The present study was undertaken to observe the immune status of breeding hens and laying hens against Newcastle disease (ND). The methods of extraction of hemagglutination inhibition (HI) antibody from egg yolk, the detection of HI antibody in egg albumen and the correlation between HI antibody titers in maternal sera and egg yolks were discussed. For the purposes of these experiments, 9 flocks of breeding hens and 16 flocks of laying hens immunized against Newcastle disease virus were investigated. The vaccination program of tested flocks was 3-3-3 or 4-4-4 in general. The results obtained are summerized as follows: Freezing-thawing was the best method far antibody extraction from egg yolk for HI test. The HI antibody against NDV was found in egg albumen (geometric mean, 4.5), but lower than that found in egg yolk (32.1). The geometric mean of HI antibody titers of egg yolks (84.1) was higher than that of maternal sera (68.4) and day-old chicken sera (25.3). There was correlation between HI antibody titers of maternal sera(Y) and those of egg yolks(X). The coefficient correlation was r=0.63, and the line of regression of Y on X was $\hat{Y}$=35.91+0.35X.
Hemagglutination inhibition(HI) titers of Newcastle disease(ND) were measured to investigate the vaccination times on three different species of broiler chicks in Chonbuk province. Each 330 of Cobb, Ross and White-semi broiler chicks were selected from 11 broiler farms. The primary vaccine were sprayed in hatchery at one day old chicks. Secondary and tertiary vaccine were used by drinking water at 7 to 24 days old chicks. The ND antibody titer were measured by HI from each different species of broiler chicks at the marketing date. Total average HI titers of Cobbs vaccinated with primary ones, secondary and tertiary ones were recorded 1.86, 1.52 and 2.76, respectively. The antibody titers were shown to 2.22, 2.13, 3.07 in terms of vaccination of Ross broiler chicks. They were also 2.56, 2.65 and 2.78 in terms of vaccination of White-semi broiler chicks. The value HI titer were not statistically different of all treatments. The results of this experiment suggested that HI titer of sera is scored less than defensive value of ND antibody titer at more than two times of vaccination.
Kim, Seung Youn;Kim, Yun Kyung;Eun, Byung Wook;Kim, Nam Hee;Kang, Eun Kyeong;Lee, Byong Sop;Lim, Jung Sub;Lee, Jun Ah;Kim, Dong Ho
Clinical and Experimental Pediatrics
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제55권12호
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pp.474-480
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2012
Purpose: For evaluating the immunogenicity of an influenza vaccine, the microneutralization (MN) test has a higher sensitivity and specificity as compared to the hemagglutination inhibition (HI) test. However, the MN test is more time consuming and is difficult to standardize. We performed the MN test to determine its usefulness as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines. Methods: We compared the MN test with the HI test using 50 paired samples taken from a previous clinical study (2008-2009) in Korean children under 18 years of age. Results: The linear correlation coefficients of the 2 tests for H3N2, H1N1, and influenza B were 0.69, 0.70, and 0.66, respectively. We identified a high index of coincidence between the 2 tests. For an influenza vaccine, the postvaccination seroprotection rates and seroconversion rates determined by the MN test were 78.0% and 96.0%, 90% and 42.0%, and 42.0% and 48.0% for H3N2, H1N1, and influenza B, respectively. Geometric mean titer fold increases of H3N2, H1N1, and influenza B were 2.89, 5.04, and 4.29, respectively, and were 2.5-fold higher. We obtained good results in the evaluation of the immunogenicity of the 2008-2009 seasonal influenza vaccines. Conclusion: We found that the MN test was as effective as the HI test. Therefore, we suggest that the MN test can be used as an alternative or complementary test to the HI test for evaluating the immunogenicity of influenza vaccines.
