China is one of most important countries for production and consumption of herbicide. Although the chemical weeding technology promoted the development of agricultural modernization in Chinese, it led to the negative effects to agriculture. In particular, the weeds resistant herbicide in paddy field had been serious challenge for safe production of rice. The chemical control technology for weed resistant herbicide with effective, low cost and safety characteristic will be key problem being solved in futhure.
Transgenic zoysiagrass (Zoysia japonica cv. Zenith) plants have been obtained by particle bombardment of embryogenic callus with the plasmid pSMABuba, which contains hygromycin resistance (hpt) and bialaphos resistance (bar) genes. Parameters on DNA delivery efficiency of the particle bombardment were partially optimized using transient expression assay of a chimeric $\beta-glucuronidase$(gusA) gene driven by the CaMV 35S promoter. Stably transfarmed zoysiagrass plants were recovered with a selection scheme using hygromycin. Transgenic zoysiagrass plants were confirmed by PCR analysis with specific primer for bar gene. Expression of the transgene in transformed zoysiagrass plants was demonstrated by Reverse transcriptase (RT)-PCR analysis. All the tested transgenic plants showed herbicide BastaR resistance at the field application rate of $0.1\%-0.3\%$.
본 연구는 충청남도에서 ALS 제초제 저항성 논 잡초의 발생과 분포를 조사하기 위해 2017년도에 수행되었다. 충청남도 전체 논 재배면적의 47.0%인 64,782 ha에서 제초제 저항성 논 잡초가 발생하였다. 상위 5개 시 군별 제초제 저항성 잡초 발생면적은 서산시 11.9%, 논산시 11.1%, 당진시 10.9%, 보령시 9.2%, 아산시 7.8% 순이었다. 제초제 저항성 잡초종별 발생을 보면 물달개비가 가장 많았고, 다음으로 미국외풀, 올챙이고랭이, 강피, 알방동사니, 벗풀 순이었다. 제초제 저항성 물달개비, 미국외풀, 올챙이고랭이는 충청남도 전역에 분포하였으며, 벗풀은 당진시에서만 발생하였다. 2011년도 제초제 저항성 잡초 조사와 비교하여 제초제 저항성 잡초 발생면적은 감소하였으나, 제초제 저항성 잡초 발생률은 2011년도의 47.6%와 유사하였다. 제초제 저항성 잡초를 방제하기 위해서는 흔히 다른 작용기작을 지닌 제초제들과 병용하거나 교호로 처리하여야 하며 제초제 저항성 잡초의 주기적인 모니터링과 종합적인 제초제 저항성 관리체계가 필요하다.
Transgenic cabbage (Brassica oleracea ssp. capitata) plants resistant to the commercial herbicide Bast $a^{R}$ were obtained by Agrobacterium tumefaciens - mediated transformation. Hypocotyl segments of in vitro grown plants were infected with Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 harboring plasmid pMOG6-Bar which contains hpt and bar genes. Explants were cultured on callus induction medium (MS basal medium + 1 mg/L NAA + 2 mg/L BA + 2 mg/L AgN $O_3$+ 100 mg/L carbenicillin + 250 mg/L cefotaxime) supplemented with 15 mg/L hygromycin. Hygromycin resistant calluses were transferred to shoot regeneration medium (MS basal medium + 0.1 mg/L NAA + 2 mg/L BA + 3% sucrose + 2 mg/L AgN $O_3$+ 15 mg/L hygromycin + 250 mg/L cefotaxime + 100 mg/L carbenicillin). In order to induce roots, elongated shoots were placed on the MS medium without plant growth regulators and hygromycin. Southern blot analysis of several putative transgenic plants indicated that one to five intact copies of Apt and bar genes were incorporated into the genome. Expression of bar gene was confirmed by Northern blot analysis and by herbicide resistant phenotype. Seed progeny from self-pollinated transformants expressed the herbicide resistance and showed Mendelian segregation of the introduced gene.e.
과산화계 제초제 oxyfluorfen이 처리된 비형질전환 벼와 형질전환 벼에서 Protox 발현 위치가 제초제 저항성에 미치는 영향을 비교하였다. Arabidopsis protoporphyrinogen oxidase(Protox; AP 계통)를 색소체에만 발현하는 형질전환 벼와 Myxococcus xanthus Protox 유전자를 색소체와 미토콘드리아에 모두 발현하는 형질전환 벼(TTS 계통)가 형질전환 시스템으로 사용되었다. Oxyfluorfen이 처리된 TTS4 계통은 AP 계통이나 비형질전환 벼에 비해 낮은 수준의 세포질 누출 및 malonyldialdehyde를 보여주었고, 높은 5-aminolevulinic acid 합성 능력을 유지하였다. Oxyfluorfen 작용 동안, TTS4 계통은 AP1 계통보다 높은 제초제 저항성을 보여주었는데, 이는 색소체만에서의 Arabidopsis Protox의 발현에 비해 색소체와 미토콘드리아에서의 M. xanthus Protox의 쌍발현이 광역학적인 protoporphyrin IX의 축적을 더 효율적으로 억제하였기 때문일 것이다. 이 결과들은 미토콘드리아 내 Protox의 발현이 Protox 저해형 제초제에 대한 식물의 저항성에 크게 기여함을 의미한다.
