Lectin was isolated from locular fluid of tomato by affinity chromatography using Sephadex G-200, and studied its some biochemical properties. SDS-PAGE of the isolated lectin revealed a tetramer composed of two identical subunits with molecular weights of 39 and 23 kDa. The isolated lectin was agglutinated by trypsin-treated human ABO type blood erythrocytes with similar potency, and the most activity of agglutination was found at B type blood erythrocyte. This lectin showed maximum thermal stability at $70^{\circ}C$, and was relatively stable to heat with the higher activity at $40-80^{\circ}C$. The optimal temperature and pH of this lectin were $50^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively.
This paper argues that news speech entails a distinct intonational pattern from natural speech, effectively reflecting that it primarily focuses on providing new information. We conducted a phonetic experiment to compare the tonal contours between news speech and natural speech, examining the distributions of pitch accents and the overall pitch ranges. We utilized 70 American Press (AP) radio news utterances and 70 natural utterances extracted from TV dramas. Results show that news speech involves 3.38 H*'s (including L+H* and !H*) within an intonational phrase (IP) or intermediate phrase (ip) whereas natural speech, 1.8 in average. The number of IP/ip's per sentence is 3 in news speech, which is shown in the highest rate of 32.07% of the news speech, but it is merely 1, taking up the highest 41.42% in natural speech. Next, declination tends to be prevented in news speech, and the pitch range is much greater in news speech than in natural speech. Finally, a secondary stress syllable is comparatively frequently given a pitch accent in news speech, explicitly distinct from natural speech. These results can be interpreted as stating that news has the particular purpose of providing new information; every content word tends to be given a H* or its related pitch accent like L+H* or !H* because news speech assumes that every word conveys new information. This definitely brings about more IP/ip's per sentence due to a human physiological constraint; that is, more H*'s will cause more respiratory breaks. Also, greater pitch ranges and pitch accents imposed on secondary stress may be attributed to exaggerating new information.
Ras genes are responsible for up to 30% of human tumor mutations and are composed of three isoforms: H-Ras, K-Ras and N-Ras. The post-translational modification of the CAAX motif of the Ras protein is essential in Ras actions. In the present study, we studied the effects of novel farnesyl transferase inhibitors (FTIs), YH3938 and YH3945, on the actions of oncogenic mutants of H-Ras, K-Ras and N-Ras. YH3938 and YH3945 completely reverted the proliferation and morphology of oncogenic H-Ras-transformed Rat2 cells, but not of oncogenic K-Ras-transformed Rat2 cells. Oncogenic N-Ras-transformed Rat2 cells were slightly affected. Activation of SRE promoters by oncogenic H-Ras and N-Ras, but not by K-Ras, were inhibited by treatment with YH3938 and YH3945. Using bandshift analysis, YH3938 suppressed the processing of oncogenic H-Ras and N-Ras, but not that of oncogenic K-Ras protein. YH3945 only inhibited the processing of H-Ras. From these results, we conclude that YH3938 and YH3945 specifically inhibit actions of oncogenic H-Ras through inhibition of its farnesylation, that YH3938 also inhibits N-Ras activity in a dose-dependent manner, and that these drugs have no effect on oncogenic K-Ras activity.
He, Long-Jun;Cai, Mu-Yan;Xu, Guo-Liang;Li, Jian-Jun;Weng, Zi-Jin;Xu, Da-Zhi;Luo, Guang-Yu;Zhu, Sen-Lin;Xie, Dan
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.13
no.7
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pp.3173-3178
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2012
The enhancer of zeste homolog 2 (EZH2) methyl transferase and histone 3 lysine 27 (H3K27me3) protein can repress gene transcription, and their aberrant expression has been observed in various human cancers. This study determined their expression levels in gastric cancer tissues with reference to clinicopathological features and patient survival. We collected 117 gastric cancer and corresponding normal tissues for immunohistochemistry analysis. In gastric cancers, 82/117 (70.1%) were positive for EZH2 and 66/117 (56.4%) for H3K27me3 proteins in contrast to only 5.41% and 7.25% of normal gastric mucosa specimens, respectively. Kaplan-Meier survival data showed the average overall and disease-free survival of EZH2 high expression patients was 25.2 and 20.2 months, respectively, shorter than that with EZH2 low expression (40.5 and 35.9 months). The average overall survival and disease-free survival of high H3K27me3 expression patients was 23.4 and 17.4 months, shorter than without H3K27me3 expression (37.6 and 34.5 months). The average overall survival and disease-free survival of patients with both EZH2 and H3K27me3 expression was 18.8 and 12.9 months, respectively, shorter than that with either alone (34.7 and 31.2 months) or with low levels of both (43.9 and 39.9 months). Multivariate Cox regression analysis showed that H3K27me3 and EZH2 expression, tumor size differentiation and clinical stage were all independent prognostic factors for predicting patient survival. This study demonstrated that detection of both EZH2 and H3K27me3 proteins can predict poor survival of gastric cancer patients, superior to single protein detection. In addition, H3K27me3 and EZH2 protein expression could predict lymph node metastasis.
