RNA interference (RNAi) is a process of sequence-specific gene silencing, which is initiated by double-stranded RNA (dsRNA). RNAi may also serve as an antiviral system in vertebrates. This study describes the inhibition of herpesvirus-6B (HHV-6B) replication by short interference RNAs (siRNAs) that are targeted to the U38 sequence that encodes DNA polymerase. When virus-infected SupT1 cells were treated by siRNA, these cells blocked the cytopathic effect (CPE) and detected the HHV-6B antibody-negative in indirect immunofluorescence assays (IFA). Our result suggests that RNAi can efficiently block Herpesvirus-6B replication.
Mohd Lila Mohd Azmi;Field, Hugh-John;Frazer Rixon;Lauchlan, John-Mc
Journal of Microbiology
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v.40
no.1
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pp.11-19
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2002
Mice immunized with equine herpesvirus type-1(EHV-1) L-particles skewed a significant increase (p<7.75) in serum antibody titers. Upon a booster dose four weeks lateral antibody titers increased significantly. Interestingly, immunization via intravenous or intramuscular route induced significantly higher (p<0.75) antibody titers. However, mice iummunized with UV-treated L-particles, visions or immunization via intranasal route induced lower antibody titers. Upon challenge inoculation with wildtype EHV-1, our data showed there was a poor correlation between antibody titers and protection against virus replication. Therefore, the role of cell-mediated immunity Inwards protection was investigated. As predicted, the strongest cell-mediated immunity, as measured by delayed-hypersensitivity test, was detected in mice immunized with live virus particles. The magnitude of cell-mediated immune response correlated with the efficacy of L-particles as immunizing agent. The highest efficacy, as indicated in mice immunized via intranasal routed was highly correlated with cell-mediated immunity. A similar phenomenon was also demonstrated in mice immunized intranasally with UV-treated L-particles. However, the degree of protection was reduced when mice immunized intravenously or intramuscularly with UV-treated L-particles. In conclusion, protection conferred in these animals was highly implicated by immune cells and the least by antibodies. The route of immunization and the nature of the antigen also contributed to the efficacy of L-particles as immunizing agent. In contrast to that of herpes simplex virus type 1, our data showed EHV-1 non-infectious L-particles are highly suitable for immunization of the host against EHV-1 disease.
Lim, Sora;Cha, Seho;Jang, Jun Hyeong;Yang, Dahye;Choe, Joonho;Seo, Taegun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.1
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pp.189-196
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2017
Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) is associated with formation of Kaposi's sarcoma, multicentric Castleman's disease, and primary effusion lymphoma. Replication and transcription activator (RTA) genes are expressed upon reactivation of KSHV, which displays a biphasic life cycle consisting of latent and lytic replication phases. RTA protein expression results in KSHV genome amplification and successive viral lytic gene expression. Transcriptional activity of viral lytic genes is regulated through epigenetic modifications. In Raji cells latently infected with Epstein-Barr virus, various modifications, such as acetylation and methylation, have been identified at specific lysine residues in histone H4 during viral reactivation, supporting the theory that expression of specific lytic genes is controlled by histone modification processes. Data obtained from chromatin immunoprecipitation and quantitative real-time PCR analyses revealed alterations in the H4K8ac and H4K20me3 levels at lytic gene promoters during reactivation. Our results indicate that H4K20me3 is associated with the maintenance of latency, while H4K8ac contributes to KSHV reactivation in infected TREx BCBL-1 RTA cells.
Like the other herpesviruses, the virion of MDV consists of an envelope, which surrounds an amorphous tegument. Within the tegument, and icosahedral capsid encloses a linear double-stranded DNA core. Although the genome structure of MDV indicates that it is an ${\alpha}-herpesvirus$ like herpes simplex and varicella-zoster viruses, biological properties indicate MDV is more akin to the ${\gamma}-herpesvirus$ group, which includes Epstein-Barr and Kaposi's sarcoma herpesviruses. These herpesviruses replicate lytically in lymphocytes, epithelial and fibroblastic cells, and persist in lymphoblastoid cells. MDV has a complex life cycle and uses two means of replication, productive and non-productive, to exist and propagate. The method of reproduction changes according to a defined pattern depending on changes in virus-cell interactions at different stages of the disease, and in different tissues. Productive (lytic) interactions involve active invasion and take-over of the host cell, resulting in the production of infectious progeny virions. However, some herpesviruses, including MDV, can also establish a non-productive (abortive) infection in certain cell types, resulting in production of cell-associated progeny virus. Non-productive interactions represent persistent infection, in which the viral genome is present but gene expression is limited, there is no structural or regulatory gene translation, no replication, no release of progeny virions and no cell death. Reactivation of the virus is rare, and usually the infectious virus can be re-isolated only after cultivation in vitro. MDV establishes latency in lymphoid cells, some of which are subsequently transformed. In this review article, recent knowledges of the pathogenesis mechanisms followed by MDV infection to sensitive cells and chickens are discussed precisely.
