Bacillus anthracis Sterne 34F$_2$균주로부터 PA를 생산하기 위해 RM배지를 변형하였다. NaHCO$_3$를 8 g/l에서 10 g/l로, glucose를 5 g/l로 첨가하여 새로운 배지조성에서 탄저균을 배양한 후, 배양액을 hydroxyapatite를 이용하여 농축하였다. 농축된 조단백질을 hydroxyapatite column chromatography, DEAE-Sepharose CL-4B column chromatography 및 Toyo-pearl gel filtration chromatography를 사용하여 PA를 정제하였다. 변형된 RM 배지를 사용해 얻은 PA 양은 8.6 mg/l 이었다.
스퍼터 이온펌프(Sputter Ion Pump)는 주로 화학흡착으로 동작하며 기계적 진동이 없고, 기름 등의 오염 물질을 배출하지 않으며, 수명이 길어 초고청정 진공이 요구되는 표면실험장치, 표면분석계, 입자가속기 등에서 널리 사용 되고 있다. 일정한 지름을 갖는 다수의 원통 양극과 그 양단에 두개의 음극판을 배치시킨 후, 양극과 음극 사이에 수 kV의 전압을 걸고 원통의 축방향으로 자장을 인가하면 페닝 방전이 발생한다. 냉음극에서 방출된 전자는 양극으로 비행하면서 가스를 이온화한다. 이온분자는 가스흡수성 게터재료로 된 음극에 충돌하여 스퍼터링을 일으키며 게터막를 주변에 증착시킨다. 이온 및 중성 가스는 게터 고체막 속에 주입 포획되는 형태로 배기된다. 스퍼터 이온펌프는 $10^{-5}$ Pa 부근에서 최대 배기속도를 가지며, 압력이 낮아질 수록, 특히 $10^{-10}$ Pa영역 이하에서는 그 배기속도가 급격히 저하되며, $10^{-10}$ Pa영역에서는 배기능력을 거의 상실한다. 따라서 스퍼터 이온펌프 단독으로 진공시스템을 배기할 때 도달압력은 $10^{-9}$ Pa 영역에 머무르게 되며, $10^{-10}$ Pa 이하의 극고진공을 얻기 위해서는, $10^{-8}$ Pa 이하의 압력에서 배기 속도가 압력과 무관한 흡착펌프(getter pump)와 이온펌프를 조합하여 사용한다. 본 실험에서는 $600^{\circ}C$ 이상의 온도로 진공로에서 탈개스시킨 진공용기를 배기속도 450, 60, 30, 20, 5, 3 l/s의 6종류의 이온펌프와 배기속도 400 l/s, 100 l/s의 non-evaporable getter (NEG) 펌프를 조합시켜 배기하여 그 배기 특성을 비교하였다. 도달 압력은 이온펌프의 배기속도가 클수록 낮아지는 경향을 보여주었다. 450 l/s 이온펌프와 400 l/s NEG를 조합하여 배기시킬 때 도달 압력은 ~$2{\times}10^{-10}$ Pa을 기록하여 가장 낮았으며, 3 l/s 이온펌프와 400 l/s NEG를 조합하였을 때는 $ 2{\sim}3{\times}10^{-8}$ Pa을 기록하였다. 450 l/s 이온펌프와 400 l/s NEG를 조합한 경우 잔류가스의 대부분이 수소였으나, 3 l/s 이온펌프와 400 l/s NEG의 조합한 경우에는 메탄의 잔류량이 수소 보다 많았다. 이 결과는 메탄을 배기하지 못하는 NEG의 배기 특성을 보완하기 위해서는 일정 배기속도 이상의 이온 펌프가 필요함을 보여준다.
Gill, Diane L.;Hammond, Cara C.;Reifsteck, Erin J.;Jehu, Christine M.;Williams, Rennae A.;Adams, Melanie M.;Lange, Elizabeth H.;Becofsky, Katie;Rodriguez, Enid;Shang, Ya-Ting
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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제46권sup1호
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pp.28-34
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2013
Physical activity (PA) professionals and participants recognize enhanced quality of life (QoL) as a benefit of and motivator for PA. However, QoL measures are often problematic and rarely consider the participants' perspective. This paper focuses on recent findings from a larger project on the role of QoL in PA and health promotion. More specifically, we focus on the views of participants and potential participants to better understand the relationship of PA and QoL. In earlier stages of the project we began with a conceptual model of QoL and developed a survey. We now focus on participants' views and ask two questions: 1) what is QoL? and 2) how does PA relate to QoL? We first asked those questions of a large sample of university students and community participants as open-ended survey items, and then asked focus groups of community participants. Overall, participants' responses reflected the multidimensional, integrative QoL model, but the responses and patterns provided information that may not be picked up with typical survey measures. Findings suggest that PA contributes to multiple aspects of QoL, that social and emotional benefits are primary motivators and outcomes for participants, and that the meaning of QoL and PA benefits is subjective and contextualized, varying across individuals and settings. Programs that directly target and highlight the multiple dimensions and integrative QoL, while considering the individual participants and contexts, may enhance both PA motivation and participants' health and QoL.