Objectives: The purpose of this study is to evaluate the effect of ethylene glycol analogs on modulus of elasticity and ultimate tensile strength of moist, demineralized dentin matrix. Methods: Dentin disks 0.5 mrn thick were prepared from mid-coronal dentin of extracted. unerupted, human third molars. 'I' beam and hour-glass shaped specimens were prepared from the disks, the ends protected with nail varnish and the central regions completely demineralized in 0.5M EDTA for 5 days. Ultimate tensile stress (UTS) and low strain modulus of elasticity (E) were determined with specimens immersed for 60 min in distilled water $(H_{2}O)$, ethylene glycol $(HO-CH_{2}-CH_{2}-OH)$, 2-methoxyethanol $(H_{3}CO-CH_{2}-CH_{2}-OH)$, and 1,2-dimethoxyethane $(H_{3}CO-CH_{2}-CH_{3}-OCH_{3})$ prior to testing in those same media. Modulus of elasticity was measured on the same specimens in a repeated measures experimental design. The results were analyzed with a one-way ANOVA on ranks, followed by Dunn's test at ${\alpha}\;=\;0.05$. Regression analysis examined the relationship between UTS or E and hoy's solubility parameter for hydrogen bonding $({\delta}_{h})$ of each solvent. Results: The UTS of demineralized dentin in water, ethylene glycol, 2-methoxyethanol, and 1,2-dimethoxyethane was 24 (3), 30 (5), 37 (6), and 45 (6) MPa, ${\times}$ (SD) N = 10. Low strain E for the same media were 16 (13), 23 (14), 52 (24), and 62 (22) MPa. Regression analysis of UTS vs ${\delta}_{h}$ revealed a significant $(p\;<\;0.0001,\;r\;=\;-0.99,\;R^{2}\;=\;0.98)$ inverse, exponential relationship. A similar inverse relationship was obtained between low strain E vs ${\delta}_{h}\;(p\;<\;0.0005,\;r\;=\;-0.93,\;R^{2}\;=\;0.86)$. Significance: The tensile properties of demineralized dentin are dependent upon the hydrogen bonding ability of polar solvents $({\delta}_{h})$. Solvents with low ${\delta}_{h}$ values may permit new interpeptide H-bonding in collagen that increases its tensile properties. Solvents with high ${\delta}_{h}$ values prevent the development of these new interpeptide H-bonds.
In order to find antiviral effect against Human immunodeficiency virus(HIV), Herpes simplex virus type I(HSV-1) and II(HSV-2) from herb medicines, publicated 29 paters on anti-viral effect of herbal medicines and a convenient virus-induced cytopathic effect (CEP) inhibition assay was introduced. The major virus on experiment are HIV, Hepatitis B virus and HSV-1,2. Those of other studies showed inhibition of infected virus DNA replication and screening test of herbal medicines. More than 15 extractions were prepared by pure water boiling from herbal medicines, and their toxicity of infected cell and anti-viral activities were evaluated. Among them, the major part of herbal medicines showed cell stability compared with the contrast. Cytotoxic concentration (CC) of the $H_2O$ extracts of Padoo against HIV was <4.0, Hyungbangpaedoksan against HIV was 9.3, Whangyonhaedoktang against HIV-1 and HSV-2 was 15.3. These are high level cytotoxic concentration compared with the contrast. But antiviral effect was unable to figure out for selective $index(SI)=CC_{50}/EC_{50}$. The other herbal medicines were unable to showed potent anti-HIV and anti-HSV activity. The antiviral activation using herbs in this thesis have unlimited objects, to select research object will help to show the direction of antiviral drug development that have less side effect and more excellent efficiency.
