• 한국환경과학회지
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• 제1권2호
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• pp.87-91
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• 1992

Leaf discs were excised from spinach leaves (Spinaia oleracea L.) and floated in phosphate buffer (pH 6.8) containing paraquat solutions (0, 0.1, 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm), and incubated in the growth chamber under 5, 500 lux illumination at $25^{\circ}C$ for 24 hr. Treatment with paraquat caused the formation of malondialdehyde (MDA), an indicator of lipid peroxidation in leaf discs. When 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat solutions were applied to leaf discs, the contents of MDA were increased by 63, n6, 100, 140 and 150% of the level without paraquat treatment, respectively. 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat treatments reduced the amounts of ascorbic acid in leaf discs by 23, 35, 38, 42 and 56% of the level without paraquat treatment respectively. Activities of superoxide dismutase (SOD) in leaf discs of 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat treatments were decreased by 23, 42, 48, 61 and 70% of the level of SOD in non-treated group, respectively. The results suggest that paraquat may cause peroxidation of membrane lipid in spinach leaves as a result of paraquat-induced destruction of physiological defense against oxygen phytotoxicity.

• Environmental Sciences Bulletin of The Korean Environmental Sciences Society
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• 제1권2호
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• pp.87-91
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• 1997

Leaf discs were excised from spinach leaves (Spinacia oleracea L.) and floated in phosphate buffer (pH 6.8) containing paraquat solutions (0, 0.1, 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm), and incubated in the growth chamber under 5,500 lux illumination at $25^{\circ}C$ for 24 hr. Treatment with paraquat caused the formation of malondialdehyde (MDA), an indicator of lipid peroxidation in leaf discs. When 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat solutions were applied to leaf discs, the contents of MDA were increased by 63, 86, 100, 140 and $150\%$ of the level without paraquat treatment respectively. 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat treatments reduced the amounts of ascorbic acid in leaf discs by 23, 35, 38, 42 and $56\%$ of the level without paraquat treatment, respectively. Activities of superoxide dismutase (SOD) in leaf discs of 1.0, 10, 20, 50 and 100 ppm of paraquat treatments were decreased by 23, 42, 48, 61 and $70\%$ of the level of SOD in non-treated group, respectively. The results suggest that paraquat may cause peroxidation of membrane lipid in spinach leaves as a result of paraquat-induced destruction of physiological defense against oxygen phytotoxicity.

• 한국약용작물학회지
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• 제10권4호
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• pp.259-262
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• 2002

The efficiency of regeneration of callus and explants from leaf and stem disks of Epimedium koreanum was examined on the MS media containing 2,4-D, NAA, Kinetin, BA and TDZ. Calli were formed on the 2mg/l 2,4-D media at the rate of 32% from leaf discs and 52% from stems. No callus was produced on the media which are containing BA or TDZ alone. The combination of 2,4-D and BA showed the effect on the formation of callus. The combination of 2mg/l 2,4-D and 0.lmg/l BA in the MS media had produced the highest percentage of callus formation, 50% from leaf discs and 40% from stems, respectively. The combination of 2mg/l 2,4-D and 1mg/1 BA in the MS media had affected the formation of callus in the rate of 40% from leaf discs and 25% from stems. The combined plant growth regulators of 2,4-D and BA increased the formation of calli from leaf discs, but single treatment of 2,4-D showed the highest callus formation from stems. Multiple shoots from leaf discs were formed on the media containing NAA, BA, kinetin, and TDZ. The highest number of multiple shoots were obtained 0.1mg/l NAA combined with 1mg/l kinetin. As a result, leaf discs or stems can be used for the mass propagation of Epimedium koreanum, but stem elongation of shoots from calli was not easy.

• Journal of Plant Biology
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• 제31권2호
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• pp.155-164
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• 1988

The rapid senescence of detached Chinese cabbage leaf discs in darkness is first manifested by a sharp rise in malondialdehyde content (indicated by distruption of membrane structure), then by a rise in peroxidase activity and a decrease in catalase activity, and ultimately by chlorophyll degradation. These changes in parameters besides the catalase activity during senescence were delayed by application of spermidine. Especially, 10-4M spermidine almost completely arrested chlorophyll degradation after incubaton over 5 days. Spermidine reduced the amount of ethylene produced by senescing leaf discs. Additionally, it also reduced IAA-induced ethylene production. Calcium ion (1mM, 10mM) supplied together with the spermidine diminished the spermidine action, indicating probable involvement of an initial ionic attachment mechanism. These results suggest that spermidine can be used as an anti-senescence agent for plants and that this agent may stabilize membrane structure through interaction with the negatively charged loci on the membrane and exert the influence during senescence.

