Kim, Nam-Young;Jang, Min-Kyung;Lee, Dong-Geun;Lee, Jae-Hwa;Ha, Jong-Myung;Ha, Bae-Jin;Jang, Jeong-Su;Lee, Sang-Hyeon
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.20
no.5
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pp.1249-1253
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2006
The fractions of Capsosiphon fulvescens were studied to verify the anticancer and immunostimulating activity. The fractions from the ethanol extract of C. fulvescens were prepared by the systematic extraction procedure with the solvents such as hexane, ethyl ether, methanol, butanol and H$_2$O. The cytotoxic effects of C. fulvescens fractions against human leukemia cell line U937, mouse neuroblastoma cell line (NB41A3), human hepatoma cell line (HepG2)and rat glioma cell line (C6) were investigated. Ethyl ether fraction of C. fulvescens showed the highest cytotoxicity against all four cell lines tested. In addition, H$_2$O fraction also showed relatively high cytotoxicity. Dose dependent patterns were observed on all four cell lines. The immune-stimulating effects of C. fulvescens fractions on rat macrophage cell line (RAW 264.7) were also investigated. All five fractions of C. fulvescens extract stimulated NO production with concentration dependant manner. These results suggest that C. fulvescens may be a useful candidate for a natural antitumor and immune-stimulating agent.
1,3-Dioleoyl-2-palmitoylglycerol (OPO)-rich human milk fat substitute (HMFS) was synthesized from tripalmitin (PPP)-rich fraction and oleic ethyl ester by a lipase-catalyzed interesterification. Response surface methodology (RSM) was employed to optimize the presence of palmitic acid at sn-2 position ($Y_1$, %) and of oleic acid at sn-1,3 ($Y_2$, %), with the reaction factors as substrate molar ratio of PPP-rich fraction to oleic ethyl ester ($X_1$, 1:4, 1:5 and 1:6), reaction temperature ($X_2$, 50, 55 and $60^{\circ}C$), and time ($X_3$, 3, 7.5 and 12 h). The optimal conditions for HMFS synthesis were predicted at the reaction combination of $55^{\circ}C$, 3 h and 1:6 substrate ratio. HMFS re-synthesized under the same conditions displayed 70.70% palmitic acid at the sn-2 position and 69.58% oleic acid at the sn-1,3 position. Reaction product was predominantly (90.35%) triacylglycerol (TAG) was observed in which the major TAG species, OPO, comprised 31.24%.
The limitations in current technology for generating transgenic animals, such as the time and the expense, hampered its extensive use in recombinant protein production for therapeutic purpose. In this report, we present a simple and less expensive alternative by directly infusing a recombinant adenovirus vector carrying human lactoferrin cDNA into rabbit mammary glands. The milk serum was collected from the infected mammary gland 48 h post-infection and subjected to a 10% SDS-PAGE and Western blotting. An 80-kDa protein was visualized after viral vector infection. With this method, we obtained a high level of expressed human lactoferrin of up to 2.3mg/ml in the milk. Taken together, the method is useful for the transient high-level expression recombinant proteins, and the approach established here is probably one of the most economical and efficient ways for large-scale production of recombinant proteins of biopharmaceutical interest.
An immunosensor based on surface plasmon resonance (SPR) with enhanced performance was developed through a mixed self-assembled monolayer. A mixture of 16-mercaptohexadecanic acid (16-MHA) and 1-undecanethiol with various molar ratios was self-assembled on gold (Au) surface and the carboxylic acid groups of 16-MHA were then coordinated to Zn ions by exposing the substrate to an ethanolic solution of $Zn(NO_3)_2\cdot 6H_2O$. The antibody was immobilized on the SPR surface by exposing the functionalized substrate to the desired solution of antibody in phosphate-buffered saline (PBS) molecules. The film formation in series was confirmed by SPR and atomic force microscopy (AFM). The functionalized surface was applied to develop an SPR immunosensor for detecting human serum albumin (HSA) and the estimated detection limit (DL) was 4.27 nM. The limit value concentration can be well measured between ill and healthy conditions.
The effect of silver sulfadiazine (SSD) on the proliferation of human dermal fibroblast (HDF) was studied to determine the impact of the drug on the wound healing process and dermal mechanical strength. Human dermal fibroblasts were cultured to 80% confluency using DMEM with 10% FBS and viability of the cell was estimated using neutral red assay. In addition, the $2^{nd}$ degree burn wound was prepared on the anterior part of rabbit ear skin and dressings containing SSD were applied for 96 h. Presence of inflammatory cells and degree of re-epithelialization were investigated in the wound. After 15 day of the induction of burn wounds, the treated area was excised and dermal mechanical strength was quantitatively measured with a constant speed tensiometer. SSD was found to be highly cyto-toxic in cultured HDF cells. The topical application of SSD (2%) could control the infection as evidenced by the lack of accumulation of inflammatory cells in histological evaluation. Therefore, these observations suggested that the impairment of dermal regeneration and decreased mechanical strength of dermal tissue was resulted from the cyto-toxic effect of SSD on dermal cells. Since the decreased mechanical strength may lead to reduction in resilience, toughness and maximum extension of the tissue, the identification of optimum dose for SSD that limits infection while minimizes the cyto-toxic effect may be clinically relevant.
