International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.9
no.1
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pp.127-130
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2004
We describe here the cloning and characterization of a cDNA encoding a putative myosin light chain-2 (MLC-2) from the mole cricket, Gryllotalpa orientalis. The G. orientalis MLC-2 cDNA sequences comprised of 615 bp with 205 amino acid residues with a calculated molecular weight of approximately 23 kDa. The deduced protein sequence of G. orientalis MLC-2 cDNA showed 64% and 54% identity to Drosophila melanogaster MLC-2 and D. yakuba MLC-2, respectively. Northern blot analysis confirmed the muscle-specific expression of G. orientalis MLC-2.
Several lines evidence indicate that microtubule depolymerization initiates DNA synthesis or enhances the effects of serum or purified growth factors in many types of fibroblasts. Yet little is known about the intracellular events responsible for the mitogenic effect of microtubule disrupting agents. The effects of antitubulin agents on DNA synthesis in sparse and dense cultures in the presence or absence of serum and possible involvement of G-proteins in their mitotic action were examined. In these studies, colchicine by itself appeared to be mitogenic only for confluent quiesecent human lung fibroblasts. In sparse culture, however, colchicine inhibited serum-stimulated DNA synthesis. Colcemid, another antitubulin agent, showed similar effects of growth inhibition and stimulation in sparse and confluent cultures while lumicolhicine, inactive colchicine, did not. The mitogenic effect of two antitubulin agents, colchicine and colcemid, was partially inhibited by pertussis toxin. These data suggest that microtubular integrity is associated with the expression of either negative or positive control on DNA synthesis and mitogenic effect of antitubulin agents may be partially mediated by pertussis toxin-sensitive G protein.
Gnetum (Gnetaceae, Gnetales) is a gymnosperm genus with ca. 35 species distributed in tropical forests around the world. Due to its dioecious habit and lack of diagnostic characters from vegetative tissue, the identification of Gnetum species is not easy without seeds or reproductive structures. To identify and verify their phylogenetic positions, we applied DNA barcoding to Cambodian Gnetum collections gathered between 2010 and 2015, with previously designed cp matK gene primers. We newly sequenced partial matK sequences from 72 Gnetum collections, 43 out of 72 from Cambodia, and analyzed 115 Gnetum accessions using the neighbor-joining method. The resulting neighbor-joining tree categorized Cambodian Gnetum samples into three clades of species: G. macrostachyum, G. montanum, and G. aff. gracilipes. The recognition of G. aff. gracilipes in Cambodia is reported here for the first time. Taxonomic information for the three recognized Cambodian Gnetum species is provided and the benefits of the taxonomic reevaluation assisted by DNA barcoding are emphasized in this work.
Sesaminol in sesame seed was postulated to have antitumor activity. The present study was performed to characterize the role of crude sesaminol extracted from sesame seed (Sesame Crude Sesaminol; SCS) on inhibiting the in vitro growth of human leukemia HL-60 cells. SCS inhibited the growth of human leukemia HL 60 cells in culture and macromolecular synthesis in a dose and time dependent manner. The cytostatic range of SCS concentration was found to be 60 to 100 $\mu\textrm{g}$/ml. SCS concentration greater than 200 $\mu\textrm{g}$/mlwere cytocidal to HL-60 cells. When SCS concentraction was 6 $\mu\textrm{g}$/mland 50 $\mu\textrm{g}$/ml the synthesis of HL-60 cells was inhibited by 35% for DNA, 6% for RNA and 5% for protein and 83% for DNA, 76% for RNA and 60% for protein. Of specific interest was the irreversible effect of SCS in inhibiting DNA synthesis of HL-60 cells. This was evidenced from the fact that, even after washed with PBS three times, preincubated HL-60 cells still showed the inhibited DNA synthesis.