It is impotent to identify the causative agents of abortion in equine for minimizing the loss of breeding costs in equine Industry. Recently, the abortion has often occurred in equine herds and thus the purpose of the study was aimed at the identification of equine herpesvirus-1, one of the frequent pathogens to abortion, using polymerase chain reaction. Six fetuses to be aborted at nine to ten months in pregnancy reared in six herds were used in the study. Two primers in the PCR were made from glycoprotein B gene of EHV-1. The primers specific for EHV-1 amplified 1880 bp of PCR products from DNA extracts from thorax fluids, livers, lungs, and spleens of four in six aborted fetuses. Consequently, PCR could be applied to diagnose the abortion of EHV-1 and also confirmed to play a major role of the viral pathogen associated with equine abortion in Jeju island.
Kim, Wi-Sik;Jung, Sung-Ju;Kim, Du-Woon;Kim, Seok-Ryel;Kim, Jeong-Ho;Oh, Myung-Joo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.13
no.1
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pp.79-83
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2010
Since 1998, a new viral disease with high mortality has been consistently recorded in Korea in cultured carp, Cyprinus carpio. In this study, we investigated an epizootic of the disease that caused high mortality rates in carp obtained from 11 farms in Korea between 1999 and 2007. Assessment of koi herpesvirus (KHV) levels in diseased carp was carried out to determine if this virus was the etiologic agent of disease in this instance. High mortality rates in carp were recorded mainly in the spring and autumn at water temperatures between $19^{\circ}C$ and $24^{\circ}C$. Diseased fish typically showed surface discoloration, with a thick opaque mucus covering the body and gills. Protozoan parasites and bacteria were recovered from 7/29 (24%) and 2/26 (8%) of fish, respectively. Evidence of viral infection was marked; cytopathic effects (CPEs), characterized by cell rounding and an extended cytoplasm in fathead minnow (FHM) cells, were detected in 40/41 fish (98%). A high mortality rate (80%) resulted when supernatants of cell cultures showing CPEs were applied to previously healthy fish. KHV was detected by polymerase chain reaction in 6/41 fish (15%), but was not detected in supernatants obtained from cell cultures showing CPEs. These results suggest that KHV may not be the etiologic agent of the high mortality occurring among cultured carp in Korea; therefore, some other-as yet unidentified-infective agent must be responsible.
The equine herpesvirus type 1 (EHV-1) immediate-early (IE) protein is a potent transactivator responsible for the activation of both early and late genes during the course of infection and is comprised of discrete functional domains that mediate its many functions. Interaction between trans activators such as the IE protein and various components of the RNA polymerase II transcription initiation machinery has been demonstrated to be critical for transactivation. In the present report, it is addressed the hypothesis that the IE protein interacts with various components of transcription machinery to mediate transactivation of target viral genes. In these studies, it is demonstrated that in vitro transcribed and translated IE protein interacts with TFIIB-agarose conjugate but not with TFIID-agarose conjugate. Additional immunoprecipitation studies using nuclear extracts derived from EHV-1 infected RK-13 cells confirmed that the IE protein interacts strongly with TFIIB, but fails to interact with TFIID. IR2, a truncated form of the IE protein lacking the potent transactivation domain and involved in the down-regulation of the IE gene, also interacted with TFIIB but not with TFIID. Studies were also performed to ascertain if particular TBP-associated factors (TAFs) could mediate IE or IR2 binding to TFIID. In vitro transcribed and translated TAF250 added to nuclear extracts generated from EHV-1 infected cells also failed to mediate an interaction between the IE protein or the IR2 protein and TFIID. This study demonstrated that the IE protein mediates transactivation of target viral genes by a mechanism that involves TFIIB. This is in contrast to mechanisms that have been proposed for both the herpes simplex virus ICP4 and VP16 protein which have been proposed to transactivate viral genes through interactions involving both TFIIB and TFIID. This study also intimates that IR2 mediate its repressive effects during the course of EHV-1 infection by a mechanism that involves sequestration of various transcription factors.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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