We have studied an activation mechanism of $pp60^{c-src}$ protein tyroslne kinase (PTK) by ginsenoside-$Rg_1$ (G-$Rg_1$ ) in NIH(pMcsrc/foc)B c-src overexpressor cells. It was previously reported that G--$Rg_1$ stimulated the activation of c-src kinase at 20 pM with a 18 hr-incubation, increasing the activity by 2-4-fold over that of untreated control, and this effect was blocked by treatments of in- hibitors of either protein synthesis (cycloheximide) or RNA synthesis (actinomycin D) (Hong, H.Y. et at. Arch. Pharm. Res. 16, 114 (1993)). However, an amount of c-src protein itself in wild-type cells was not changed by G-$Rg_1$. When the cells mutated at one or two tyrosine residue(s) (Y416/527) that are important sites to regulate the kinase activity were treated with G-$Rg_1$, increases both in the activity of c-src kinase and in the expression of the protein were not observed. In addition, removal of extracellular calcium ion by EGTA or inhibition of PKC by H-7 canceled the G-$Rg_1$-induced activation of the kinase. Although the activation was little affected by G-$Rg_1$ with a calcium ionophore A23187, it was synergistically stimulated by treatment of G-Rgl and PMA, a PKC activator. Taken together, these results suggest that the activation of c-src kinase by G-$Rg_1$ is caused by an increase in the specific activity of the kinase, but not in amount of it, and is involved with both collular calcium ion and PKC. Further the increase in the specific activity of c-src kinase may result from altered phosphorylation at tyro-416 and -527.
Shen, Wenwen;Wei, Yingjie;Tang, Daoquan;Jia, Xiaobin;Chen, Bin
Journal of Ginseng Research
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v.41
no.1
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pp.78-84
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2017
Background: In the present study, metabolite profiles of ginsenosides Rk1 and Rg5 from red ginseng or red notoginseng in zebrafish were qualitatively analyzed with ultraperformance liquid chromatography/quadrupole-time-of-flight MS, and the possible metabolic were pathways proposed. Methods: After exposing to zebrafish for 24 h, we determined the metabolites of ginsenosides Rk1 and Rg5. The chromatography was accomplished on UPLC BEH C18 column using a binary gradient elution of 0.1% formic acetonitrile-0.1% formic acid water. The quasimolecular ions of compounds were analyzed in the negative mode. With reference to quasimolecular ions and MS2 spectra, by comparing with reference standards and matching the empirical molecular formula with that of known published compounds, and then the potential structures of metabolites of ginsenosides Rk1 and Rg5 were acquired. Results: Four and seven metabolites of ginsenoside Rk1 and ginsenoside Rg5, respectively, were identified in zebrafish. The mechanisms involved were further deduced to be desugarization, glucuronidation, sulfation, and dehydroxymethylation pathways. Dehydroxylation and loss of C-17 residue were also metabolic pathways of ginsenoside Rg5 in zebrafish. Conclusion: Loss of glucose at position C-3 and glucuronidation at position C-12 in zebrafish were regarded as the primary physiological processes of ginsenosides Rk1 and Rg5.
Kyurae Kim;Myung-Ho Kim;Ji In Kang;Jong-In Baek;Byeong-Min Jeon;Ho Min Kim;Sun-Chang Kim;Won-Il Jeong
Journal of Ginseng Research
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v.48
no.1
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pp.89-97
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2024
Background: Ginsenoside F2 (GF2), the protopanaxadiol-type constituent in Panax ginseng, has been reported to attenuate metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease (MASLD). However, the mechanism of action is not fully understood. Here, this study investigates the molecular mechanism by which GF2 regulates MASLD progression through liver X receptor (LXR). Methods: To demonstrate the effect of GF2 on LXR activity, computational modeling of protein-ligand binding, Time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) assay for LXR cofactor recruitment, and luciferase reporter assay were performed. LXR agonist T0901317 was used for LXR activation in hepatocytes and macrophages. MASLD was induced by high-fat diet (HFD) feeding with or without GF2 administration in WT and LXRα-/- mice. Results: Computational modeling showed that GF2 had a high affinity with LXRα. LXRE-luciferase reporter assay with amino acid substitution at the predicted ligand binding site revealed that the S264 residue of LXRα was the crucial interaction site of GF2. TR-FRET assay demonstrated that GF2 suppressed LXRα activity by favoring the binding of corepressors to LXRα while inhibiting the accessibility of coactivators. In vitro, GF2 treatments reduced T0901317-induced fat accumulation and pro-inflammatory cytokine expression in hepatocytes and macrophages, respectively. Consistently, GF2 administration ameliorated hepatic steatohepatitis and improved glucose or insulin tolerance in WT but not in LXRα-/- mice. Conclusion: GF2 alters the binding affinities of LXRα coregulators, thereby interrupting hepatic steatosis and inflammation in macrophages. Therefore, we propose that GF2 might be a potential therapeutic agent for the intervention in patients with MASLD.