• 한국자원식물학회지
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• 제12권4호
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• pp.253-259
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• 1999

제초제 bialaphos에 저항성인 phosphinothricin ace-tytransferase gene이 도입된 형질전환 감자 식물체에서 유전자의 간편한 확인방법을 확립하였다. 먼저 형질전환체와 대조식물체의 잎 disc를 취해 bialaphos 5mg/l를 처리한 액체배지에 치상하였을 때 배양 25일이면 대조식물체의 잎 disc는 완전히 고사되어 형질전환체와 구별이 가능하였다. 감자의 뿌리 생육 비교실험에서는 bialaphos 0.5mg/l의 농도에 agar를 0.6% 첨가한 선발배지에서 식물체의 정단부위를 치상하여 비교하였을 때 7-10일이면 뿌리의 생육차이를 이용하여 간편하게 형질전환여부를 판정할 수 있었다. 또한 감자의 잎 disc를 제초제 bialaphos 0.5mg/l를 처리한 액체배지에 치상하여 15일이 경과한 후 chlorophyll A의 함량을 측정하였을때 형질전환체는 대조식물체보다 2.5배 정도 많은 chlorophyll A를 가지고 있어 형질전환체의 조기 판별시 chlorophyll A함량에 의해 검증이 가능하였다. 한편, 이렇게 형질전환 여부가 확인된 감자 식물체를 이용하여 PAT효소의 활성을 측정한 결과 대조 식물체에서는 PAT효소의 활성을 보이지 않았으나 형질전환 식물체에서는 모두 효소의 활성이 높았다.

• Plant Resources
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• 제4권3호
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• pp.111-120
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• 2001

The efficiency of in vitro regeneration of four clones of Populus euramericana, Canada blanc, Eugenii, I-45/51, and Wisconsin #5, was examined. Cytokinins and the combinations with auxins affected the rate of regeneration from the explants of root segments, stem internodes, and leaf discs. Overall, BA and the combination with auxins were effective in root segments and leaf discs of the Canada blanc clone, whereas zeatin and the combination with auxins were important in stem internodes of the Wisconsin #5 clone. The highest number of shoots averaging 17.6 $\pm$ 0.47 from root segments in the Canada blanc clone,18.2 $\pm$ 3.0 from stem internodes in the Wisconsin #5 clone, and 17.8 $\pm$ 1.92 from leaf discs in the Canada blanc clone were obtained with 2.0 mg/1 BA, 2.0 mg/l zeatin combined with 0.2 mg/l IAA, and 0.5 mg/l BA combined with 0.05 mg/l 2,4-D, respectively. In particular, the addition of 2,4-D into cytokinin medium promoted shoot proliferation.

• Journal of Plant Biology
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• 제36권4호
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• pp.383-389
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• 1993

Intact leaf과 detached epidermis에 있는 공변세포의 전기 생리학적 특성에 대한 빛과 이산화탄소의 효과를 조사하였다. 빛을 intact leaf의 abaxial side에 처리하면 공변세포막이 과분극 (hyperpolarization)되었다. 닭의장풀의 intact leaf에 있는 공변세포들은 빛에 의해 최대 13 mV 그리고 이산화탄소에 의해 42 mV까지 membrane potential difference(MPD)가 negative하게 변했다. 자주달개비에서도 비슷한 결과를 얻었다. 그러나, 빛과 이산화탄소를 detached epidermis에 있는 공변세포에 처리할 경우에는 공변세포의 MPD가 변하지 않았다. 위의 결과로부터, 엽육세포가 공변세포의 MPD 변화에 영향을 주는 것으로 사료되어, 엽육세포들을 광합성 억제제들을 침윤시켜 엽육세포 광합성의 어느 기작이 공변세포 MPD 변화에 영향을 주는지 조사하였다. CCCP로 침윤한 잎의 공변세포막은 적색광에 의해 약간 탈분극(depolarization)되었고, 이산화탄소에 의해 과분극되었다. 반면에, DCCD와 DCMU로 침윤한 경우에는 대조구 잎과 마찬자기로 적색광과 이산화탄소에 의해 과분극되었다. Azide로 침윤한 잎에 적색광을 처리하면 공변세포의MPD는 변하지 않았고, 이산화탄소를 처리하면 다른 처리구들에 비해 훨씬 감소한 막의 과분극을 보였다. 이는 azide가 잎에 손상을 유도하며 세포내 대사활성을 감소시킨 결과 이산화탄소에 의한 MPD 변화가 작았고, 적색광은 아무 효과도 보이지 않은 것으로 사료된다. 따라서, 엽육세포가 적색광을 감지하며 빛에 의해 유도된 공변세포막 과분극은 순환적 광인산화 반응에 의해 생성된 에너지에 의존하나 이산화타소에 의해 유도된 공변세포막 과분극은 광합성가 무관하다고 볼 수 있다. 또한 이산화탄소를 intact leaf에 처리하면 공변세포 액포가 알칼리화되는 것을 관찰하였는데, 이는 막의 과분극이 양성자 이온의 방출에 의해 일어난다는 것을 의미한다.