N,N-dimethyl-D-erythro-sphingosine (DMS) is an N-methyl derivative of sphingosine and an inhibitor of protein kinase C (PKC) and sphingosine kinase (SK). In the present study, we examined the effects of DMS on intracellular $Ca^{2+}$ concentration, pH, and glutamate uptake in human 1321N1 astrocytes. DMS increased intracellular $Ca^{2+}$ concentration and cytosolic pH in a concentration-dependent manner. Pretreatment of the cells with the $G_{i/o}$ protein inhibitor PTX and the PLC inhibitor U73122 had no obvious effect. However, removal of extracellular $Ca^{2+}$ with the $Ca^{2+}$ chelator EGTA or depletion of intracellular $Ca^{2+}$ stores with thapsigargin impeded the DMS-induced increase of intracellular $Ca^{2+}$ concentration. Pretreatment of cells with $NH_4Cl$ or monensin reduced the DMS-induced $Ca^{2+}$ increase. However, inhibition of the DMS-induced $Ca^{2+}$ increase with BAPTA did not influence the DMS-induced pH increase. DMS also inhibited glutamate uptake by the 1321N1 astrocytes in a concentration-dependent manner. It also increased intracellular $Ca^{2+}$ and pH in PC12 neuronal cells. Our observations on the effects of DMS on 1321N1 astrocytes and PC12 neuronal cells point to a physiological role of DMS in the brain.
Kim, Seon-Young;Lee, Chang-Hun;Kim, Kyung-Joo;Kim, Yeon-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.2
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pp.234-241
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2001
The C-terminal 393 bp region of the human interleukin-16 (IL-16) gene was cloned and expressed in E. coli along with mammalian cell lines. Recombinant IL-16 expressed from E. coli was 22 kDa on SDS-PAGE and showed 260% of chemoattractant activity at a concentration of $0.1\;{\mu}g/ml$. HeLa, COS, and Neuro-2a cells were transduced by recombinant retrovirus vector pLNC/IL-16/IRES/TK and the intracellular and secreted amounts of IL-16 produced by HeLa/IL-16/TK, COS/IL-16/TK, and Neuro-2a/IL-16/TK cells were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HeLa/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ and COS/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ cells secreted 36.1 and 13.3 ng of IL-16 for 48 h, respectively. Forty-nine ng and 86.4 ng of IL-16 remained in the cell lysates of HeLa/IL-16/TK and COS/IL-16/TK. Intracellular and secreted amounts of IL-16 from Neuro-2a/IL-16/TK $(5{\times}10^5)$ cells during 24 h cultivation were 50 ng and 3.3 ng, respectively. Also, HeLa and COS cells wee stably transfected with mammalian expression vector pCRIII/IL-16. Both culture media and cell lysates prepared from HeLa/IL-16 cells and COS/IL-16 cells showed chemoattractant activity ranging from 190% to 460% as compared to the control experiment. Expression of the herpes simplex virus thymidine kinase (HSV0tk) gene in pLNC/IL-16/ IRES/TK bicistronic retroviral expression vector was verified by performing a genciclovir (GCV) sensitivity assay. Finally, IL-16 repressed Tat-transactivated human immunodeficiency virus type 1 long terminal repeat (HIV-1 LTR) promoter activity.
Cryptosporidium parvum oocysts were isolated from a child suffering from acute gastroenteritis and successfully passaged in a calf and mice (designated hereafter SNU-H1) in the Republic of Korea; its molecular genotype has been analyzed. The GAG microsatellite region was amplified by a polymerase chain reaction (PCR), with a 238 base pair product, which is commonly displayed in C. parvum. The isolate was shown to be a mixture of the genotypes 1 (anthroponotic) and 2 (zoonotic). To study its infectivity in animals, 2 calves and 3 strains of mice were infected with the SNU-H1; in these animals, the propagation of both genotypes was successful. In immunosup-pressed (ImSP) BALB/c and C57BU6 mice the number of oocysts decreased after day 10 post-infection (PI); but in ImSP ICR mice, they remained constant until day 27 PI. The results show that both the C. parvum genotypes 1 and 2 can be propagated in calves and ImSP mice.
Limit dextrin of Korean beer(3 brands) and Japanese beer(21 brands) were separated by ethanol fractionation. Limit dextrin of Korean and Japanese beer was estimated to be 1.1%. 1H-NMR analysis revealed that the limit dextrin showed both signal of $\alpha$-1, 4- and $\alpha$-1, 6- glucosidic linkage with its estimation ratio of average 5.5:1. Limit dextrin was hydrolyzed to glucose with the yield of 57.22% by Aspergillus awamori $\alpha$-glucosidase(24.7 unit) plus human salivay $\alpha$-amylase(2.4 unit) in 100${mu}ell$ of 0.043M acetate buffer at 37$^{\circ}C$ for 5 hour. Among them, limit dextrin of Korean beer showed the highest hydrolysis rate of 76%. Small size sugars (64.8%) removed by ethanol fractionation and limit dextrin(21.4%) hydrolyzed by amylases that is digestable sugar. Non hydrolyzed limit dextrin(13.8%) by the amylases which can be a growth factor of Bifidobacterium in human intestine.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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