To compare of serum antibody titers using ELISA and HI, serum samples were collected from 100 breeders and their progeny 550 broilers. The breeders and broilers were vaccinated with infectious bronchitis(IB)- and Newcastle disease(ND)-viruses according to general vaccination program. The antibodies in serum samples against IB and ND viruses were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) using commercial ELISA kit and hemagglutination inhibition(HI) test. Geometric mean titer(GMT) of ELISA and In titers were monitored from 1-day-old to 35-day-old broilers and compared to those of breeder chickens. The antibody titers of breeders vaccinated with ]B virus showed 47,800, ELISA and 7.2, HI, respectively. Progeny chicks, 1-day-old, vaccinated with IBV showed high antibody titers than those of breed chickens. Those chicks were maintained protective antibody levels until 11-day-old. From 14-day-old, the antibody level decreased below protective levels. In ND, breeders serum antibody titers ELISA and Eiu were 30,200 GMT and 8.7 HI titer, respectively. On 1-day-old chicks, antibody levels was decreased to half in ELISA(16,270) compared with those of breeders, but In titers was 7.4. Progeny broilers, protective antibody level was maintained until 14- day-old by ELISA, but at 11-day-old by HI titers. After then, ND antibody titer was continuously decreased underdefense level. These result indicated that the ELISA method be more sensitive than HI titration to detect serum antibody level for IBV and NDV.
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using purified hemagglutinin of swine influenza virus (H1N1) as antigen was developed for detection of antibody to avian influenza virus (AIV). The sensitivity and specificity of a developed and commercial available ELISA kits were compared with those of agar gel precipitation (AGP) test and hemagglutination inhibition (HI) test using sera collected from chickens under condition of field exposure. The concentration of antigen, serum dilution and concentration of enzyme-conjugated secondary antibody in developed ELISA (S-ELISA) were 0.5ug/100ul, 1:200 and 0.03ug/100ul, respectively. The correlation coefficients between S-ELISA and commercial ELISA and HI titers were 0.419 and 0.533, respectively. A significant correlation (p < 0.01) was not found between HI and ELISA titers. The S-ELISA was found to be as more sensitive and specific than the AGP test, showing 86.8% sensitivity and 85.3% specificity. It is suggested that the ELISA using the SIV as antigen may be useful method as an investigating tool for AIV serological surveillance.
Lim, Yong Hwan;Phan, Le Van;Mo, In-Pil;Koo, Bon-Sang;Choi, Young-Ki;Lee, Seung-Chul;Kang, Shien-Young
한국동물위생학회지
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제40권3호
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pp.187-192
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2017
In this report, fifteen monoclonal antibodies (MAbs) against an avian influenza virus (H9N2 subtype) were newly produced and characterized. These MAbs proved to react to the epitopes of nucleocapsid protein (NP), hemagglutinin (HA), neuraminidase (NA) and non-structural protein 1 (NS1) of Korean H9N2 strain, respectively. Two HA-specific MAbs showed the ability to inhibit the hemagglutination activity of H9N2 subtype avian influenza virus when tested by hemagglutination inhibition (HI) assay. All MAbs did not cross-react with other avian-origin viruses (Newcastle disease virus, infectious bursal disease virus, infectious bronchitis virus and avian rotavirus) by immunofluorescence test or enzyme-linked immunosorbent assay. The MAbs produced in this study could be useful as the materials for diagnostics and therapeutics against Korean-lineage H9N2 virus infections.
