Tamas, Laszlo;Bekes, Ferenc;Morrell, Matthew K.;Appels, Rudi
Journal of Plant Biotechnology
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제1권1호
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pp.13-19
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1999
The visco-elastic properties of gluten are major determinants of the processing properties of doughs. These visco-elastic properties are strongly influenced by the ratio of monomeric and polymeric proteins and the size distribution of the polymeric proteins, which make up the gluten fraction of the dough. Recent studies have revealed that other features, such as the number of the cysteine residues of the HMW-GS, also play an important role in determining the functional characteristics. To modify the processing properties at molecular level, the relationship between the structure of molecules and dough properties has to be understood. In order to explore the relationships between individual proteins and dough properties, we have developed procedures for incorporating bacterially expressed proteins into doughs, and measuring their functional properties in small-scale equipment. A major problem in investigating the structure/function relationships of individual seed storage proteins is to obtain sufficient amounts of pure polypeptides from the complex families of proteins expressed in the endosperm. Therefore, we have established a simplified model system in which we produce specific protein genes through bacterial expression and test their functional properties in smallscale apparatus after incorporation into base flour. An S poor protein gene has been chosen as a template gene. This template gene has been modified using standard recombinant DNA techniques in order to test the effects of varying the number and position of cysteine residues, and the size of the protein. Doughs have been mixed in small scale apparatus and characterized with respect to their polymeric composition and their functional properties, including dough mixing, extensibility and small scale bating. We conclude that dough characteristics can be manipulated in a predictable manner by altering the cysteine residues and the size of high molecular weight glutenins.
길항미생물 MP-1은 여러 종의 곰팡이와 효모 및 음식물을 부패시키는 세균 (그람양성 및 음성) 에 대하여 항균활성을 보였다. MP-1의 16S rRNA gene 염기서열은 기존에 밝혀진 Brukholderia sp.의 염기서열과 99-100% 유사하였다. 배양액으로부터의 항균물질은 에틸아세테이트 (EtOAc)를 사용하여 분리하였으며 EtOAc에 용해된 산성 분획은 silica gel, Sephadex LH-20, ODS 컬럼크로마토 그래피 및 HPLC를 사용하여서 정제를 실시 하였다. 최종적으로 Gas chromatographic-mass 스펙트럼을 통한 분석을 통하여 4 종의 항균 활성을 나타내는 물질은 phenylacetic acid, hydrocinnamic acid, 4-hydroxyphenylacetic acid 및 4-hydroxyphenylacetate methyl ester로 확인 되었다. 각각의 항균 활성물질들의 미생물에 대한 최소저해농도(MIC)는 $250{\sim}2500ug\;ml^{-1}$ 인 것으로 나타났다. 또한 6 mm paper disc 에서의 1mg (건물중) 산성 분획의 항균활성은 같은 비율로 혼합한 표준혼합용액 보다 더 효과적인 것으로 나타났다.
Oh, Se Jin;Kim, Sung Chul;Ok, Yong Sik;Oh, Seung Min;Lee, Bup Yeol;Lee, Sang Hwan;Yang, Jae E.
