Determination of Aconitum alkaloids in processed Buza (Cho-0, Salted Buza, Moist-heating Buza, Limed Buza), which had been prepared from the raw tubers of Aconitum chiisanenseb(Ranunculaceae), was established using visible spectrophotometry and high-performance liquid chromatography (HPLC) method especially for Aconitine analysis. Aconitum alkloids were reacted with tetra- thiocy-anatocobalt[II] complex ion to form a stable ion pair. The reaction product was insoluble in water but freely soluble in several organic solvents. 1.2-Dichloroethane was the best extracting solvent among the examined solvents. Spectrophotometry of Aconitum alkaloids at nax. 625 was carried out. The HPLC method for aconitine was carried out using Radial PAK-CN column with gradient solvent system by solvent mixture of acetonitrile and phosphate buffer (pH 3.0) at 4$0^{\circ}C$ and 254 nm. Linear relationship was found between absorbance response and concentration of aconitine in range of 0.45 mM~0.9 mM ($r^2$=0.9949) by spectrophotometry and 0.3 mM~1.2mM($r^2$=0.9983) by HPLC method. These methods have been found to be suitable and reproducible for routine analysis of Aconitum alkaloids and its pharmaceutical preparations.
Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) have gained worldwide importance and acceptance due to their agricultural benefits. These microorganisms are potential tools for sustainable agriculture, with effects on plant growth, biofertilization, induced systemic resistance, and biocontrol of plant pathogens. In this study, four different Pantoea species were isolated from field soil, and their plant growth-promoting characteristics were studied. Based on 16S rDNA gene sequencing analyses, the se were grouped into Pantoea ananatis, Pantoea citrea, Pantoea dispersa, Pantoea vagans and named as Pa1, Pc1, Pd1, Pv1, respectively. All of these strains have their ability for solubilization of insoluble phosphate depending on pH decrease at the range around pH 5 at 1days after inoculation and production of plant hormone indole acetic acid (IAA) with 85.3±16.3 μg/ml of Pa1, 183.9±16.8 μg/ml of Pc1, 28.8±17.3 μg/ml of Pd1 and 114.1±16.5 μg/ml of Pv1, respectively. Pa1, Pc1 and Pd1 also have high activity for production of gibberellin (GA3) hormone with 331.1±19.2 μg/ml of Pa1, 288.5±16.8 μg/ml of Pc1, 309.2±18.2 μg/ml of Pd1, but Pv1 does not. Furthermore, all these species have significantly promoted the growth of the lettuce seedling plants at the range around 32~37% for fresh weight and 10~15% for shoot length enhancement, so that these microbe could be used as a potential bio-fertilizer agents.
The manure made of chaff and sawdust as litter was collected separately at a cowshed of a livestock farm in Andondg city. The fermentation efficiency of excreta is greatly influenced by the type and characteristics of litter and a factor to be considered for reducing N and P, the causes of eutrophication. Changes in weight with temperature and constituents of sample were examined using TG-DTA and XRF, respectively. NO2-, NO3-, and PO43- ions and NH4+, T-P and T-N eluted from manure by rain were analyzed using ion chromatograph and UV/Vis spectrometry, respectively. As a result, the fermentation efficiency of excreta in sawdust manure is three times higher as compared with chaff manure. The higher the fermentation efficiency, ammonia nitrogen was highly de-nitrogenated and organic phosphorous were also changed into phosphorous ions. Furthermore, phosphorous ions can be removed by transforming insoluble salts such as calcium phosphate (CaHPO4·3H2O) and struvite (NH4MgPO4·6H2O) with addition of Ca and Mg.