콩 불마름병균 Xanthomonas campestris pv. glycines 8ra는 X. c. pv. vesicatoria에 길항력이 있는 bacteriocin인 glycinecin을 생성 분비한다. Bacteriocin 생성 분비 능력이 있는 콩 불마름병균을 효과적인 생물학적 방제원으로 활용하기 위해서는 좀더 체계적인 연구가 필요하여, bacteriocin 생성에 관계되는 유전자의 분리를 시도하였다. 약 2,000개의 Xanthomonas campestris pv. glycines 8ra cosmid library에서 bacteriocin의 생성 분비 능력을 조사하여 다섯 개의 clone을, pG011, pG0113, pG33과 pG35, 선발하였다. 그중 한 clone pG08을 임의로 선택하여 plasmid DNA를 분리하였다. Plasmid pG08에서 약 6.0 kb의 DNA를 떼어내어 다른 plasmid vector에 넣은 subclone pBL5는 bacteriocin의 생성 분비 능력이 있었다. Plasmid pG08을 제한효소 처리후 다시 접함시켜 만든 몇 개의 subclone과 pBL5의 제한효소 지도를 비교 분석한 결과 약 3.0 kb의 BamHI-HindIII 부분의 DNA가 bacteriocin의 생성에 관계함을 알았다.
Journal of Korean Society of Occupational and Environmental Hygiene
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v.3
no.1
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pp.14-21
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1993
N-Heterocyclic aromatics (NHA) are widely occurring environmental pollutants formed during the pyrolysis of nitrogen-containing organic chemicals. NAH are found in significant amounts in tobacco condensates, synthetic fuels, polluted river sediment, and effluents from the heating of coal. Following topical application 7H-dibenzo[c, g]carbazole (DBC) induces cancer in liver as well as skin, indicating that dermal exposure can lead to systemic effect. DBC and dibenz[a,j]acridine (DBA) are examples of NHA. The potency of many carcinogenic compounds is related, at least in part, to the efficiency of their biological activation. We undertook studies to determine which initial metabolites lead to the formation of high levels of carcinogen-DNA adducts in vivo. DBC and DBA's, DBA, trans-DBA-1,2-dihydrodiol (DBA-1,2-DHD), trans-DBA-3,4-dihydrodiol (DBA-3,4-DHD), and trans-DBA-5,6-dihydrodiol (DBA-5,6-DHD), were applied to the skin of mice. There were six adducts that were related to DBC application. These addusts were seen in the target organ, liver at high levels, but at very low levels in non-target organs, skin, lung and kidney. In skin, DBA produced two distinct adducts. The same two adducts were seen when DBA-3,4-DHD was applied. In addition the total adduct level elicited by DBA-3,4-DHD higher than that of parent compound. Two adducts were seen when DBA-5,6-DHD was applied, but these were very different from adducts seen with DBA. These results suggested that activation of DBA to DNA-binding compounds in skin includes initial formation of DBA-3,4-DHD.
The mitotic cycle duration(MCD) and component phase periods of rice(Oryza sativa L.) root meristem cells on the different salt concentrations were investigated by using of tritiated thymidine. The time interval between the maxima of sequential mitotic appearances of marked cells was used as criteria in measuring the MCD of rice. The MCD of rice cultivars 'Seomjinbyeo and Chilseongbyeo' at 0.0%, 0.3%, and 0.6% of salt concentrations appeared the same period as 12hr. The durations of component phase of rice cultivar 'Seomjinbyeo' were the almost same periods at 0.1%, 0.3%, and 0.6% of salt, but in 'Chilseongbyeo' cultivar the G1 and G2 periods were shorter while the S period was longer at 0.3% and 0.6% of salt. Deoxyribonucleic acid(DNA) and protein synthesis were increased while ribonucleic acid(RNA) synthesis was decreased with increasing salt concentrations at Chilseombyeo roots. In Seomjinbyeo roots, DNA and RNA synthesis were decreased while protein synthesis was increased with increasing salt concentrations. These results suggest that DNA, RNA, and protein synthesis may not affect the MCD in rice, but the increase of protein synthesis may be related to the salt tolerance of rice.