한국토양비료학회지
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제48권1호
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pp.57-63
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2015
Bioavailability of cadmium (Cd) and arsenic (As) can be different depending on soil pH. For this reason, main purpose of this research was to compare bioavailability of Cd and As in agricultural field under varied soil pH and different extractants. Bioavailable fraction of Cd and As in soil was extracted with $CaCl_2$, $NaNO_3$, DTPA, EDTA, and low molecular weight organic acids (LMWOAs). Soil samples and cultivated crops were collected at the range of soil pH 4.5-8.5 and correlation analysis was conducted between bioavailable fraction of Cd and As in soil and total concentration of Cd and As in crops. Results showed that concentration of Cd and As in acidic soil was ranged $0.002-0.462mg\;kg^{-1}$ and $0.041-4.903mg\;kg^{-1}$ respectively. In alkaline condition, concentration of Cd and As were ranged $0.006-0.351mg\;kg^{-1}$ and $0.039-2.807mg\;kg^{-1}$ respectively. Comparing bioavailable fraction of Cd and As in acidic and alkaline soil condition, higher concentration was measured in acidic condition. Similarly, higher average concentration of Cd and Asin crops was observed in acidic condition (0.398 and $0.751mg\;kg^{-1}$ respectively) than alkaline condition (0.248 and $0.264mg\;kg^{-1}$). Among different extractants, LMWOAs method showed higher correlation ($r^2=0.545$) for Cd in acidic condition indicating that LMWOAs method could be applied for evaluating bioavailability of Cd in acidic soil. However, no high correlation was observed for As in both acidic and alkaline condition. Overall, bioavailable fraction of Cd and As can be higher in acidic condition of soil than alkaline condition resulting higher uptake of Cd and As from soil to crops. Therefore, efficient best management practice (BMPs) for Cd and As in acidic soil should be conducted for minimizing uptake of Cd and As into crops.
To investigate the properties of ryanodine binding sites of the bird skeletal SR vesicles, SDS PAGE, purification of RyR, and $[^3H]ryanodine$ binding study were carried out in the SR vesicles prepared from the chicken pectoral muscle. The chicken SR vesicles have two high molecular weight (HMW) protein bands as in eel SR vesicles on SDS PAGE. The HMW bands on SDS PAGE were found in the $[^3H]ryanodine$ peak fraction $(Fr_{3-5})$ obtained from the purification step of the ryanodine receptor protein. Bmax and KD of the chicken $[^3H]ryanodine$ binding sites were 12.52 pmol/mg protein and 14.53 nM, respectively. Specific $[^3H]ryanodine$ binding was almost maximal at $50{\sim}100$${\mu}M$$Ca^{2+}$, but was not increased by 5 mM AMP and not inhibited by high $Ca^{2+}$. Binding was significantly inhibited by $20{\sim}100$${\mu}M$ ruthenium red and 1 mM tetracaine, but slightly inhibited by $Mg^{2+}$. From the above results, it is suggested that chicken SR vesicles have the ryanodine binding sites to which the binding of ryanodine is almost maximal at $50{\sim}10$${\mu}M$$Ca^{2+}$, is significantly inhibited by ruthenium red and tetracaine, slightly inhibited by $Mg^{2+}$, but not affected by AMP and not inhibited by high $Ca^{2+}$.
동양배 '신고'와 '사과배'의 저장기간 중 서로 다른 생리적 특성과 세포벽 특성 변화를 비교 검토하여 과실생리 및 저장기술의 기초자료로 얻고자 본 실험을 실시하였다. 저장 기간 중 '신고'의 품질변화는 중량감소가 큰 반면, '사과배'에서는 급격한 호흡급등현상과 에틸렌 생합성이 많았으며, 전분감소가 컸다. 수용성 펙틴함량은 '신고'가 '사과배'보다 높았으며 CDTA-가용성 펙틴은 두 품종간의 차이가 크지 않았다. $Na_2CO_3$-가용성 펙틴은 '사과배'가 '신고'보다 높았으며 수용성 펙틴과는 달리 저장 기간이 길어질수록 증가하였다. 4% 및 24% KOH 가용성 펙틴은 저장기간에 따른 변화 폭이 크지 않았다. 수용성 펙틴의 분획 결과,'신고'와 '사과배' 저장 중 거대 분자의 구조 변화에서 많은 차이를 보였고, '신고'와 '사과배' 모두 저장 기간이 길어질수록 펙틴의 가수분해 및 측쇄 사슬의 당 분해가 관찰되었다. $Na_2CO_3$-가용성 펙틴의 경우 당 분포는 저장 기간에 관계없이 일정하였지만 펙틴은 분자량 변화가 컸다. 4% 및 24% KOH 가용성 펙틴의 분획 결과 두 품종에 있어 헤미셀룰로스의 구조 변화가 서로 달라, '사과배'의 경우는 4% KOH 가용성 추출물의 분획에서 세포벽을 구성하고 있는 당들의 가수분해가 컸으며 '신고' 보다 '사과배'에서 노화 과정 중 헤미셀룰로스의 변화가 더 심하였다.