The present study was performed to identify the relationship between plasminogen activator (PA) and Heat Shock Protein-90 (HSP-90) in porcine uterus tissues during the estrous cycle. Porcine uterus tissues were obtained from preovulatory (Pre-Ov), post-ovulatory (Post-Ov) and early to mid-luteal (Early-mid L) stages. The protein was extracted from uterus tissue by using M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent. Proteins were refined by RIPA Buffer and quantified by BCA methods. As results, t-PA expression was significantly (p<0.05) higher from pre-ovulatory(Epithelium tissue: $29,067{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $30,797{\mu}g/{\mu}l$) compared to the post-ovulatory stage(Epithelium tissue: $54,357{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $53,270{\mu}g/{\mu}l$) and early to mid-luteal stage(Epithelium tissue: $42,380{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $43,139{\mu}g/{\mu}l$). On the other hand, the uPA expression indicated higher from early to mid-luteal stage (Epithelium tissue: $0.02198{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $0.02412{\mu}g/{\mu}l$) than pre-ovulatory stage (Epithelium tissue: $0.01577{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $0.01531{\mu}g/{\mu}l$) and post-ovulatory stage(Epithelium tissue: $0.01414{\mu}g/{\mu}l$, Myometrium tissue: $0.01429{\mu}g/{\mu}l$). However, expression of u-PA did not differ from each estrous cycle in the epithelium tissue and myometrium tissue(p<0.05). Expression of HSP-90 was differ t-PA and u-PA from pre-ovulatory in Epithelium tissue($25,423{\mu}g/{\mu}l$) and early to mid-luteal stage in epithelium tissue($177,922{\mu}g/{\mu}l$) and myometrium tissue($26,664{\mu}g/{\mu}l$). These results suggest that HSP-90 and u-PA were related with change of uterus cycle according to the reformation of the tissues in porcine uterus.
목 적 : 악성 종양에 있어서 단백질 분해 효소에 의한 세포외기질의 분해는 종양 침습 및 전이에 있어서 중요한 역할을 한다. Urokinase-type plasminogen activator(u-PA)는 이러한 단백질 분해효소 중 하나이며, u-PA의 길항제인 plasminogen activator inhibitor(PAI-1, PAI-2)도 u-PA에 의한 종양조직 자체의 분해를 방어하여 종양의 성장, 침습 및 혈관신생을 촉진하는 역할을 한다. u-PA와 PAI-1은 폐암 등의 종양 조직내의 양이 증가하며, 침습도 및 예후 둥과 유의하게 상관되는 것으로 보고되고 있다. 저자 등은 폐암환자의 혈장 u-PA와 PAI-1의 농도를 측정하여 조직형 및 병기와의 관련성을 조사해 보고자 한다. 방 법 : 폐암 환자 37예, 여러 가지 양성 폐질환 환자 21예 및 유사연령의 정상 대조군 24예에서 혈장 u-PA 및 PAI-1 항원의 농도를 ELISA법으로 측정하였다. 결 과 : 혈장 u-PA 항원 농도는 정상 대조군에서 $1.0{\pm}0.3ng/mL$, 양성 폐질환군에서 $1.0{\pm}0.3ng/mL$, 폐암환자군에서 $0.9{\pm}0.3ng/mL$로 유의한 차이가 없었다. 혈장 PAI-1 항원 농도는 정상 대조군에서 $14.2{\pm}6.7ng/mL$, 양성 폐질환군에서 $14.9{\pm}6.3ng/mL$, 폐암 환자군에서 $22.1{\pm}9.8ng/mL$로 폐암 환자에서 정상 대조군 및 양성 폐질환군에 비하여 유의하게 높았다. 혈장 u-PA 항원 농도는 편평상피암에서 $0.7{\pm}0.4ng/mL$, 선암에서 $0.8{\pm}0.3ng/mL$, 대세포암에서 0.9ng/mL, 소세포암에서 $1.1{\pm}0.7ng/mL$로 유의한 차이가 없었다. 