• 제목/요약/키워드: ion exchange column chromatography

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치환크로마토그래피에서 온도와 용리액의 흐름속도가 란탄족 원소들 (La : Ce, Ce : Pr, Pr : Nd) 의 분리에 미치는 영향 (The Effect of Temperature and Flow Rate of Eluent on the Separation of Adjacent Lanthanides (La : Ce, Ce : Pr, Pr : Nd) with Displacement Chromatography)

  • 하영구;송기훈
    • 대한화학회지
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    • 제38권9호
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    • pp.660-666
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    • 1994
  • 이웃하는 란탄족 원소의 분리에서 온도와 흐름속도의 영향을 치환크로마토그래피로 연구하였다. 일렬로 연결된 두 컬럼에 Amberlite 120 양이온 교환수지를 채워서 충전용과 분리용으로 나누어 사용하였다. 보유이온은 $H^+$을, 흐름용액은 0.012M과 0.015M의 EDTA 용액을 사용하였다. 실험중에는 관의 온도를 90$^{\circ}C$로 유지하였으며 이온교환수지 관 속에 생기는 기포를 줄이기 위해 일정한 압력을 걸었다. 용출액은 ICP-AES로 직접 분석하였다. 이 실험에서 란탄족 원소쌍 La: Ce, Ce :Pr, Pr: Nd에 대한 분리인자는 각각 4.6, 2.8, 1.9이었으며 이것은 25$^{\circ}C$에서 이론적으로 얻은 것보다 큰 값이다. 흐름속도를 2.5 ml/min에서 1.5 ml/min로 줄이면 이론단해당높이(HETP)도 1.60 cm에서 0.88 cm로 줄었다. 따라서 용리액의 흐름속도를 줄이고 온도를 높이므로써 분리효율을 증가시킬 수 있었다. 이 실험에서 99.9% 이상의 순수 란탄족 원소에 대한 회수율은 49∼77%이었다.

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Purification and characterization of hepatic lipase from Todarodes pacificus

  • Park, Jong-Won;Cho, Soon-Yeong;Choi, Suk-Jung
    • BMB Reports
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    • 제41권3호
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    • pp.254-258
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    • 2008
  • Lipase was purified from squid (Todarodes pacificus) liver in an attempt to investigate the possibility of applying the enzyme for biotechnological applications. Crude extract of squid liver was initially fractionated by the batch type ion exchange chromatography. The fraction containing lipase activity was further purified with an octyl-Sepharose column. Finally, lipase was purified by eluting active protein from a non-dissociating polyacrylamide gel after zymographic analysis. Molecular weight of the purified enzyme was determined to be 27 kDa by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The enzyme showed the highest activity at a temperature range of $35-40^{\circ}C$ and at pH 8.0. The activity was almost completely inhibited at 1 mM concentration of $Hg^{2+}$ or $Cu^{2+}$ ion. Partial amino acid sequence of the enzyme was also determined.

Studies on Thermostable Tryptophanase from a Symbiotic Thermophile

  • Chung, Yong-Joon;Beppu, Teruhiko
    • 한국미생물생명공학회:학술대회논문집
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    • 한국미생물생명공학회 1986년도 추계학술대회
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    • pp.515.1-515
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    • 1986
  • Thermostable tryptophanase was extracted from a thermophilie bacterium, strain T which was absolutely symbiotic with strain 5. The enzyme was purified 14.7 fold with 5.8% yield by chromatographies using ion exchange, gel filtration, and hydrophobic interaction columns, followed by high performance liquid chromatography on hydroxyapatite column. The purified enzyme has a molecular weight of approximately 210,000 estimated by gel filtration column chromatography, and the molecular weight of subunit was determined by SDS polyacrylamide gel electrophoresis to be 46,000, which indicates that the native enzyme is made of four homologous subunits. The tryptophanase was stable at 65o0 and the optimum temperature for the enzyme activity for 20 min reaction was 70$^{\circ}C$. The purified enzyme activity for 20 min ieaction was 70$^{\circ}C$. The purified enzyme catalyzed the degradation of L-tryptophan into indole, pyruvate and ammonia in the presence of pyridoxal phosphate. 5-Hydroxy-Ltryptophan, 5-methyl-DL-tryptophan, L-cysteine, S-methyl-L-cysteine, 5-methyl-DL-tryptophan, L-cysteine, S-methyl-Lcysteine, and L-serine were also used as substrates to form pyruvate. The amino acid composition of the tryptophanase was determined, and found to contain a high percentage of hydrophobic amino acids, especially in the proline content, which was much higher than that of Escherichia coli tryptophanase. In addition, the 35N-terminal amino acid sequence of the tryptophanase was completely different from that of E. coli tryptophanase.