면실박으로부터 단백질을 추출한 후 단백질 가수분해효소인 Flavourzyme으로 가수분해를 실시하여 면실박 단백질 가수분해물을 얻었고, 가수분해 정도는 trinitrobenzenesulfonic acid 방법과 Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis를 통해 측정하였다. 면실박 단백질 가수분해물은 한외여과에 의하여 3 kDa 이하로 cut-off하였고, Q-Sepharos fast flow, Sephadex G-15, reversed-phase high performance liquid chromatography를 이용하여 Fe, Ca-binding 펩타이드를 분리하였다. 그 결과 철분과 칼슘 결합력이 가장 높은 분획 51을 얻을 수 있었고, 이렇게 얻어진 Fe, Ca-binding 펩타이드는 향후 기능성 식품 소재로써 활용될 수 있다고 판단된다.
Soybean contains a high concentration of carbohydrates that consist mainly of non-starch polysaccharides (NSP) and oligosaccharides. The NSP can be divided into insoluble NSP (mainly cellulose) and soluble NSP (composed mainly of pectic polymers, which are partially soluble in water). Monogastric animals do not have the enzymes to hydrolyze these carbohydrates, and thus their digestion occurs by means of bacterial fermentation. The fermentation of soybean carbohydrates produces short chain fatty acids that can be used as an energy source by animals. The utilization efficiency of the carbohydrates is related to the chemical structure, the level of inclusion in the diet, species and age of the animal. In poultry, soluble NSP can increase digesta viscosity, reduce the digestibility of nutrients and depress growth performance. In growing pigs, these effects, in particular the effect on gut viscosity, are often not so obvious. However, in weaning piglets, it is reported that soy oligosaccharides and soluble NSP can cause detrimental effects on intestinal health. In monogastrics, consideration must be given to the anti-nutritive effect of the NSP on nutrient digestion and absorption on one hand, as well as the potential benefits or detriments of intestinal fermentation products to the host. This mirrors the needs for i) increasing efficiency of utilization of fibrous materials in monogastrics, and ii) the maintenance and improvement of animal health in antibiotic-free production systems, on the other hand. For example, ethanol/water extraction removes the low molecular weight carbohydrate fractions, such as the oligosaccharides and part of the soluble pectins, leaving behind the insoluble fraction of the NSP, which is devoid of anti-nutritive activities. The resultant product is a high quality soy protein concentrate. This paper presents the composition and chemical structures of carbohydrates present in soybeans and discusses their nutritive and anti-nutritive effects on digestion and absorption of nutrients in pigs and poultry.