• 한국약용작물학회지
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• 제13권6호
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• pp.273-277
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• 2005

지황 (R. glutinosa)의 조직절편으로부터 고효율의 식물체 재분화 시스템을 확립하기 위하여 기내에서 발아된 유묘의 잎을 절취하여 auxins과 cytokinins을 농도별로 단독 또는 혼합하여 MS배지에 치상한 후 신초의 형성율을 조사하였다. 잎 절편으로부터 부정아의 형성율은 1 mg/{\ell}\;BA와\;2mg/{\ell}$ IAA가 첨가된 MS배지에서 93.4%로 가장 높았다. 한편, 엽령에 따른 부정아의 형성율을 조사한 결과 기내에서 발아 후 6주가 지난 유식물체의 정단부위로부터 3번째의 잎을 사용함으로써 신초의 형성율을 98.4%까지 높일 수 있었다. 형성된 신초는 $0.1mg/{\ell}$ IBA가 첨가된 1/2MS배지로 옮겼을 때 4주 후 최대 발근율을 보여주었다.

• 환경생물
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• 제17권2호
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• pp.199-204
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• 1999

여름철 자연조건에서 자라는 두릅나무과 식물 잎의 SOD활성과 광계II의 광화학적 효율의 차이를 분석하고 온도 스트레스와 paraquat의 영향을 조사하였다. 그 결과, 두릅나무과 식물 6종의 잎으로부터 총 8개의 superoxide dismutase(SOD) isoenzyme이 구분되었다. 그 중, 섬오갈피나무 (Acanthopanax koreanum)에서는 두릅나무과 식물에 공통적인 2개의 isoenzyme (SOD 4와 SOD 6)이 높은 활성으로 검출되었고, 황칠나무(Dendropanax morbifera)에서는 두릅나무과 식물이 갖는 8개의 isoenzyme이 모두 검출되었다. 광계II의 광화학적 효율을 나타내는 Fv/Fm은 낙엽성 식물에서는 섬오갈피나무가 다른 종보다 높았으며, 상록성 식물에서는 음지에 위치해 있는 잎이 양지에 위치해 있는 잎보다 전반적으로 높게 나타났다. 섬오갈피나무 잎 disc의 Fv/Fm은 온도가 높아짐에 따라 감소하였지만 황칠나무 잎 disc에서는 35$^{\circ}C$에서 현저하게 감소하였다. 그리고 온도 스트레스와 함께 paraquat를 처리하였을 때 섬오갈피나무에서는 4$^{\circ}C$에서, 황칠나무에서는 35$^{\circ}C$에서 Fv/Fm이 억제되었다. 한편, SOD 활성은 섬오갈피나무 잎 disc에서는 4$^{\circ}C$와 28$^{\circ}C$에서 높았고 paraquat를 함께 처리하였을 매에는 모든 온도에서 활성이 높아졌다. .그러나, 황칠나무 잎 disc에서는 온도가 높아짐에 따라 SOD활성이 억제되었고 paraquat를 함께 처리하였을 때에는 더욱 억제되었다. 따라서, 섬오갈피나무는 황칠나무에 비하여 온도 스트레스나 산화적 스트레스에 효율적으로 대처하는 것으로 나타났다.

• Plant Resources
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• 제4권1호
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• pp.36-40
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• 2001

Transgenic Petunia hybrida cv. Rosanpion was produced by Agrobactepium tumefaciens LBA4404 harboring a binary vector pBI 121 containing $\beta$-glucuronidase (gus) and neomycin phosphotransferase (nptII). For genetic transformation, leaf discs were precultured on MS medium supplemented with 0.5 mg/L NAA and 1.0 mg/L BA (MNB) for 2 days and cocultured for 15 mins with A. tumefaciens. For selection of transformant, leaf discs were transferred to fresh MNB containing 50 mg/L kanamycin and 500 mg/L cefotaxime. Eighteen plants were regenerated and four were confirmed by PCR for detection of gus and nptII gene integrated into the nuclear genome of petunia ‘Rosanpion’. Using this transformation system, we expect that transgenic petunia ‘Rosanpion’ incorporating a useful gene can be produced.