Kim, Sung-Dan;Cho, Tae-Hee;Han, Eun-Jung;Park, Seoung-Gyu;Han, Chang-Ho;Jo, Han-Bin;Choi, Byung-Hyun
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.40
no.2
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pp.123-128
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2008
The MRLs (maximum residue limits) of DDT (DDD and DDE) in fresh ginseng, dried ginseng, and steamed red ginseng are set as low as 0.01 mg/kg, 0.05 mg/kg, and 0.05 mg/kg, respectively. Therefore, this study was undertaken to develop a simple and highly sensitive analysis method, as well as to reduce interfering ginseng matrix peaks, for the determination of DDT isomers (o,p'-DDE, p,p'-DDE, o,p'-DDD, p,p'-DDD, o,p'-DDT, and p,p'-DDT) in fresh ginseng, dried ginseng, and steamed red ginseng at the 0.01 mg/kg level. The method used acetonitrile extraction according to simultaneous analysis, followed by normal-phase Florisil solid-phase extraction column clean-up. The purification method entailed the following steps: (1) dissolve the concentrated sample extract in 7 mL hexane; (2) add 3 mL of $H_2SO_4$; (3) vigorously shake on avortex mixer; (4) cetrifuge at 2000 rpm for 5 min; (5) transfer 3.5 mL of the supernatant to the Florisil-SPE (500 mg/6 mL);and (6) elute the SPE column with 1.5 mL of hexane and 10 mL of ether/hexane (6:94). The determination of DDT isomers was carried out by a gas chromatography-electron capture detector (GC-${\mu}$ECD). The hexane and ether/hexane (6:94) eluate significantly removed chromatographic interferences, and the addition of 30% $H_2SO_4$ to the acetonitrile extract effectively reduced many interfering ginseng matrix peaks, to allow for the determination of the DDT isomers at the 0.01 mg/kg level. The recoveries of the 6 fortified (most at 0.01 mg/kg) DDT isomers from fresh ginseng, dried ginseng, and steamed red ginseng ranged from 87.9 to 99.6%. The MDLs (method detection limits) ranged from 0.003 to 0.009 mg/kg. Finally, the application of this method for the determination of DDT isomers is sensitive, rapid, simple, and inexpensive.
Instrumental determination was performed for the analysis of residues of ethylene oxide(EO), ethylene chlorohydrin(ECH) and ethylene glycol(EG) in white ginseng powders which were deaerated for 30 min after EO fumigation. Gas chromatographic data showed that EO residues were 570 ppm in the immediate samples after deaeration and 170 ppm in the stored ones for 8 days at 30$\pm$1$^{\circ}C$, respectively, showing a decreasing tendency with elapsed time. On the other hand, ECH and EG residues in samples as the secondary products of EO were 17, 650 ppm and 727 ppm stored for one month, and 9, 595 ppm and 221 ppm stored for 3 months, respectively.
Journal of the Korean Applied Science and Technology
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v.26
no.3
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pp.248-262
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2009
This study is on the feasibility of use of glycoprotein in various areas such as cosmetics and food etc. by extracting, isolating and refining glycoprotein from carrots, red ginseng extract residue, sesame and pine needles using protease(pepsin) and by analyzing general characteristics and measuring various bioactivities. The results of analysis of nutritional composition showed protein contents of glycoprotein. In the analysis of constitutive amino acids, the ratio of contents of hydroxy proline and glycine, the characteristics of glycoproteins appeared similar and the contents of glutamic acid and aspartic acid appeared higher. As a result of measurement contents of total polyphenol and flavonoid, it showed that glycoprotein had more contents generally, and the effect of bioactivity of glycoprotein appeared higher although different kinds of glycoprotein showed a little DPPH radical and nitrite scavenging ability, total antioxidant capacity by ABTS, ACE inhibitory.
