Different detection characteristics of fluorescence immunochromatography method and high performance liquid chromatography (HPLC) method for the analysis of cyanobacterial toxins were studied. In particular, low and high limits of detection, detection time and reproducibility and detectable microcystin species were compared when fluorescence immunochromatography method and high performance liquid chromatography method were applied for the detection of microcystin (MC), a cyclic peptide toxin of the freshwater cyanobacterium Microcystis aeruginosa. A Fluorescence immunochromatography assay system has the unique advantages of short detection time and low detection limit, and high performance liquid chromatography detection method has the strong advantage of individual quantifications of several species of microcystins.
An analytical method for the simultaneous determination of 9 quinolones (QNs) in porcine, chicken, and bovine muscles was developed and validated using liquid chromatography-fluorescence detector (LC-FLD). The samples were extracted using a liquid-liquid extraction (LLE) process. Chromatographic separation was achieved on a reverse phase $C_8$ column with a gradient elution using a mobile phase of 200 mM ammonium acetate buffer (pH 4.5) and acetonitrile (ACN). The proposed method was validated according to the Food and Drug Administration (FDA) guideline for bioanalytical assay procedures. Recoveries of QNs were 83.1-111.9% with relative standard deviations (RSDs) below 15%. Linearity within a range of 30-500 ${\mu}g/kg$ was obtained with the correlation coefficient ($R^2$) of 0.9967-0.9999. The limits of detection (LOD) were 1-16 ${\mu}g/kg$. These values were lower than the maximum residues limits (MRLs) established by the European Union (EU). The present method was successfully applied to determine QNs in edible muscles.
한국농업기계학회 2000년도 THE THIRD INTERNATIONAL CONFERENCE ON AGRICULTURAL MACHINERY ENGINEERING. V.III
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pp.525-532
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2000
A new spectroscopic method for pesticide residues detection on agricultural products was developed. The general determination methods are high performance liquid chromatography (HPLC), gas chromatography (GC) or GC-mass spectrometry. They have provided relatively good detection limit and accuracy with complicated and time-consuming (5hrs above) procedures. In addition freshness is very important for evaluating qualities of agricultural products. This requires a simple and fast method for detection of pesticides. Reflectance, transmittance and fluorescence spectrometry of pesticides were tested using UV range because most of pesticides contain conjugation band in the molecular structures. Fluorescence spectrometry showed better sensitive to detect pesticide residues than did reflectance and transmittance spectrometry. Intensity and shape of fluorescence spectra showed different patterns with different structures of pesticides. Detection limit for fluorescence spectrometry was 0.1 ppm to 10 ppm depending on the structures of pesticides. Application of fluorescence spectrometry appears to be an easy method for detection of pesticide residues on agricultural products.
Kim, Sun-Ok;Sohn, Mi-Jin;Jeong, Soon-Seog;Shin, Jeh-Hoon;Lee, Young-Ik
BMB Reports
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제32권6호
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pp.521-528
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1999
The folding of recombinant hepatitis B virus X-protein (rHBx) solubilized from Escherichia coli inclusion bodies was investigated. By sequential dialysis of urea, rHBx was folded into its native structure, which was demonstrated by the efficacy of its transcriptional activation of the adenovirus major late promoter (MLP), fluorescence spectroscopy, and circular dichroism (CD) analysis. The decrease in CD values at 220 nm and a corresponding blue shift of the intrinsic fluorescence emission confirmed the ability of rHBx to refold in lower concentrations of urea, yielding the active protein. Equilibrium and kinetic studies of the refolding of rHBx were carried out by tryptophan fluorescence measurements. From the biphasic nature of the fluorescence curves, the existence of stable intermediate states in the renaturation process was inferred. Reverse phase-high performance liquid chromatography (RP-HPLC) analysis further demonstrated the existence of these intermediates and their apparent compactness.
Kim, Ha-Suck;Park, Chan-Seung;Hwang, Eui-Jin;Chol, Q.-Won
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제5권6호
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pp.253-259
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1984
An analytical applicability of the fluorescence detection with an optical multichannel analyzer to organic dyes was studied in this work. Continuous acquisition of spectra was possible with the use of a microcomputer. The maximum acquisition rate of a spetrum with 70-point average was about 3 seconds. Floppy discs were used to store data for later use in processing. Laser induced fluorescence detector in High Performance Liquid Chromatography was chosen for an application. Fluorescein below $10^{-15}g$ was detected satisfactorily using this system. With the help of microcomputer, three dimensional chromatograms of time-wavelength-intensity were obtained.
