lntergeneric hybrids formed between Aspergillus niger and Penicillium verruculosum were obtained by nuclear transfer technique. Nuclei isolated from wild type and auxotrophic mutants of donor strains were transferred into the protoplasts of different auxotrophic mutants as recipient strains. Several auxotrophic mutants were isolated from conidiospores of the two strains mutagenized with ultraviolet and N-methyl-N'-nitrosoguanidine. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Frequencies of intergeneric hybrid formation by nuclear transfer were $7{\times}10^{5}~1{\times}10^{5}$. From observations of genetic stability. DNA content. nuclear stain and conidial size. it was suggested that their karyotypes are aneuploid. In addition. the hybrids possess the 1.1~2.3-fold higher cellulase activities than those of parental strains. It was also revealed that some hybrids had different isozyme patterns compared to those of parental strains by CMCase and $\beta$-glucosidase activity assays.
New winter wheat winter barley hybrids were produced (Mv9 kr1 Igri, Mv9 kr1 Osnova, Asakazekomugi Manas). The wheat-barley hybrids showed entire male sterility and were multiplied in tissue culture. Chromosome configurations were studied with GISH in meiosis in the Mv9 krl x Igri hybrid and in its progenies multiplied in vitro. Chromosome pairing between wheat and barley has been observed in some cells in the hybrids multiplied in vitro. Backcross plants with 43 and 44 chromosomes were selected with the aim of developing new wheat-barley addition lines. Wheat-barley translocations were demonstrated with GISH in backcross progenies originating from in vitro regenerated wheat (Triticum aestivum L. cv. Chinese Spring) x barley (Hordeum vulgare L. cv. Betzes) hybrids. Five different translocations were observed. Sequential N-banding and GISH analyses were performed to further identify the translocations. The N-banding pattern of the Robertsonian translocation suggests that this chromosome consists of the short arm of barley chromosome 4H translocated to the long arm of 2B of wheat. Plants with four different homozygous translocations were selected from the following BC2F3 generation.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.11
no.1
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pp.1-5
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1991
Tall fescue(Festuca amndinacea Schreb.) is a productive pasture grass that is widely adapted to the soil and climate of Korea. It is regarded, however, as relatively low in palatability and nutritive value. On the other hand, Italian ryegrass(lo1ium rnultz$om Lam.) is highly nutritious and palatable, but is essentially weak in cold tolerance. Numerous investigators have succeeded in producing hybrids between Lolium spp. and Festuca spp. but no improved varieties have resulted. Therefore, intergeneric hybridization of Italian ryegrass with tall fescue is employed in 1984 to improve the adaptive and cold resistance quality of Italian ryegrass. In the mean time, F1-hybrid plants obtained by crossing Italian ryegrass x tall fescue were observed in open field. The results are summarized as follows: 1. Leaf-size and silica cell hair were intermediate between the types of parents but the shape of auricle tended to show Italian ryegrass and auricle-cilia to show tall fescue. 2. Roots of $F_1$-hybrid plants were mainly distributed at top soil and did not produced florescence material. 3. Head type of hybrids was intermediate between the types of parents but ray length was somewhat less than the length of tall fescue ray. Typical Italian ryegrass or tall fescue-like phenotypes were not observed. 4. Anthers of $F_1$-hybrid plants were formed but pollen were not formed. Even though pollen were formed, they were all empty. 5. Hybrid plants were more winterhardy and summer persistency than Italian ryegrass. They showed a equivalent growth to Italian ryegrass in spring and to tall fescue in summer. 6. Chromosome of $F_1$-hybrids was allopolyploid(2n=4~=28) and all $F_1$-hybrid plants were sterile.
Two individuals of intergeneric hybrids in the crossing of Brassica pekinensis ♀$\times$Raphanus sativus ♂ were obtained, and among the three kinds of plants, Brassica, Raphanus, and F1, comparison on the mega- and microsporogenesis, megagammetophyte formation, and morphological changes in the developing sporangia, etc., were made. Differences between Brassica and Raphanus were observed in the shape of mega- and microsporangia, their changes in development, and the formation of megagametophyte. Sporangia of the F1 plants, until pre-meiotic stage, show intermediate, maternal, paternal, or vigorous inclination, and the difference of these characteristics when compared with those of the parent is slight. Meiotic irregularity resulted from the intergeneric hybridity of F1 plant gives rise to the abnormal mega- and microspore and accompanied abortive female and male gametophytes, bringing about the remarkable differences from its parent in the morphological changes of the developing mega- and microsporangia.