혈장 PAI-1 항원 농도는 편평상피암에서 $22.3{\pm}7.2ng/mL$, 선암에서 $22.6{\pm}9.9ng/mL$, 대세포암에서 42ng/mL, 소세포암에서 $16.0{\pm}14.2ng/mL$로 유의한 차이가 없었다. u-PA 항원 농도는 stage I에서 0.74ng/mL, stage II에서 $1.2{\pm}0.6ng/mL$, stage IIIA에서 $0.7{\pm}0.4ng/mL$, stage IIIB에서 $0.7{\pm}0.4ng/mL$, stage IV에서 $0.7{\pm}0.3ng/mL$였고, 혈장 PAI-1 항원 농도는 stage I에서 21.8ng/mL, stage II에서 $22.7{\pm}8.7ng/mL$, stage IIIA에서 $18.4{\pm}4.9ng/mL$, stage IIIB에서 $25.3{\pm}9.0ng/mL$, stage IV에서 $21.5{\pm}10.8ng/mL$로 유의한 차이가 없었다. 폐암 환자에서 T기를 T1-3 와 T4로 나누어서 비교를 한 결과, 혈장 u-PA 항원 농도는 T1-3에서 $0.8{\pm}0.4ng/mL$였고 T4에서 $0.7{\pm}0.4ng/mL$로 차이가 없었으나, 혈장 PAI-1 항원 농도는 T1-3에서 $17.9{\pm}5.6ng/mL$였고 T4에서 $26.1{\pm}9.1ng/mL$로 T4에서 유의하게 높았다. 혈장 u-PA 항원 농도는 M0에서 $0.8{\pm}0.4ng/mL$, M1에서 $0.7{\pm}0.3ng/mL$였고, 혈장 PAI-1 항원 농도는 M0에서 $23.6{\pm}8.3ng/mL$, M1에서 $21.5{\pm}10.8ng/mL$로 유의한 차이가 없었다. 결 론 : 이상의 결과에서 폐암 환자에서 혈장 PAI-1은 정상대조군 및 양성 폐질환에 비하여 특이적으로 증가하였고, 또한 폐암의 국소적 침습 정도와의 관련성을 보여 주었다.
Objectives : Plantaginis asiaticae Folium (PA) has been widely used in Korean medicine for treatment of liver disease, stomach troubles and inflammation. We investigated the effect of PA on lipid accumulation in 3T3-L1 according to extraction conditions. Methods : The MTT assay was employed to evaluate the cytotoxicity of PA extracted by different solvents (water, 50% ethanol, and 95% ethanol) on 3T3-L1 preadipocytes. Oil red O staining was used to identify intracellular lipid accumulation in 3T3-L1. 3T3-L1 adipocytes were treated with PA at concentration ranging in 0.1, 0.2 and $0.4mg/m{\ell}$. PA was extracted by different extraction conditions such as extraction solvents, extraction time, and extraction temperature. In addition, UPLC analysis was used for determination of candidates of active ingredients in PA. Results : 3T3-L1 preadipocytes were treated with PA extracted by different solvents (water, 50% ethanol, and 95% ethanol) and there was no cytotoxicity. Oil red O staining was employed to identify the effect of PA on lipid accumulation in 3T3-L1. In the present study, PA water extraction at $70^{\circ}C$ for 6 hours decreased greatly in lipid accumulation. The range of concentrations was 0.1, 0.2 and $0.4mg/m{\ell}$. Concentration at $0.2mg/m{\ell}$ was the most effective one among them. Candidates of active ingredients in PA were shown plantamajoside and acteoside through UPLC. Conclusions : These results suggest that the effect of PA water extraction at $70^{\circ}C$ on lipid accumulation in 3T3-L1 is superior to other extraction conditions. We suppose that plantamajoside and acteoside may be candidates of active ingredients in PA.
지름이 각각 10 mm와 20 mm인 피스톤과 진공장치를 이용해서 발생된 유량과 이온게이지의 압력을 측정하여 비교하는 방법으로 개발 중인 오일유량계의 성능을 예비 평가하였다. 큰 피스톤의 유량 발생 범위는 $1{\times}10^{-1}Pa{\cdot}L/s{\sim}1.2Pa{\cdot}L/s$이었고 작은 피스톤의 유량발생 범위는 $5.3{\times}10^{-1}Pa{\cdot}L/s{\sim}1.05Pa{\cdot}L/s$이었으며, 이 구간에서의 반복성과 직선성은 비교적 좋았다. 개발 중인 오일유량계는 국가 리크표준기로서 앞으로 표준리크를 교정하는데 활용할 계획이다.