Kim, Ji Yoon;Kim, Hea Na;Saravanan, Manoharan;Heo, Seong Jin;Jeong, Haet Nim;Kim, Jang Eok;Kim, Kwan Rae;Hur, Jang Hyun
The Korean Journal of Pesticide Science
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v.18
no.3
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pp.130-140
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2014
Recently, some of the previous studies reported that tolclofos-methyl is still exist in ginseng cultivated soil, even though it is has been banned for ginseng. Therefore, the current study was aimed to examine the levels of absorption and translocation of tolclofos-methyl from ginseng cultivated soil to ginseng root and leaf stem for the period of 1 year. For this study, ginseng plants were transplanted in pots and treated with $5.0mg\;kg^{-1}$ of tolclofos-methyl (50% WP). At the end of each interval periods (every three months) the samples (soil, roots and leaf stems) were collected and analyzed the absorption and translocation levels of tolclofos-methyl using gas chromatography and mass spectrometry (GC-MS). The limit of quantitation of tolclofos-methyl was found to be $0.02mg\;kg^{-1}$ and 70.0~120.0% recovery was obtained with coefficient of variation of less than 10% regardless of sample types. In this study, a considerable amount of translocation of tolclofos-methyl residues were found in soil (4.28 to $0.06mg\;kg^{-1}$), root (7.09 to $1.54mg\;kg^{-1}$) and leaf stem (0.79 to $0.69mg\;kg^{-1}$). The results show that the tolclofos-methyl was absorbted and translocated from ginseng cultivated soil to ginseng root and ginseng leaf stem and found to be decreased time-coursely. Secondly, we were also analyzed soil, root and leaf stems samples from Hongcheon, Cheorwon, Punggi and Geumsan by GC-MS/MS (172 pesticides), LC-MS/MS (74 pesticides). In this study, 43 different pesticides were detected ($0.01{\sim}7.56mg\;kg^{-1}$) in soil, root and leaf stem. Further, tolclofos-methyl was detected 4 times separately in root sample alone which is less ($0.01{\sim}0.05mg\;kg^{-1}$) than their maximum residual limit (MRL) in ginseng. Consequently, the results from both studies indicate the residues of tolclofos-methyl found in ginseng cultivated soil and ginseng ensuring their safety level. Moreover, long-term evaluations are needed in order to protect the soil as well as ginseng free from tolclofos-methyl residues.
Residue levels of 10 kinds of organochlorine insectides in/on garlic produced in Chungnam area during $1982{\sim}1983$ were investigated. Residue levels ranged in $trace{\sim}0.004 ppm$ (aver. 0.002 ppm) for ${\alpha}-BHC$, $0.015{\sim}0.176 ppm$ (aver. 0.083 ppm) for ${\gamma}-BHC$, $0.001{\sim}0.008 ppm$ (aver. 0.005 ppm) for heptachlor, ND(not detected) ${\sim}0.006 ppm$ (aver. 0.003 ppm) for aldrin, $trace{\sim}0.011 ppm$(aver. 0.003 ppm) for ${\alpha}-endosulfan$, $ND{\sim}0.004 ppm$ (aver. 0.001 ppm) for heptachlor epoxide, $trace{\sim}0.002 ppm$(aver. 0.001 ppm) for dieldrin, $trace{\sim}0.008 ppm$(aver. 0.001 ppm) for ${\beta}-endosulfan$, and trace for p,p'-DDD and p,p'-DDT.
Water samples collected monthly between November 1982 and October 1983 from seven reserviors and a river in the periphery of Suwon, Korea were subjected to gas chromatographic analysis for PCBs and organochlorine insecticide residues. PCBs were positively detected in the most samples. The average residue levels of PCBs were found in the range of 0.009${\sim}$0.5 ppb while those of organochlorine insecticides were in the range of "not detected"${\sim}$0.008 ppb. The ratio of average residue levels of PCBs to those of total DDT was found to vary with sampling sites. The highest ratio of 500 was found in the water samples of Han River and the lowest in water of Won-chun Reservior. Both industrial and urban waste appear to be responsible for PCBs in the irrigation waters.
BACKGROUND: This study was performed to establishment the PHRLs of peach during cultivation period, and also to estimate biological half-lives for residues of fenarimol and flufenoxuron. METHODS AND RESULTS: The extracted samples of fenarimol were analyzed by GC-ECD and the flufenoxuron extracted samples were analyzed by HPLC-DAD. Recoveries of fenarimol at two fortification levels of 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg were $93.69{\pm}6.56$(%) and $94.45{\pm}1.60$ (%), respectively. And recoveries of flufenoxuron at two fortification levels of 0.1 mg/kg, 0.5 mg/kg were $106.73{\pm}5.90$(%) and $96.37{\pm}6.66$(%), respectively. CONCLUSION(S): The biological half-lives of fenarimol in single treatment and triple treatment were 3.5day and 3.8day. that of Flufenoxuron was also 7.1day and 4.9day, respectively. The PHRL of fenarimol were recommended as 1.5 mg/kg for 10day before harvest and the PHRL of flufenoxuron were recommended as 1.4 mg/kg for 10day before harvest.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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