xBrassicoraphanus line BB#5, a new synthetic intergeneric hybrid between Brassica rapa L. ssp. pekinensis and Raphanus sativus L. var. rafiphera induced by N-methyl-N-nitroso-urethane mutagenesis in microspore culture, shows high seed fertility and morphological uniformity. Dual-color fluorescence in situ hybridization (FISH) using 5S and 45S rDNA probes and genomic in situ hybridization (GISH) using B. rapa genomic DNA probe were carried out to analyze the chromosome composition and the meiosis pairing pattern compared to its parental lines. The somatic chromosome complement is 2n = 38, which consists of 17 metacentric and two submetacentric chromosomes with lengths of 2.18 to $5.01{\mu}m$. FISH karyotype analysis showed five and eight pairs of 5S and 45S rDNA loci. GISH meiosis pairing analysis showed that 19 complete bivalents were most frequent and accounted for 42% of the 100 pollen mother cells examined. Based on chromosome number, size, morphology, rDNA distribution, and meiosis pairing pattern, both parental genomes of B. rapa and R. sativus appear to exist in xBrassicoraphanus line BB#5, demonstrating its genome integrity. Such stable chromosome constitutions and meiotic pairing patterns in somatic and meiotic cells are very rare in natural and synthetic intergeneric hybrids. Chromosomal studies and genetic and phenotypic changes in allopolyploids a re discussed. The results p resented h erein will b e usef ul f or f urther g enomic s tudy o f xBrassicoraphanus lines and their improvement as promising new breeding varieties.
Interspecific hybrids between Aspergillus niger and Penicillium notatum (Tyr-), hyperlipolytic enzyme-producing fungi, were obtained by nuclear transfer technique. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Maximum production of protoplasts was obtained by 1% Novozyme 234 at $30^{\circ}C$ for 3 hrs and the most effective osmotic stabilizers for the isolation of protoplasts were 0.6 M KCl. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were $3.8{\times}10^{-3}{\sim}1.3{\times}10^{-3}$. From the observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear stain, it was suggested that their karyotypes are aneuploid. The hybrids showed $1.2{\sim}1.7$ fold higher lipase activities than parental strains. It was strongly supported by results of this study that nuclear transfer technique is much more efficient in the formation of intergeneric hybrids than protoplast fusion and is very useful for the improvement of strains.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.8
no.2
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pp.123-127
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1988
Even though grass species are one of major importance in livestock industry, the response of intergeneric hybridization of Lolium and Festuca and interspecific hybridization of Lolium m.X Lolium p. to Korean climatic condition has not been adequately documented. This reasearch was conducted to examine the growth characteristics and dry matter yield of Festulolium, cv. Felopa and C-Stamm N 66 and hybrid ryegrass, cv. Maja and Tetilelite. 1. The early growth of Italian ryegrass was better than that of hybrid ryegrass and Festulolium. The plant length and height of Italian ryegrass were longer/taller than those of hybrid ryegrass and Festulolium, but the number of tillers of Italian ryegrass was less than that of hybrid ryegrass and Festulolium. 2. Festuloliu and hybrid ryegrass were more tolerant than Italian ryegrass to winter killing, 70-80% of tillers was survived. 3. After wintering, early spring growth of hybrid ryegrass and Festulolium were better than that of Italian ryegrass. Dry matter yield of hybrid ryegrass and Festulolium were more than that of Italian ryegrass. 4. Spikes of hybrid ryegrass and Festulolium (C-Stamm N66) were more than those of Italian ryegrass. Seed yield per $m^2$ of hybrid ryegrass and Italian ryegrass were almost same, but that of Festuloliu was lower.
Intergeneric crosses over 34 cross combinations between genus Brassica and Raphanus were made. Ovules taken out of crossed were cultured on MS media supplemented with 1.0 mg/L GA and BA. Germination of embryo from ovule culture was not influenced by BA and GA in medium but by parental characters in its cross combination. Use of Raphanus sativus cv. Daibyosobudore and Jungkukcheongpi showed low embryo germination when they were used as male part. Cross combination with Brassica juncea as male parent showed slightly increased germination compared to other cross. These results indicated that embryo germination in ovule culture was not much influenced by casein hydrolysate, malt extract, BA, kinetin and glutamine in the medium, but parents in combination were key factor for increasing embryo germination.
Interspecific hybrids between Aspergillus oryzae var oryzae and A. nidulans 514 were obtained by nuclear transfer technique. Several autotrophic mutants isolated from conidiospores of the two strains were mutagenized with ultraviolet and N-methyl-N-nitrosoguanidine. Optimal conditions for formation of intergeneric hybrids were investigated. Frequencies of hybrid formation by nuclear transfer were $3{\times}10^{-5}{\sim}1{\times}10^{-5}$. From observation of genetic stability, conidial size, DNA content, and nuclear stain, it was suggested that their karyptypes are aneuploid. The hybrids showed 1.1~1.4 fold higher xylanase activities than parental strains did. The xylanase of Aspergiilus sp. TAVD514-3 was purified and some of it's enzymatc characteristics were investigated. The enzyme was purified about 85 fold with an overall yield of 17% from the culture medium by ammonium sulfate fractionation, Sephadex G-75 gel permeation chromatography, and CM-sephadex A-50 ion exchange chromatography. The purified enzyme functions optimally at pH 9.0 and 80$^{\circ}C$. The enzymatic activity was increased by the presence of $Mg^{2+}$ and $Mn^2$ ions.
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