hairless mouse model was used to assess protective effects of GS components on skin epidermal thickness and transepidermal water loss (TEWL). Skin barrier function, reflected by filaggrin (FLG), involucrin (IVL), claudin-1 (Cldn-1), and aquaporin 3 (AQP3) levels and MAPK phosphorylation patterns, were analyzed in UVB-irradiated hairless mice or HaCaT cells. Results: Total GS monomeric content detected by UPLC was 85.45% and was largely attributed to 17 main monomers that included Re (16.73%), Rd (13.36%), and Rg1 (13.38%). In hairless mice, GS ameliorated UVB-induced epidermal barrier dysfunction manifesting as increased epidermal thickness, increased TEWL, and decreased stratum corneum water content without weight change. Furthermore, GS treatment of UVB-irradiated mice restored protein expression levels and epidermal tissue distributions of FLG, IVL, Cldn-1, and AQP3, with consistent mRNA and protein expression results obtained in UVB-irradiated HaCaT cells (except for unchanging Cldn-1 expression). Mechanistically, GS inhibited JNK, p38, and ERK phosphorylation in UVB-irradiated HaCaT cells, with a mixture of Rg2, Rg3, Rk3, F2, Rd, and Rb3 providing the same protective MAPK pathway inhibition-associated upregulation of IVL and AQP3 expression as provided by intact GS treatment. Conclusion: GS protection against UVB-irradiated skin barrier damage depends on activities of six ginsenoside monomeric constituents that inhibit the MAPK signaling pathway.
Lichenase is an enzyme mainly implicated in the degradation of polysaccharides in the cell walls of grains. Emerging evidence shows that a highly efficient expression of a thermostable recombinant lichenase holds considerable promise for application in the beer-brewing and animal feed industries. Herein, we cloned a lichenase gene (CelA203) from Bacillus subtilis B110 and expressed it in E. coli. This gene contains an ORF of 729 bp, encoding a protein with 242 amino acids and a calculated molecular mass of 27.3 kDa. According to the zymogram results, purified CelA203 existed in two forms, a monomer, and a tetramer, but only the tetramer had potent enzymatic activity. CelA203 remained stable over a broad pH and temperature range and retained 40% activity at 70℃ for 1 h. The Km and Vmax of CelA203 towards barley β-glucan and lichenan were 3.98 mg/ml, 1017.17 U/mg, and 2.78 mg/ml, 198.24 U/mg, respectively. Furthermore, trisaccharide and tetrasaccharide were the main products obtained from CelA203-mediated hydrolysis of deactivated oat bran. These findings demonstrate a promising role for CelA203 in the production of oligosaccharides in animal feed and brewing industries.
The potential polyhydroxyalkanoates (PHA)-producing bacteria, Bacillus megaterium PP-10, was successfully isolated and studied its feasibility for utilization of pineapple peel waste (PPW) as a cheap carbon substrate. The PPW was pretreated with 1% (v/v) H2SO4 under steam sterilization and about 26.4 g/l of total reducing sugar (TRS) in pineapple peel hydrolysate (PPH) was generated and main fermentable sugars were glucose and fructose. A maximum cell growth and PHA concentration of 3.63 ± 0.07 g/l and 1.98 ± 0.09 g/l (about 54.58 ± 2.39%DCW) were received in only 12 h when grown in PPH. Interestingly, PHA productivity and biomass yield (Yx/s) in PPH was about 4 times and 1.5 times higher than in glucose. To achieve the highest DCW and PHA production, the optimal culture conditions e.g. carbon to nitrogen ratios of 40 mole/mole, incubation temperature at 35℃ and shaking speed of 200 rpm were performed and a maximum DCW up to 4.24 ± 0.04 g/l and PHA concentration of 2.68 ± 0.02 g/l (61% DCW) were obtained. The produced PHA was further examined its monomer composition and found to contain only 3-hydroxybutyrate (3HB). This finding corresponded with the presence of class IV PHA synthase gene. Finally, certain thermal properties of the produced PHA i.e. the melting temperature (Tm) and the glass transition temperature (Tg) were about 176℃ and -4℃, respectively whereas the Mw was about 1.07 KDa ; therefore, the newly isolated B. megaterium PP-10 is a promising bacterial candidate for the efficient conversion of low-cost PPH to PHA.