Kiyomi tangor(Citus unshiu x sinensis) was stored at 3$\^{C}$ and 85% relative humidity, and the changes in firmness, pectin degrading enzymes activity and other physicochemical properties of citrus fruits during storage were investigated. Decay ratio and weight loss during 180 days’ storage were increased gradually to 13.0% and 12.9%, respectively. Firmness of fruits with 2 mm probe was decreased gradually from 808.7 g-force to 406.4 g-force, and moisture of peel and flesh were decreased from 76.5% to from 89.6% to 87.6% during storage, respectively. Exo-polygalacturonase activity of peel after 150 days’ storage were increased gradually to 558.09 units/100g. Pectin methylesterase activity of peel and flesh were increased from 14.7 units/g to 2.3 units/g, and from 9.4 units/ml to 2.7 units/ml at 150days’ storage, respectively. Endo-polygalacturonase activities were not changed notably during storage. Alcohol-insoluble solid(AIS) of peel was not changed notably. During storage of the fruits water soluble pectin(WSP) of peel and flesh were increased from 474.49 mg/100g to 614.29mg/100g, and from 66.91mg/100g to 92.74mg/100g as wet basis, respectively. Hexameta-phosphate soluble pectin(HMP) of peel were decreased from 405.5mg/100g to 270.43mg/100g, hydochloric acid soluble pectin(HSP) of peel was also decreased from 544.02mg/100g to 412.64mg/100g during storage. Total pectin substance(TPS) of peel and flesh were decreased from 1,424.01mg/100g to 1,297.36mg/100g, and from 165.51mg/100g to 171.54mg/100g, respectively. Composition ratio of pectin was in order of WSP > HSP > HMP.
Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) is a pleiotropic hematspoietic growth factor involved in the development of myeloid cells from bone marrow, and an activator of mature myeloid cells functioning in a variety of antimicrobial and inflammatory responses. Recently, recombinant GM-CSF is increasingly under clinical study for treatment of various diseases including cancer, infectious diseases and hematopoietic diseases as well as for an immune response modulator, In this study, we constructed a recombinant human GM-CSF (rhGM-CSF) expression plasmid with a pelB leader sequence and His. Tag under T7 promoter control. The expression construct was shown to produce a recombinant protein of 20 kDa in the 8M urea preparation, indicating the rhGM-CSF may be expressed as an insoluble inclusion form. The 20 kDa recombinant protein in 8M urea was transformed into the water-so1ub1e form by dialysis against PBS buffer (phosphate buffered saline). The soluble rhGM-CSF protein was shown to stimulate colony formation and cell proliferation in vitro, indicating that the rhGM-CSF could be refolded into its native form to show colony stimulating activity.
PARK CHUNG;CHOI YOON-HO;SHIN HYUN-JIN;POO HARYOUNG;SONG JAE JUN;KIM CHUL-JOONG;SUNG MOON-HEE
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.4
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pp.855-858
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2005
The bioavailability of Ca is currently one of the most important topics in nutrition research and is correlated with gastrointestinal solubility. Thus, to increase the solubility of calcium, this study was undertaken to examine the effect of $\gamma$-PGA on intestinal Ca solubility. The calcium solubility increased when the amount of $\gamma$-PGA was increased, due to the inhibition of the formation of an insoluble Ca complex with phosphate. Therefore, when $\gamma$-PGA-500 (avg. MW 5,000 kDa) was added at 0.5 mg/ml, $75\%$ of the total Ca was soluble. The amount of soluble Ca uptake in the small intestine was investigated using Balb/c mice as an animal model system. The soluble Ca uptake in the mice orally administered with $\gamma$-PGA-500 (avg. MW 5,000 kDa) was significantly higher than that in the $\gamma$-PGA-l00 (avg. MW 1,000 kDa)-administered mice (P<0.05). Accordingly, these results strongly support the notion that the molecular size of $\gamma$-PGA is correlated with Ca solubility. The effects of other factors, such as casein phosphopeptide and vitamin D, on intestinal Ca absorption have also previously been investigated. Therefore, it is hoped that the present observations will help clarify the role of $\gamma$-PGA in Ca solubility and its industrial application as an additive.
To develop eco-friendly microbial inoculants, siderophore-producing bacteria were isolated and identified, and their production characteristics and plant growth-promoting abilities were investigated. A strain S21 was isolated from rhizosphere of Korean perilla (Perilla frutescens) and identified as Enterobacter amnigenus by phenotypic properties and 16S rRNA gene sequencing. The highest siderophore production was obtained in a medium containing 0.5% fructose, 0.1% urea, 0.5% K2HPO4 and 0.1% succinic acid. By using this improved medium, siderophore production increased by 2.5 times compared to that of basal medium. The strain S21 showed insoluble phosphate solubilizing, ammonification and antifungal activities, and also produced hydrolytic enzymes (protease and lipase), indoleacetic acid and 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase. Our data suggest that E. amnigenus S21 is a potential candidate that can be used as eco-friendly biocontrol agent and biofertilizer.