일본잡초학회를 참석하여 잡초방제 관한 최근 연구동향을 파악하고 이를 토대로 향후 잡초방제 연구의 발전방향과 전망을 제시하고자 하였다. 주요 연구분야로는 잡초연구, 잡초관리, 제초제, 그리고 해외동향 등이었다. 일반강연 49편, 포스터 발표 45편이 었다. 학회 일정 중에 미니심포지엄이 소분과로 나누어 각각 개최되었고, 젊은 과학자의 모임도 활발하게 진행되었다. 일본도 우리나라와 같이 기후변화에 따른 문제잡초의 증가 및 외래잡초의 관련연구의 비중이 높고, 친환경 방제를 위한 식물체 유래 제초활성 물질 탐색, 저항성 잡초를 방제하기 위한 연구들이 주로 이루어지고 있었다.
Kim, Hyun A.;Utomo, Setyo Dwi;Kwon, Suk Yoon;Min, Sung Ran;Kim, Jin Seog;Yoo, Han Sang;Choi, Pil Son
Plant Biotechnology Reports
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제3권4호
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pp.277-283
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2009
One of the limitations to conducting maize Agrobacterium-mediated transformation using explants of immature zygotic embryos routinely is the availability of the explants. To produce immature embryos routinely and continuously requires a well-equipped greenhouse and laborious artificial pollination. To overcome this limitation, an Agrobacterium-mediated transformation system using explants of type II embryogenic calli was developed. Once the type II embryogenic calli are produced, they can be subcultured and/or proliferated conveniently. The objectives of this study were to demonstrate a stable Agrobacterium-mediated transformation of maize using explants of type II embryonic calli and to evaluate the efficiency of the protocol in order to develop herbicide-resistant maize. The type II embryogenic calli were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strain C58C1 carrying binary vector pTF102, and then were subsequently cultured on the following media: co-cultivation medium for 1 day, delay medium for 7 days, selection medium for $4{\times}14$ days, regeneration medium, and finally on germination medium. The T-DNA of the vector carried two cassettes (Ubi promoter-EPSPs ORF-nos and 35S promoter-bar ORF-nos). The EPSPs conferred resistance to glyphosate and bar conferred resistance to phosphinothricin. The confirmation of stable transformation and the efficiency of transformation was based on the resistance to phosphinothricin indicated by the growth of putative transgenic calli on selection medium amended with $4mg\;1^{-1}$ phosphinothricin, northern blot analysis of bar gene, and leaf painting assay for detection of bar gene-based herbicide resistance. Northern blot analysis and leaf painting assay confirmed the expression of bar transgenes in the $R_1$ generation. The average transformation efficiency was 0.60%. Based on northern blot analysis and leaf painting assay, line 31 was selected as an elite line of maize resistant to herbicide.
The use of a marker gene in a transformation process aims to give a selective advantage to the transformed cells, allowing them to grow faster and better, and to kill the non-transformed cells. In general, the selective gene is introduced into plant genome along with the genes of interest. In some cases, the marker gene can be the gene of interest that will confer an agronomic characteristic, such as herbicide resistance. In this review we list and discuss the use of the most common selective marker genes on plant transformation and the effects of their respective selective agents. These genes could be divided in categories according their mode of action: genes that confer resistance to antibiotics and herbicides; and genes for positive selection. The contention of the marker gene flow through chloroplast transformation is further discussed. Moreover, strategies to recover marker-free transgenic plants, involving multi-auto-transformation (MAT), co-transformation, site specific recombination and intragenomic relocation of transgenes through transposable elements, are also reviewed.
Le, Duy;Nguyen, Chon M.;Mann, Richard K.;Yerkes, Carla N.;Kumar, Bobba V.N.
Journal of Plant Biotechnology
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제44권4호
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pp.472-477
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2017
Barnyardgrass (Echinochloa crus-galli) is one of the worst weeds in rice (Oryza sativa), but there are few reports about the genetic diversity and herbicide resistance of barnyardgrass in Vietnam. In this study, we used random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis and greenhouse testing to study the genetic diversity and quinclorac resistance levels of 15 Echinochloa crus-galli populations in the Mekong Delta, Vietnam, and the state of Arkansas, U.S. The quinclorac resistance of Echinochloa crus-galli populations in Vietnam was confirmed; 9 populations were resistant to quinclorac with R/S ratios ranging from 1.9 to 6.3. Six oligonucleotide primers produced a total of 55 repeatable bands of which 46 were polymorphic (83.3% average) among the 15 populations. Genetic distance was calculated, and cluster analysis separated the 15 populations into 2 main clusters with the genetic distances within the clusters ranging from 0.09 to 0.39. The two main clusters were divided into 7 subclusters, and the quinclorac resistant and susceptible populations were located randomly within each subcluster. Six out of 13 weed populations from Vietnam belonged to one cluster and a single Echinochloa species. The remaining 7 populations were identified as potentially different species in the Echinochloa genus. Nine Echinochloa populations from Vietnam were tested and identified as quinclorac resistant. The connection between quinclorac resistance levels and weed groups defined by RAPD analysis in the study is unclear; the quinclorac resistance of each resistant population could have evolved individually, regardless of differences in genetic diversity and location of the sampled populations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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