We purified enolase from Candida albicans KNIH10 strain which was isolated from a clinical specimen in Korea. The purified enolase was used to detect anti-Candida antibodies in sera of patients with invasive candidiasis. For purification of enolase from the crude extract prepared by French pressure at 20,000 PSI, the fast performance liquid chromatography (FPLC) using DEAE-sepharose column was used. The elutes at $0.3{\sim}0.4\;M$ NaCl in FPLC was purified with homogenity in SDS-PAGE and its enzymatic activity was confirmed in sera of invasive candidiasis with candidemia patient by immunoblotting. The purified enolase indicated no signal (100% specificity) in 40 normal human sera and 75% (6/8) sensitivity in sera of candidemic patients with suspicious invasive candidiasis by immunoblotting.
Interferon regulatory factor 3 (IRF3) integrates both immunological and non-immunological inputs to control cell survival and death. Small GTPases are versatile functional switches that lie on the very upstream in signal transduction pathways, of which duration of activation is very transient. The large number of homologous proteins and the requirement for site-directed mutagenesis have hindered attempts to investigate the link between small GTPases and IRF3. Here, we constructed a constitutively active mutant expression library for small GTPase expression using Gibson assembly cloning. Small-scale screening identified multiple GTPases capable of promoting IRF3 phosphorylation. Intriguingly, 27 of 152 GTPases, including ARF1, RHEB, RHEBL1, and RAN, were found to increase IRF3 phosphorylation. Unbiased screening enabled us to investigate the sequence-activity relationship between the GTPases and IRF3. We found that the regulation of IRF3 by small GTPases was dependent on TBK1. Our work reveals the significant contribution of GTPases in IRF3 signaling and the potential role of IRF3 in GTPase function, providing a novel therapeutic approach against diseases with GTPase overexpression or active mutations, such as cancer.
암 환자를 대상으로 방사선 치료빈도가 높아짐에 따라 다양한 작용 기전을 바탕으로 한 방사선 방어제 개발에 많은 노력을 경주하고 있다. 본 연구에서는 조혈, 면역세포의 증식과 다양한 싸이토카인의 분비를 증가시킴으로써 방사선 방어효능이 보고된 바 있는 인삼 다당체를 대상으로 화학적 구성성분과 각종 면역활성 지표 및 방사선 방어효능을 확인하고 가장 상관관계가 좋은 인자를 추출해내고자 하였다. 면역학적 활성으로는 임파구 증식능, 대식세포의 산화질소 분비능, AK세포 활성능을 검사하였으며 방사선 방어효과는 endogenous colony-forming unit(e-CFU)로 측정하였다. 인삼으로부터 추출된 다당체의 구성성분 중 galactose함량이 증가할수록 면역증강작용이 우수하였으며 임파구 증식능이 방사선 방어효과와 밀접한 관계가 있는 것으로 나타났다.
벼 품종별 발아 전후의 70% 에탄올 추출물에 대한 항산화성분(폴리페놀, 플라보노이드), 항산화 활성(ABTS 라디칼 소거능, DPPH 라디칼 소거능, 환원력), 항암활성 및 면역활성을 비교 분석하여 기능적 가치를 평가함으로써 이용 가능성을 살펴보고자 하였다. 그 결과 총 폴리페놀 함량은 발아 전후 상관없이 홍진주벼에서 각각 $5,600.44\;{\mu}g$ GAE/g sample과 $4,599.52\;{\mu}g$ GAE/g sample로 가장 높게 측정되었으며 총 플라보노이드 함량은 유색미인 홍진주벼에서 $1,841.17\;{\mu}g$ GAE/g sample(현미), $1,296.77\;{\mu}g$ CA/g sample(발아현미)에서 높게 나타났다. ${\gamma}$-Oryzanol 함량은 홍진주벼에서 $643.14\;{\mu}g/g$ sample로서 가장 높게 측정되었다. 품종별 발아 전후의 70% 에탄올 추출물에 대한 ABTS 라디칼 소거능, DPPH 라디칼 소거능, 환원력은 1 mg/mL의 농도에서 측정한 결과 유색미인 홍진주벼와 흑광벼의 현미에서 높은 활성을 나타내었다. 70% 에탄올 추출물에 대한 in vitro 항암활성을 측정한 결과 대장암 세포보다는 유방암 세포에서 더 강한 암세포 억제능을 관찰할 수 있었으며 발아현미보다 일반현미에서 다소 나은 결과를 나타내었다. 또한 $500\;{\mu}g$/mL의 농도에서 면역활성을 측정한 결과 유색미인 홍진주벼에서 발아 전후 상관없이 조사되어진 다른 품종들보다 높은 활성을 보였다.