Computed Radiography (CR) 시스템에서 영상의 신뢰성과 재현성을 높이기 위해서는 영상 획득 과정의 마지막 단계에서 이루어지는 나트륨램프의 소거에 의한 Image Plate (IP)의 완전한 초기화가 매우 중요하다. 본 연구에서는 CR (Agfa CR 25; Agfa, BELGIUM)을 이용하여 잠상의 소거 후 지연시간에 따른 노이즈의 평가, 소거량에 따른 잠상의 소거 후 노이즈의 평가, 그리고 American Association of Physicist in Medicine (AAPM) Report 93 (2006)의 CR acceptance test 중 erasure thoroughness 평가를 시행하였다. 임상에서 주로 쓰이는 Chest postero-anterior (PA), Hand PA, L-spine lateral을 촬영 후 스캔하였다. Chest PA와 L-spine lateral은 Chest phantom (3D-torso; CIRS, USA)을 이용하여 촬영했고 Hand PA는 피검자를 통해 촬영되었다. 실험 결과 Hand PA를 제외한 나머지 unexposed image에서 지연시간이 길어질수록 전반적으로 ghost image를 비롯한 noise가 증가하였으며, overexposure된 부분을 따라 ghost image가 나타났다. 지연시간에 의해 야기된 noise에 의한 영향은 육안으로 확인되지 않았다. 픽셀 값의 standard deviation (SD)은 overexposure 된 부분이 상대적으로 높게 측정되었다. 잠상의 소거 정도에 따른 영상의 noise평가 결과 Hand PA, Chest PA는 소거 정도 값이 높아져도 noise는 증가하지 않았다. 그러나 상대적으로 조사선량이 큰 L-spine lateral은 기준 소거 정도보다 낮을 경우 noise가 발생하였다. Erasure thoroughness 평가 결과 학과 내 CR 장비의 잠상소거능력은 기준치에 부합함을 확인하였다. 본 연구가 IP 초기화에 기초적인 자료를 제공함으로써 신뢰성 있는 영상을 획득하는데 기여할 것으로 기대한다.
For the specific detection of human Parvovirus B19 (HuPaV-B19), we designed ten specific PCR primers from 3,800~4,500 nucleotides of HuPaV-B19 complete genome (NC_000883.2). Seventeen candidate PCR primer sets for specific detecting HuPaV-B19 were constructed. In specific reaction of HuPaV-B19, seventeen PCR primer sets showed specific band, however five PCR primer sets were selected basis of band intensity, amplicon size and location. In non-specific reaction with seven reference viruses, four PCR primer sets showed non-specific band, however one PCR primer set is not. Detection sensitivity of final selective PCR primer set was $100fg/{\mu}L$ for 112 minute, and PCR amplicon is 539 base pairs (bp). In addition, nested PCR primer set was developed, for detection HuPaV-B19 from a low concentration of contaminated samples. Selection of nested PCR primer set was basis of sensitivity and groundwater sample tests. Detection sensitivity of final selective PCR and nested PCR primer sets for the detection of HuPaV-B19 were $100fg/{\mu}L$ and $100ag/{\mu}L$ basis of HuPaV-B19 plasmid, it was able to rapid and highly sensitive detection of HuPaV-B19 than previous reports. We expect developed PCR primer set in this study will used for detection of HuPaV-B19 in various samples.
We previously identified Streptomyces griseus as an anti-cancer agent (Kim et al., 2014). In this study, we isolated compounds from S. griseus and evaluated their anticancer effect and toxicity in vitro and in vivo. Preparative centrifugal partition chromatography (CPC) was used to obtain three compounds, cyclo($_{\small{L}}$-[4-hydroxyprolinyl]-$_{\small{L}}$-leucine], cyclo($_{\small{L}}$-Phe-trans-4-hydroxy-$_{\small{L}}$-Pro) and phenethyl acetate (PA). We chose PA, which had the highest anticancer activity, as a target compound for further experiments. PA induced the formation of apoptotic bodies, DNA fragmentation, DNA accumulation in $G_0/G_1$ phase, and reactive oxygen species (ROS) formation. Furthermore, PA treatment increased Bax/Bcl-xL expression, activated caspase-3, and cleaved poly-ADP-ribose polymerase (PARP) in HL-60 cells. Simultaneous evaluation in vitro and in vivo, revealed that PA exhibited no toxicity in Vero cells and zebrafish embryos. We revealed, for the first time, that PA generates ROS, and that this ROS accumulation induced the Bcl signaling pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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