The principal objectives of this study were to analyze the physiochemical properties of four mulberry fruit beverages (MFBs) and develop descriptive analysis procedures for evaluation of their sensory characteristics. Soluble solid, free sugar, pH, acidity, chromaticity, flavonoid, and anthocyanin of MFBs were determined. All MFB samples showed significantly different physicochemical properties ($p$<0.01). Ten highly trained panelists identified the following 11 sensory attributes in the MFBs and defined the terminology for each attribute : turbidity, chromaticity for appearance characteristics, berry, grass, fermented, sweet, astringent, and sour for flavor characteristics, and throat hit, refreshing, and astringent for textural characteristics. There were significant differences in the 10 sensory attributes among the MFB samples ($p$<0.001). In color, the value of MFB3 was significantly higher than those of others ($p$<0.05). In taste and overall acceptance, the values of MFB2 were significantly higher than those of others ($p$<0.01, $p$<0.001). Descriptive terminology of the developed MFBs could explain the sensory attributes of the samples according to this result. Based on this, proper analysis and sensory evaluation techniques could be applied to other fruit beverages to establish their physiochemical characteristic and descriptive sensory attributes.
Kim, Jong-Chul;Yoon, Jang-Won;Kim, Jong-Bae;Oh, Kyung-Hwan;Park, Mi-Sun;Lee, Bok-Kwon;Cho, Seung-Hak
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.20
no.2
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pp.415-424
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2010
The purpose of this study was to investigate the relationship between the global regulatory mechanism known as quorum sensing and expression of virulence factors in Escherichia coli O157:87. A nonpolar luxS deletion was introduced into the chromosome of strain CI03J, a human clinical isolate from South Korea, to create the ${\Delta}luxS$ mutant strain ML03J. Phenotypic characterization of wild-type and mutant strains demonstrated that ML03J had no obvious growth or metabolic defects on 0.2% glucose LB medium, produced a functionally defective flagellum, and could not utilize sorbose; the biological significance of sorbose utilization is unknown. Omics-based analysis revealed the involvement of LuxS in the transcriptional activation of several flagella/chemotaxisrelated genes (flhD; fliA, C, D, S, Z; and cheA, Y, Z), repression of glutamate-dependent acid resistance genes (gadAB), and expression of virulence factors including Shiga toxin, hemolysin, and SepD within the LEE pathogenicity island.
Protein affinity membranes were prepared via coating of chitosan gel on the porous flat and hollow-fiber polysulfone membranes, followed by the immobilization of the reactive dye (Cibacron Blue 3GA) to the chitosan gel. Maximum protein binding capacity of these affinity membranes was about 70 $\mu{g/cm}^2$. Using the affinity flat membrane module, the elution chromatography of human serum albumin (HSA) was performed to determine the optimum condition of eluent buffer. The optimum condition of eluent was the universal buffer solution of 0.06 M concentration containing 1 M KCl at pH 10. For the frontal chromatography of HSA using the flat module, the dynamic protein binding capacity was rapidly decreased from the equilibrium values with increasing flow rate and HSA concentration of the loading solution. However, in the case of hollow-fiber module, the dynamic binding capacity was maintained an equilibrium value without depending on the operating conditions. These results showed that the hollow-fiber module was more effective than the flat module as an affinity chromatography column.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.02a
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pp.20-20
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2011
It has been known that, under certain conditions, application of low-temperature atmospheric-pressure plasmas can enhance proliferation of cells. In this study, conditions for optimal cell proliferation were examined for various cells relevant for orthopaedic applications. Plasmas used in our experiments were generated by dielectric barrier discharge (DBD) with a helium flow (of approximately 3 litter/min) into ambient air at atmospheric pressure by a 10 kV~20 kHz power supply. Such plasmas were directly applied to a medium, in which cells of interest were cultured. The cells examined in this study were human synoviocytes, rat mesenchymal stem cells derived from bone marrow or adipose tissue, a mouse osteoblastic cell line (MC3T3-E1), a mouse embryonic mesenchymal cell line (C3H-10T1/2), human osteosarcoma cells (HOS), a mouse myoblast cell line (C2C12), and rat Schwann cells. Since cell proliferation can be enhanced even if the cells are not directly exposed to plasmas but cultured in a medium that is pre-treated by plasma application, it is surmised that long-life free radicals generated in the medium by plasma application stimulate cell proliferation if their densities are appropriate. The level of free radical generation in the medium was examined by dROMs tests and correlation between cell proliferation and oxidative stress was observed. Other applications of plasma medicine in orthopaedics, such as plasma modification of artificial bones and wound healing effects by direct plasma application for mouse models, will be also discussed. The work has been done in collaboration with Prof. H. Yoshikawa and his group members at the School of Medicine, Osaka University.
Proteomic analysis is helpful in identifying cancerassociated proteins that are differentially expressed and fragmented that can be annotated as dysregulated networks and pathways during metastasis. To examine metastatic process in lung cancer, we performed a proteomics study by label-free quantitative analysis and N-terminal analysis in 2 human non-small-cell lung cancer cell lines with disparate metastatic potentials - NCI-H1703 (primary cell, stage I) and NCI-H1755 (metastatic cell, stage IV). We identified 2130 proteins, 1355 of which were common to both cell lines. In the label-free quantitative analysis, we used the NSAF normalization method, resulting in 242 differential expressed proteins. For the N-terminal proteome analysis, 325 N-terminal peptides, including 45 novel fragments, were identified in the 2 cell lines. Based on two proteomic analysis, 11 quantitatively expressed proteins and 8 N-terminal peptides were enriched for the focal adhesion pathway. Most proteins from the quantitative analysis were upregulated in metastatic cancer cells, whereas novel fragment of CRKL was detected only in primary cancer cells. This study increases our understanding of the NSCLC metastasis proteome.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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