EBV-transformed lymphoblastoid cell lines (LCLs) are used as a resource for human genetic, immunological, and pharmacogenomic studies. We investigated the biological activity of 20 LCL strains during continuous long-term subculture up to a passage number of 160. Out of 20 LCL strains, 17 proliferated up to a passage number of 160, at which point LCLs are generally considered as "immortalized". The other three LCL strains lost the ability to proliferate at an average passage number of 41, during which these LCLs may have undergone cellular crisis. These non-immortal LCL strains exhibited no telomerase activity, decreased EBV gene expression, and a lower copy number of the EBV genome and mitochondrial DNA when compared with immortal LCLs. Thus, this study suggests that sustained EBV viral activity as well as telomerase activity may be required for complete LCL immortalization.
Objectives : This study was carried out to enhance the activity of Iksuyoungjingo, which has the tonify Qi, nourish Yin effect of oriental medicine, and to study the effect of the prescriptions on the immunological activities. Methods : Immunosuppression was induced by methotrexate (MTX) 2 mg / kg, the experimental group was divided into IYGgami-I, IYGgami-I-F, IYGgami-II and IYGgami-II-F groups. Each prescription was administered with drinking water for 20 days, and body weight was measured every 5 days during this period. Leukocyte, $TNF-{\alpha}$, IL-2, IL-6, IgE, spleen weight and body weight were measured Results : In the changes of $TNF-{\alpha}$, IL-2 and IL-6 as pro-inflammatory elements, all of the experimental groups showed a significant increase compared to the control group. In the IgE changes, the IYGgami-I-F, IYGgami-II and IYGgami-II-F groups showed a significant decrease compared to the control group. In the changes of spleen weight, the IYGgami-II-F group showed a significant increase compared to the control group. In the changes of WBC and lymphocytes, the IYGgami-I-F group showed a significant increase compared to the control group. Conclusions : From the above results, it can be observed that the efficacy against immunity is exerted in all of the preparations, and it was confirmed that the efficacy was maintained constant even when utilizing the Rehmannia glutinosa Residue and Poria cocos Bark, and that a more beneficial effect can be exerted in the effectiveness when the fermentation is carried out.
수산물 폐기물을 이용하기 위하여 대롱 새우껍질에서 추출하여 만든 키토산을 마우스에 이식한 sarcoma 180을 이용하여 in vivo와 in vitro에서 항암 효과 및 면역기능에 미치는 영향에 대하여 실험하였다. 키토산의 sarcoma-180에 대한 고형암 성장 저지율을 40mg/kg투여시 63.84%의 저지율을 나타내었다. 수명 연장효과는 대조군에 비하여 키토산을 40mg/kg 투여하였을 때 26.84%로 그다지 높지 않았다. In vivo에서의 항암효과를 근거로 하여 in vitro에서는 sarco-ma-180에 대한 직접적인 세포의 독성 작용은 거의 없었다. 키토산은 30mg/kg과 40mg/kg을 투여시 혈중 백혈구수와 총복강세포수가 대조군에 비하여 다소 증가 하였고 장기인 간, 비장 및 흉선의 무게도 투여한 용량에 따라 증가하는 용량 의존성 반응을 보였다. 항체 유도염증 반응인 항체매개형 과민반응과 지연형 과민반응은 족척의 두께가 키토산에 의해 거의 정상 수준까지 회복되었다. Macrophage의 식작용에 미치는 영향은 phagocytic index 와 corrected phagocytic index에서 거의 차이가 없었고, 용혈성 반응 세포수(plaque forming cell, PFC)는 대조군에 비하여 PFC/$10^{7}$ spleen의 경우 18.88%와 31.83%로 다소 증가하였다.