백수오의 국내 재배활성화와 함께 농가소득을 높이기 위한 기능성 식품소재로서의 우수성을 산업적으로 응용하고자 백수오 추출물의 면역증진 활성을 평가하였다. 낮은 온도에서 액체상태의 추출물을 효과적으로 농축하고 정제하기 위하여 비열처리 공정인 한외거르기를 통해 분자량(MWCO)이 30 kDa인 여과막을 이용하여 고분자 분획물(CWUF>30) 및 저분자 분획물(CWUF<30)을 얻었으며 이를 큰포식세포 활성화를 통한 면역 증진 효과를 알아보기 위해 RAW 264.7 세포를 이용하여 면역활성의 지표가 되는 산화질소(II) 생성량 및 사이토카인인 TNF-${\alpha}$, 인터루킨-6의 생성량을 측정한 결과, 정상대조군(CON)에 비해 CWUF>30을 처리하였을 때 농도 의존적으로 유의하게 증가하였다. 세포실험을 통해 면역증강활성이 높은 CWUF>30은 정상동물모델에서 면역기관인 비장 및 흉선의 무게를 증가시켰고 비장세포 유래 림프구 증식도 유의하게 증가시켰다. 이는 CWUF>30의 투여가 비장세포를 증식시키는 mitogen 활성이 있음을 보여주며 외부의 항원에 노출 시 항원에 대한 면역반응을 유도하는 면역세포의 수를 증가시켜 항원에 대한 효과적인 방어에 도움을 줄 것으로 보여진다. 또한 CWUF>30을 투여한 마우스 비장세포(splenocyte)의 Yac-1 세포 살해 정도를 측정한 결과, 200 mg/kg BW의 농도로 CWUF>30을 투여한 마우스의 비장세포는 정상대조군(CON)에 비하여 effector 세포와 target 세포의 비율이 10:1에서 유의적으로 증가하였으며 이는 양성대조군(PC)과 유사한 높은 활성을 보이는 것을 확인 할 수 있었다. 이와 같은 결과를 통해 백수오 고분자 분획물(CWUF>30)이 강력한 면역활성 증진효능을 갖고 있으며 각종 바이러스 등 외부 항원들에 대응하여 초기 면역세포를 자극하고 면역매개물질을 생성함으로써 인체의 비특이적 면역반응을 증가시키는데 중요한 역할을 할 수 있을 것으로 기대된다.
두유박을 수용성 식이섬유의 원료로 활용하기 위하여 $140^{\circ}C,\;150^{\circ}C$ 및 $160^{\circ}C$에서 각각 열처리를 통해 두유박 식이섬유의 대부분을 차지하는 불용성 식이섬유를 수용성 식이섬유로 변환시킨 후 이를 추출하여 각추출물의 이화학적 특성을 분석하였다. 각 온도별로 pH와 열처리 시간을 달리하여 추출하였을 때 최대 가용화 조건에서 수용성 식이섬유 함량은 $30.3{\sim}32.2%$이었다. 두유박 식이섬유 고온 추출물의 당 조성을 HPLC로 분석한 결과 glucose > galactose > arabinose + fucose > mannose의 순으로 많이 함유되어 있었다. 추출물을 high performance size exclusion chromatography로써 평균 분자량에 따라 3가지 획분으로 나누어 분석하였는데, 추출 온도가 증가함에 따라 고분자량 획분이 줄어들고 중간분자량 획분이 증가하는 경향을 보였다. 추출물을 함유한 용액의 점도는 추출 온도의 상승에 따라 감소하였으나, pH에 따른 변화 경향은 뚜렷하지 않았다. 추출물의 용해도는 온도가 상승함에 따라 급격하게 증가하였으며 추출 온도가 높을수록 증가하는 경향을 나타내었다. Ca-binding capacity는 $140^{\circ}C$ 추출물이 다른 시료에 비해 월등히 높았다.
졸복(Takifugu pardalis)의 아가미로부터 항균성 펩타이드를 정제하였다. 졸복 아가미의 산 추출물은 Sep-Pak C18에 의해 부분적으로 정제되었으며, 60% 메탄올 분획(RM60)은 Bacillus subtilis KCTC 1021에 대해 높은 항균활성을 나타내었다. 이 RM60을 사용하여 이온교환을 포함한 5단계의 연속적인 HPLC로 정제하였다. 정제된 펩타이드의 분자량과 아미노산 서열분석은 MALDI-TOF MS와 에드만 분해법으로 분석하였다. 이 펩타이드의 분자량은 약 1171.6 Da이었으며, 분석된 이 물질의 부분적인 일차구조서열은 다음과 같다; STKEKAPRKQ. 이 물질과 기존에 알려진 항균성 펩타이드들과 유사성을 조사한 결과, 정제된 물질은 histone H3 계열의 N-말단 부분과 유사하였다. 이러한 결과로부터 정제된 펩타이드는 졸복에서 반응하는 선천성 방어 시스템에서 중요한 역할을 하고 있다고 여겨진다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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