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미나리 ( Oenanthe stolonifera ) 의 Cd, Zn 제거능과 내성에 관한 연구 (Studies on Cd and Removal Ability and Detoxification of Oenanthe stolonifera)

  • Lee Soo;In Sook Lee
    • The Korean Journal of Ecology
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    • 제19권6호
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    • pp.519-527
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    • 1996
  • To examine the possibility of biomonitoring of heavy metal removal ability and soil, a study was performed to investigate the heavy metal removal ability and metal-binding protein (MBP) as detoxification process using Oenanthe stolonifera. After O. stolonifera was exposed to individuals (cadmium, zinc) and mixture (cadmium+zinc)for 4 days, removal rate of heavy metal and pH in the treatment medium was measured. MBP was assayed by means of ion exchange column chromatography. The exposure to mixture (Cd:76.8%, Zn:75%) rather than individuals (Cd:82.9%, Zn:90.4%) showed a synergism raising the toxic effect. Initial removal rate was different for each heavy metal : in case of exposure to cadmium it was over 60% on day 1, while for zinc it was 75~90% on day 4. Throughout the experimental period, pH value of treatment medium continuously decreased, since cortex in the roots may secret organic acid to adjust and prevent toxicity of metals. The existence or MBP in the 70~80 fraction and the presence of Zn-enzyme pool was ascertained with the column chromatography. This study demonstrated a possibility that heavy utilized as a biomarker of heavy metal pollution.

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감자 단백질이 Clostridium perfringens 및 주요 장내 미생물의 생육에 미치는 영향 (Effects of Potato Protein on the Growth of Clostridium perfiringens and Other Intestinal Microorganisms)

  • 신현경;신옥호;구영조
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권3호
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    • pp.249-256
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    • 1992
  • 국내에서 구입 가능한 주요 식이 소재로부터 장내의 대표적인 유해균인 Clostridium perfringens의 생육을 억제시키는 소재를 탐색한 결과 감자즙에서 강력한 항균활성을 발견하였다. 감자즙 중 70% 황산암모늄용액에서 침전되는 단백질성 물질이 항균활성을 나타낸 것으로 밝혀졌으며, 이 감자단백질은 pH 4~10 사이에서는 안정하나 $60^{\circ}C$에서 10분간의 열처리로 그 활성이 소실되었다.

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Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 Bacteriocin의 정제 및 성질 (Purification and Properties of Bacteriocin Produced by Lactococcus sp. 1112-1)

  • 최신양;이상호;유진영;정건섭;구영조;이인선
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권3호
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    • pp.209-214
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    • 1991
  • Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 bacteriocin을 정제하고 특성을 조사하였다. CM-sephadex ion exchange column chromatography, Sephadex G-50 gel filtration, SDS-PAGE를 행함으로서 수율 16.2 정제도 123배의 단일물질을 얻었다. 이 물질은 열에 비교적 안정하여 $60^{\circ}C$에서 60분간 열처리 할 때 38의 잔존활성을 유지하였으며 알카리쪽에서는 비교적 불안정하여 pH 8.0에서 48시간 처리시 77의 활성을 소실하였다. 이 물질은 26개의 아미노산 잔기를 이루고 있었다.

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이온교환 칼럼 크로마토그래피를 이용한 난백에서 Lysozyme의 연속추출 (Continuous Separation of Lysozyme from Egg White by Ion Exchange Column Chromatography)

  • 박성준;김현석;김현위;안태회;박기문;최춘언
    • 한국식품과학회지
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    • 제22권6호
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    • pp.711-715
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    • 1990
  • 식품 및 의약품 원료로 이용되고 있는 Iysozyme을 난백으로부터 이온교환 크로마토그래프를 이용하여 연속추출하였다. 사용된 수지는 지금까지 수율, 순도, 작동용이성에서 가장 효과적이라고 밝혀져 있는 Duolite C-464 양이온교환수지를 선택하여 $Na^+$형으로 $pH\;7.9{\pm}0.1$로 평형화하여 사용하였다. 조제용 자동 Liquid Chromatography(LC) system(column size ; i.d. 50 mm, bed volumn ; 1020 ml)에서 수지 평형화, 난백접촉, rinse, lysozyme용출 순으로 cycle을 연속적으로 반복하면서 시행하고 그 재현성을 관찰하기 위해 각 cycle별 rinse끝점과 용출끝점의 UV level을 비교하였다. 그 결과 rinse끝점은 19 cycle까지 30% 이하를 유지하였다. 용출 끝점은 17 cycle까지는 30% 이하에서 비교적 안정하였으나 18 cycle 이후 부터는 50% 이상으로 용출능력이 현저하게 감소하였다. 또한, 회수율 비교에서 17cycle까지는 90% 이상을 유지하다가 18cycle에서는 72%, 19 cycle에서는 65%로 격감하였다. 본 추출 정제 lysozyme은 전기영동상 단일 band로 나타났고, densitometer로 측정한 순도는 99% 이상이었다.