Carrageena은 전세계적으로 안전한 식품첨가물로 승인되어 오랜 기간 다양한 식품, 기타 가공품에 사용되어지고 있다. 다른 한편으로, 이 Carrageenan은 동물 실험에서 염증 유도 물질로 확인되어 염증 유발 실험에 현재까지도 매우 빈번히 사용 되고 있다. 또한 이 Carrageenan을 고온과 강산에서 처리하여 부분적으로 분해한 degraded Carrageenan은 염증 유도 능이 Carrageenan 보다 더 강한 것으로 알려져 있다. 면역 보강제의 중요한 특성 가운데 하나는 선천면역(대표적으로 염증반응)의 활성화 인 것이 잘 알려져 있다. 그러나 현재까지 Carrageenan이나 degraded Carrageenan의 면역 보강제로서의 효과에 관하여 상세한 비교 연구는 수행되어 지지 않았다. 본 연구의 목적은 Carrageenan과 degraded Carrageenan의 면역 보강제로서의 효과를 비교 분석하는데 있다. 실험 동물은 마우스를 사용하였으며, 난 알부민을 항원으로, 피하면역을 수행하여 각각의 면역 보강제 효과를 항체 형성 정도로 조사하였다. Carrageenan이나 degraded Carrageenan 모두 항원 단독으로 면역한 것과 비교할 때 유의적으로 높은 IgG 생성 능을 보였다. 추가적으로 항원 특이적 IgG1과 IgG2a를 조사한 결과, 이들 Carrageenan, degraded Carrageenan은 본 실험에서 양성 대조 군으로 사용한 보강제, Complete Freund's adjuvant와 비교 할 때 IgG2a 보다는 IgG1 생성 능이 높게 유도되는 것이 확인되었다. 이들 결과를 종합하면 염증 유발 능이 보다 강한 degraded carrageenan의 면역 보강제 효과는 carrageenan과 유사한 정도로 확인되었으며, 이들 모두 IgG2 보다는 IgG1 생성 효과가 강한 것으로 나타났다.
In order to investigate the effect of Naetakchungumsankamibang(NTCGS) water extract on the skin tumor induced by 3-MCA and immunological responses in mice, the cytotoxicity against SK-MEL-2 cells and total number of tumors induced by 3-MCA were measured. The numbers of WBC, platelets and RBC, plaque forming cells, hemagglutinin titer, hemolysis titer, carbon clearance, proliferation of splenocyte by thymidine uptake assay, splenic leukocyte by FACS analysis and $TNF-{\alpha}$ were also measured for the evaluation of the immunological responses. The results were obtained as follows: 1. In cytotoxicity against SK-MEL-2 cells, concentration inhibiting cell growth up to below $20\%$ of control was recognized at 1mg/ml of NTCGS. 2. In Inhibitory effect on the skin tumor induced by 3-MCA, the results showed a strong inhibitory effect of NTCGS. 3. In hematological changes in the tumor bearing mice, the numbers of WBC decreased significantly in NTCGS treated group as compared with control. 4. In hematological changes in the tumor bearing mice, the numbers of platelets increased significantly in NTCGS treated group as compared with control. 5. In hematological changes in the tumor bearing mice, the numbers of RBC increased with no significance in NTCGS treated group as compared with control. 6. Effects of the plaque forming cells in the tumor bearing mice, NTCGS treated group exhibited a significant effect compared with control. 7. In terms of the effects on hemagglutinin titer, NTCGS treated group showed higher level than control, without significance. 8. In terms of the effects on hemolysis titer, NTCGS treated group showed higher level than control, without significance. 9. In terms of the effects on phagocytic index K in Balb/C mice, NTCGS treated group showed significant difference from control. 10. In terms of the effects on proliferation of splenocyte by thymidine uptake assay, NTCGS showed significant effect at the concentration of 0.5mg/ml. 11. In terms of the effects on splenic leukocyte of Balb/C mice by FACS analysis, NTCGS treated group showed significantly higher level of helper T cell, B cell and macrophage than in control. 12. In terms of the effects on the secretion of $TNF-{\alpha}$, the treated group showed significant effect at the concentration of 1mg/ml of NTCGS. Based on the results summarized above, NTCGS is considered to have antitumor activity and immunological responses against skin tumor, and to be usable fur the treatment.
The purpose of this study is to investigate the effect of water extract from Artemisiae Argi Folium (WAAF) on hydrogen peroxide production within mouse macrophage Raw 264.7 Cells treated with gallic acid, EtOH, LPS, and acetaminophen. WAAF (0${\sim}$400 ug/mL) was treated with gallic acid, EtOH, LPS, acetaminophen. And the intracellular productions of hydrogen peroxide were measured by dihydrorhodamine 123 (DHR) assay. WAAF showed the restoration of the intracellular productions of hydrogen peroxide which were reduced by gallic acid, EtOH, LPS, and acetaminophen in Raw 264.7 Cells. WAAF could be supposed to have the immunological activity related with macrophage's oxidative burst.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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