HPLCdp 의한 주요 afltoxins(aflatoxins $B_1,\;B_2,\;G_1\;및\;G_2$)의 동시 분석에서 postcolumn 유도체화법을 시도하였다. Electrochemical cell (Kobra-cell)을 사용한 postcolumn 유도체화법은 기존의 precolumn 유도체화법보다 분석시간을 단축하였으며 (약 1/2 단축), 더 안전하고 , 향상된 분석능을 보였다. Aflatoxin $B_1과\;G_1의$ 경우 10~100ppb에서, 그리고 B_2와\;G_2의$ 경우 3~30 ppb에서 직선성을 나타내었다. Aflatoxin $B_1과\;G_1은$ 각각 88.9% 및 100.5%로 양호한 회수율을 보였다. Aflatoxin $B_2와\;G_2의$ 경우 분리도는 우수하였으나 회수율에있어서 변이가 크게 나타났다.
A simple method was developed for the analysis of seven stilbene-type fluorescent whitening agents (FWAs) in paper materials by ion-pair reversed-phase high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. These stilbene-type FWAs included two disulfonate, two tetrasulfonate, and three hexasulfonate compounds. After optimization of chromatographic conditions, the FWAs were satisfactorily separated using a reversed-phase column (RP-18) with the following isocratic mobile phase: methanol-water (60:40) containing 17.5 mM TBABr and 10 mM citrate buffer (pH = 7.0). The calibration plot was linear in the range from 5 to 500 ng/mL for two disulfo-FWAs and from 1 to 500 ng/mL for the other five FWAs. Precision levels of the calibration curve as indicated by RSD of response factors were 1.2 and 8.1%. Limits of quantitation (LOQ) ranged from 1.2 to 11 ng/mL.
본 연구에서는 fluorescence derivatization 기법과 HPLC를 이용하여 수중에 nanograms per liter로 존재하는 극미량 N-nitrosodimethylamine(NDMA)를 분석하고자 하였다. 이를 위해 먼저 다양한 조건 하에서의 fluorescence intensity를 측정함으로써 derivatization 기법을 최적화하였는데, fluorescence detector의 excitation/emission wavelength는 340 nm(excitation)과 530 nm(emission)에서, denitrosation 후 용액의 pH는 9-12의 범위에서, 그리고 dansyl chloride의 농도는 330-500 mg/L 범위에서, 최대 fluorescence intensity를 보여주였다. 용매추출을 통한 수질 시료의 분석에서, 표준농도와 검출농도의 차이는, 저농도(10-200 ng/L) 범위에서 12-162%, 고농도(100-1000 ng/L) 범위에서 6-23%를 보여, 저농도 범위에서 더 많은 차이가 나는 것으로 나타났으나, 두 농도 범위 모두 표준농도와 검출농도의 평균 대비율이 1에 매우 근접해 있어, 수십에서 수백 nanograms NDMA per liter의 분석이 가능함을 보여주었다. 하수처리장 처리수에 주입한 NDMA의 분석에서도 다른 물질에 의한 간섭없이 정확한 농도 검출이 가능했는데, 이는 목적물질을 선별적으로 분석해내는 derivatization 과정에 의한 것으로 나타났다. HPLC와 fluorescence derivatization 기법을 이용한 NDMA의 분석은 상수 및 하수를 사용하는 다양한 실험 연구에서 NDMA를 분석하는 방법으로 효과적으로 사용될 수 있을 것이다.
This study was conducted two kinds of aims: 1) to modify the analytical methods (conditions) by high performance liquid chromatography - fluorescence detector for the detection of residual ivermectin in raw milk, 2) to provide basic information for the evaluation of standard of the residual ivermectin in raw milk. It could be considerable that negative ion spectra can be better method in the LC/MS analysis for the detection of residues, Characteristic daughter ions were observed in negative ion spectra, however, linear line was not formed in positive ion one. Three Holstein cows ($500{\pm}10kg$) were applied to commercial ointment of ivermectin just one time at the first day of test, and residues in raw milk were examined for 20day after administration. The limit of detection (LOD) was 0.65ng (n=5) by HPLC/FLD, and recovery rates were $87.85%{\sim}99.47%$. The peak was observed at the 4th day, and residues lasted to the end. Thus ivermectin was prohibited when lactating.
A new method for the determination of josamycin has been developed based on quenching of the fluorescence of 3-mercaptopropionic acid-capped CdTe quantum dots (MPA-CdTe QDs) by josamycin in ethanol. Reaction time, interfering substances on the fluorescence quenching, and mechanism of the interaction of CdTe QDs with josamycin were investigated. Under optimum conditions, the relative fluorescence intensity was linearly proportional to the concentration of josamycin between 12.0 and 120.0 ${\mu}g\;mL^{-1}$ with a correlation coefficient of 0.9956 and a detection limit of 2.5 ${\mu}g\;mL^{-1}$. The proposed method was successfully applied to commercial tablets, and the results were satisfactory, i.e. consistent with those of high-performance liquid chromatography (HPLC).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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