Polydopamine은 수중 접착력, 친환경 접착제, nanoparticle absorption 등 다양한 특성으로 많이 연구되고 있는 소재이다. 본 연구에서는 dopamine을 이용하여 수중 금속을 흡착시키는 thin film을 제작하였다. 종래의 Polydopamine coating 방법으로 wet coating 이 사용되고 있다. 하지만 wet 방식의 경우 시간이 오래 걸릴 뿐만 아니라 in-line, roll to roll 방식을 적용하는 것이 어렵기 때문에 생산적이지 않다. 이에 본 연구에서는 Atmospheric Pressure Plasma(APP)를 이용 하여 Polydopamine-like film을 coating 하였다. APP의 경우 vacuum system, solution tank가 필요 없고 in-line, roll to roll 방식을 적용 할 수 있기 때문에 더 경제적이고 생산적인 공정이다. 또한 기존의 Plasma polymerization 방법은 Plasma energy가 높기 때문에 source의 분자구조가 바뀌거나 atom 단위로 분해된다. source의 분자구조가 바뀌는 "Atomic polymerization", Neiswender-Rosskamp Mechanism이 적용되면 wet 방식 coating한 film과는 다른 특성을 갖게 된다. 하지만 APP polymerization은 Plasma energy가 vacuum plasma 보다 매우 낮기 때문에 stile polymerization mechanism을 구현 하는데 적합 하다. stile polymerization mechanism은 Plasma 내부에서 polymer source를 분해 성장 시켜서 Polymer film 얻는 것이 아닌 source의 분자구조가 깨지지 않으면서 polymer growing 시키는 방법이다. dopamine source의 분자구조를 최대한 유지하려고 하는 이유는 metal absorption과 같은 특성이 dopamine chemical structure에 영향을 받기 때문이다. 많은 논문들에서 dopamine의 catechol group이 metal absorption, adhesion force에 영향을 주는 주요 인자라고 주장하고 있기 때문이다. 그래서 본 논문에서는 Dopamine source의 형태를 보존하면서 Polymerization 하는 방법으로 APP process를 사용 하여 낮은 전압에서 Polydopamine-like film을 제작 하였다. APP system 의 Plasma 방전부 에 Dopamine source를 유입하기 위하여 본 논문에서는 Piezo Spray 방식을 사용 하였다. Dopamine을 evaporator 하는 것이 어렵고 chemical composition이 유사한 monomer를 사용해서 Plasma Polymerization으로 Dopamine 분자 구조를 재현하는 것도 어렵다. 그래서 본 연구에서는 Dopamine을 water에 immerse 하고 Dopamine solution을 mist 상태로 만들어서 Plasma discharge area에 유입하였다. 이러한 방법으로 만들어진 film은 Polydopamine film은 아니지만 Polydopamine film과 유사한 Chemical composition, chemical structure, metal absorption을 갖는 것을 FT-IR, SEM, XPS을 이용 하여 확인 하였다. Dopamine source의 보존에 대하여 명확하게 확인하기 위하여 FT-IR을 측정 하였다. 전압에 따른 Benzene ring, hydroxyl group의 비율을 확인 하였다. 낮은 전압으로 coating 된 Polydopamine-like film 일수록 hydroxyl group peak($3400{\sim}3000cm^{-1}$)과 비교하여 Benzene ring peak($1600{\sim}1580cm^{-1}$ and $1510{\sim}500cm^{-1}$)이 흡수를 더 많이 하는 것을 확인 할 수 있다. 이것은 Benzene ring이 파괴되지 않고 보존되는 것을 보여준다. Dopamine에서 Benzene ring은 absorption main factor인 catechol에 있는 chemical structure이다. 즉 Benzene ring peak이 높을수록 Catechol이 잘 보존 되었다는 의미 이다. Catechol의 보존은 absorption main factor가 보존 된다는 의미 이다. 이러한 Polydopamine-like film으로 As, Cr, Mg, Cu 200ppm solution에 대한 filtration 능력을 확인 하였다. As, Cr, Cu, Mg 의 제거율이 각각 약25%, 35%, 45%, 65%인 것을 확인 하였다. 이 수치는 시중에 판매되는 제품들과 비교했을 때 300%~500% 향상된 수치 이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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