To confirm the effect of food and water deprivation prior to Newcastle disease(ND) virus vaccination, three hundred chicks were divided into five groups with three replications. ND vaccine were sprayed to at 1 -day old chicks at commercial hatchery. Secondary and third vaccination was conducted at 2-week old and 24-day old chicks by LaSota strain. Control was conventionally vaccinated without withdrawing the food and water before or after vaccination. In group 2(G2) and 3(G3), LaSota strain was vaccinated to chicks before and after fasting the food and water for 3 and 2 hours, respectively. Group 4(G4) has the same fasting time of group 2, but supplemented the skim milk in vaccin dilution water. In group 5(G5), skim milk was added into group 3. Weight gain, feed intake and feed conversion were weekly measured for 5 weeks. Blood was collected from wing vein at 24 and 35 days of age. Each serum antibody level were measured by hemagglutination inhibition(HI) test. The average weight gain, feed intake, feed conversion of all group were not significantly different. Weight gain of each groups was 1910.30(control), 1875.28(G2), 1952.12(G4) and 1896.05(G5), respectively. Feed intake of all group was recorded at 3160.67(control), 3167.07(G2), 3189.48(G3), 3157.85(G4) and 3178.16(G5), respectively. The feed conversion of each groups was 1.655(control), 1.688(G2), 1.633(G3), 1.699(G4) and 1.676(G5), respectively. The HI titer of G4 was $ 5.50{\Pm}$1.40 and significantly higher than the other groups (p<0.05)(control : $4.36{\Pm}$1.87 , G2 : $5.18{\Pm}$2.14, G3 : $4.51{\Pm}$2.19, G : $5.28{\Pm}$1.58 at 35 days old. The results of this experiment indicated that two or three hours of fasting time before or after vaccination would be able to show the higher antibody level against ND virus.
Japanese encephalitis (JE) is an important zoonosis caused by the mosquito-transmitted JE virus (JEV), which is a causative agent of reproductive failure in pregnant sows. Detection of JEV antibodies in swine is performed by hemagglutination inhibition (HI), virus neutralization (VN), and the plaque reduction neutralization test (PRNT). The most stringent PRNT is the 90% endpoint PRNT ($PRNT_{90}$). These conventional assays are difficult to carry out in diagnostic laboratories with insufficient instruments or cell culture systems. An alternative assay that is easily conducted and time efficient is required. In this study, we improved the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (I-ELISA) with clarified antigen for the detection of JEV antibodies. The I-ELISA results obtained from 175 swine serum samples were compared with HI, VN, and $PRNT_{90}$ results. The sensitivity of I-ELISA was 91.8%, 95.0%, and 94.7% compared with HI, VN, and $PRNT_{90}$ results, respectively. The specificity of I-ELISA was 92.2%, 94.7%, and 94.7% compared with HI, VN, and $PRNT_{90}$ results, respectively. Moreover, the I-ELISA results were significantly correlated with the HI (r = 0.93), VN (r = 0.95), and $PRNT_{90}$ (r = 0.92) results. These results suggest that the improved I-ELISA is useful for serosurveillance of JEV in swine.
This study was performed to monitor the level of serum canine parvovirus(CPV) antibody titers in adult dogs throughout the Korea from January 2003 to April 2004. A total of clinically healthy 885 dogs between 1 year and 17 years old were included in this study. Serum antibody titers against CPV were measured by means of hemagglutination inhibition(HI) titers at the time dogs were brought to the hospital for revaccination. Most of dogs had been primarily vaccinated or previously revaccinated. Dogs were grouped by age, breed, sex, and primary vaccination and revaccination to determine whether these factors were associated with antibody titers. Serum CPV titers ${\geq}80$ were considered protective. Protective antibodies against CPV were present in 95.0% of the population. Breed, age, and primary vaccination and revaccination were not significantly associated with serum CPV antibody titers. But sex was significantly associated with CPV antibody titers. The results of this study have shown that there is a need to reconsider the annual revaccination strategy against CPV infection.
To study the immunomodulatory effect of aquapuncture with canine parvovirus killed vaccine, the vaccine was inoculated into the dogs twice with on 2-week interval. The 6 dogs in the experimental group were inoculated through the Jiao-Chao acupoint, and 5 dogs in the control group were done subcutaneously. The antibody titer was determined by the hemagglutination inhibition test. The HI titers of the experimental group showed significantly higher on days 21 and 28 than those of the control group. The biochemical test on serum total protein, protein fractions and the A/G ration showed a slightly increased in $\gamma$-globulin on days 21 and 28. The hematological findings on total leukocytes and differential counts showed no significance. It was thought that the aquapuncture of the canine parvovirus killed vaccine through the Jiao-Cho acupoint may stimulate the antibody production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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