Han, Joon-Hee;Shim, Hongsik;Shin, Jong-Hwan;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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v.31
no.2
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pp.165-175
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2015
Anthracnose is a fungal disease caused by Colletotrichum species that is detrimental to numerous plant species. Anthracnose control with fungicides has both human health and environmental safety implications. Despite increasing public concerns, fungicide use will continue in the absence of viable alternatives. There have been relatively less efforts to search antagonistic bacteria from mudflats harboring microbial diversity. A total of 420 bacterial strains were isolated from mudflats near the western sea of South Korea. Five bacterial strains, LB01, LB14, HM03, HM17, and LB15, were characterized as having antifungal properties in the presence of C. acutatum and C. gloeosporioides. The three Bacillus atrophaeus strains, LB14, HM03, and HM17, produced large quantities of chitinase and protease enzymes, whereas the B. amyloliquefaciens strain LB01 produced protease and cellulase enzymes. Two important antagonistic traits, siderophore production and solubilization of insoluble phosphate, were observed in the three B. atrophaeus strains. Analyses of disease suppression revealed that LB14 was most effective for suppressing the incidence of anthracnose symptoms on pepper fruits. LB14 produced antagonistic compounds and suppressed conidial germination of C. acutatum and C. gloeosporioides. The results from the present study will provide a basis for developing a reliable alternative to fungicides for anthracnose control.
Sopheareth, Mao;Chan, Sarun;Naing, Kyaw Wai;Lee, Yong Seong;Hyun, Hae Nam;Kim, Young Cheol;Kim, Kil Yong
The Plant Pathology Journal
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v.29
no.1
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pp.67-76
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2013
A chitinolytic bacterial strain having strong antifungal activity was isolated and identified as Burkholderia cepacia MPC-7 based on 16S rRNA gene analysis. MPC-7 solubilized insoluble phosphorous in hydroxyapatite agar media. It produced gluconic acid and 2-keto-gluconic acid related to the decrease in pH of broth culture. The antagonist produced benzoic acid (BA) and phenylacetic acid (PA). The authentic compounds, BA and PA, showed a broad spectrum of antimicrobial activity against yeast, several bacterial and fungal pathogens in vitro. To demonstrate the biocontrol efficiency of MPC-7 on late blight disease caused by Phyto-phthora capsici, pepper plants in pot trials were treated with modified medium only (M), M plus zoospore inoculation (MP), MPC-7 cultured broth (B) and B plus zoospore inoculation (BP). With the sudden increase in root mortality, plants in MP wilted as early as five days after pathogen inoculation. However, plant in BP did not show any symptom of wilting until five days. Root mortality in BP was markedly reduced for as much as 50%. Plants in B had higher dry weight, P concentration in root, and larger leaf area compared to those in M and MP. These results suggested that B. cepacia MPC-7 should be considered as a candidate for the biological fertilizer as well as antimicrobial agent for pepper plants.
Kim, Young-Sook;Lee, Myeong-Seok;Yeom, Ji-Hee;Song, Ja-Gyeong;Lee, In-Kyoung;Yun, Bong-Sik
The Korean Journal of Mycology
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v.39
no.2
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pp.126-130
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2011
In the course of search for multifunctional microbial inoculants, three Bacillus strains (BS11-1,BS11-2,BS11-3) with biological control and biofertilizing effects were selected. In this study, their ability for solubilization of insoluble phosphate, production of indole-3-acetic acid (IAA), siderophore, and hydrolytic enzymes, and antagonism against phytopathogenic fungi were estimated. All strains produced IAA and siderophore depending on culture time and produced a visible clear zone on agar plate containing 0.5% carboxylmethyl cellulose as a carbon source. Also, these strains exhibited antifungal activities against phytopathogenic fungi, Botrytis cinerea, Cylindrocarpon destructans, Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, and Phytophthora capsici.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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