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Separation of Lithium Isotopes by Tetraazamacrocycles Tethered to Merrifield Peptide Resin

  • Jeon, Youn-Seok;Jang, Nak-Han;Kang, Byung-Moo;Jeon, Young-Shin;Kim, Chang-Suk;Choi, Ki-Young;Ryu, Hai-Il
    • Bulletin of the Korean Chemical Society
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    • 제28권3호
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    • pp.451-456
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    • 2007
  • Tetraazamacrocyclic ion exchangers tethered to Merrifield peptide resin (DTDM, TTTM) were prepared and the ion exchange capacity of these was characterized. The isotope separation of lithium was determined using breakthrough method of column chromatography. The isotope separation coefficient was strongly dependent on the ligand structure by Glueckauf's theory. We found that the isotope separation coefficients were increased as the values of distribution coefficients were increased. In this experiment the lighter isotope, 6Li was enriched in the resin phase, while the heavier isotope, 7Li in the solution phase. The ion radius of lighter isotope, 6Li was shorter than the heavier isotope, 7Li. The hydration number of lithium ion with the same charge became small as mass number was decreased. Because 6Li was more strongly retained in the resin than 7Li, the isotopes of lithium were separated with subsequent enrichment in the resin phase.

테트라아자 거대고리화합물(TDM, TPM)을 이용한 마그네슘동위원소의 분리에 관한 연구 (The Separation of Magnesium Isotopes by Tetraazamacrocycles Tethered to Merrifield Peptide Resin(TDM, TPM))

  • 전윤석;류해일
    • 한국산학기술학회논문지
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    • 제12권10호
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    • pp.4696-4703
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    • 2011
  • 본 연구에서는 메리필드펩타이드 수지가 치환된 테트라아자거대고리 화합물인 1,4,8,11-tetraazacyclotetradecane bonded Merrifield peptide resin(TDM)과 1,4,8,12-tetraazacyclopentadecane bonded Merrifield peptide resin(TPM)을 합성 하였다. 합성된 이온교환수지의 이온교환용량을 측정하였고, 또한 여러 농도의 염화암모늄용액에서 마그네슘이온의 분포계수를 측정하였다. 새롭게 합성한 테트라아자거대고리 화합물(TDM, TPM)을 가지고 컬럼크로마토그래피법을 이용하여 마그네슘 동위원소를 분리하고 그 효용성을 논의하였다.

결정화 반응이 결합된 글루탐산의 이온교환 (Ion Exchange of Glutamic Acid Coupled with Crystallization)

  • 이기세
    • KSBB Journal
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    • 제11권5호
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    • pp.606-612
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    • 1996
  • H형 Dowex 50W-X8 강산성 양이온 교환수지 결럼을 이용하여 glutamic acid를 치환전개하면셔 displacer의 농도를 증가시켜 인위적으로 결정화를 유도하였다. Displacer로 사용한 NaOH 놓도를 증 가시킴으로써 glutamic acid가 그 용해도 한계 이상 으로 농축되면서 컬럼내에서 이동도중 결정층이 형 성되었고 생성된 결정은 effluent stream을 따라 fraction collector로 회수되어졌다. 결정충이 이동하는 동안 clogging이나 압력강하의 문제점이 발생 하지 않았으며 1.0 M NaOH를 사용할 때 62% 의 glutamic acid가 결정으로 회수되었다. 수지로부터 치환되 어 나오는 $H^+$에 의한 OH 의 중화작용으로 인해 NaCI 보다는 NaOH가 효과적인 displacer임 을 알 수 있었으며 보다 sharp하고 농축된 band를 얻을 수 있었다 Glutamic acid 결정층의 이동속도 는 displacer 이통속도와 통일하였는데 그 이유는 결정이 이동하는 기작이 고정상의 interstitial fluid를 따라 이통하는 것이 아니라 일정한 두께의 결정층이 형성된 뒤에 앞경계변에셔는 계속 새로운 결정화가, 그리고 뒷경계변에서는 기존결정의 재용해가 일어나 면서 컬럼을 이동하는 것이며 또한 이 결정화 속도 와 재용해 속도가 비슷하게 균형을 이루고 있기 때 문이라고 설명할 수 있다. 이와 같은 이온교환중의 결정화 현상은 수지에 대한 선택도와 함께 용해도라 는 부가적 분리 인자를 통시에 사용함으로써 특정성 분의 분리효율을 높일 수 있으며 이온교환 후 추가 로 거쳐야 할 결정화 콩정의 부담을 줄일 수 있을 것이다. 결정화-재용해가 비슷한 속도로 반복되는 이통결정층이 형성된다는 관찰은 본 실험에서 사용 된 glutamic acid에만 적용할 수 있는 특이한 현상 일 수 있으며 aspartic acid 등 다른 저용해도 아미 노산에도 일반화할 수 있는 현상인지를 밝허가 위해 서는 보충 연구가 펄요하다. 더우기 이러한 결정화 현상은 단순히 용질의 용해도와 displacer 농도뿐만 아니라 pH, ionic strength, 사용하는 수지의 가교 도, mobile phase의 유속, 사용하는 컬럼의 제원에 도 영향을 받을 것이라고 사료되므로 결정회수율을 극대화하기 위한 최적조건의 도출 빛 그 적용범위의 확대에 대한 연구가 필요하다.

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