Molecular analyses of natural microbial communities are often dependent upon the obtainments of pure nucleic acids. The four methods (elution after agarose gel electrophoresis, G-75 microspin columns, hydroxyapatite mi-crospin columns, and polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) microspin columns) were compared for the removal of PCR-inhibitory humic substances from the crude DNA extracts of marine sediment samples. The PVPP microspin columns have shown superior removal of humic substances from the crude DNA extract of marine sediment samples, with yield of $4.8{\mu}g/g$ (dry weight of sediment). The purified DNA by this rapid method was pure enough to amplify 1.5 kb fragment corresponding almost full length of 16S rRNA genes.
Jang, Tae Won;Kim, Ye Rang;Lee, Sung Hyeon;Kim, Do-Wan;Park, Jae Ho
The Korea Journal of Herbology
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v.30
no.2
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pp.31-36
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2015
Objectives : In this study, we demonstrated the antioxidant activities and the inhibitory effect on oxidative DNA damage of ethyl acetate fractions extracted from Sophorae Flos and Sophorae fructus. Methods : Sophorae Flos and Sophorae fructus were extracted with methanol(MeOH) and divided to Petroleum ether, Ethyl acetate(EtOAC) and Water fraction. The antioxidant activities were conducted by the 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl(DPPH) radical, 2, 2'-Azine-bis(3-ethylbenzothiazoline-6 sulfonic acid) diammonium salt(ABTS) radical scavenging assay, $Fe^{2+}$ chelating assay and Reducing power assay. The inhibitory effect of DNA damage were characterized on ${\varphi}$ X-174 RF I plasmid DNA cleavage assay. In addition, we analyzed the Total phenol contents and the Vitamin C contents of Sophorae Flos and Sophorae fructus. Results : The results of DPPH were 92.71% and 94.72%, ABTS were 87.16% and 62.44%, and $Fe^{2+}$ chelating were 95.81% and 85.11% at $200{\mu}g/m{\ell}$ of Sophorae Flos and Sophorae fructus respectively. The Sophorae Flos showed stronger effect than Sophorae fructus in Reducing Power assay. Total phenol content was 111.77 mg/g and 122.54 mg/g, and Vitamin C content was 2.59 mg/g and 3.03 mg/g. Also both Sophorae Flos and Sophorae fructus have inhibitory antioxidant effect on ${\varphi}$ X-174 RF I plasmid DNA cleavage assay. Conclusions : Over all, this study suggests that Sophorae Flos and Sophorae fructus can be used as not only effective antioxidant but also natural medicine.
Growth and DNA synthesis inhibitory effects of doenjang methanol extract and its solvent fractions on AGS human gastric adenocarcinoma cells, Hep 3B human hepatocellular carcinoma cells, HT-29 human colon cancer cells and MG-63 human osteosarcoma cells were studied. The treatment of doenjang methanol extract ($ 200{\mu}g/ml $) with the AGS, Hep 3B, HT-29 and MG-63 cancer cells after 6 days of incubation inhibited the growth of cancer cells by $32\%$, $51\%$, $84\%$ and $33\%$, respectively. To separate active compounds of doenjang, doenjang methanol extract was fractionated with dichloromethane, ethylacetate, and buthanol. Among the solvent fractions, the dichloromethane and ethylacetate fractions showed the highest growth inhibitory effects on various cancer cells. For example, the dichloromethane and ethylacetate fractions ($200a{\mu}g/ml$) sig-nificantly inhibited the growth of various cancer cells by $89\∼96\%$ and$62\∼86\%$, respectively. DNA synthesis of AGS and Hep 3B cancer cells was significantly inhibited by adding dichloromethane fraction ($200{\mu}g/ml$) up to $94\%$ and $80\%$, respectively. Similarly, the ethylacetate fraction ($ 200\mug/ml $) showed a $ 95\% $ inhibition rate of DNA synthesis in AGS cells. These results suggest that the dichloromethane and ethylacetate fractions have specific active compounds, which will explain this anticancer effect of doenjang.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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