For cultivation on sawdust-bed of oak-mushroom until present time, inoculation of spawn on sawdust bed has been performed by sawdust spawn. But, liquid spawn may have advantages for rapid mass production of spawn, and now, sawdust-cultivation by liquid spawn inoculation should be applied instead of sawdust spawn. Therefore, investigations were performed to evaluate the effect of sawdust-cultivation by liquid spawn inoculation. The results were as follows: 1. When 11 kinds of liquid media were applied, the oak-mushroom culture medium was the most excellent in growth. Most suitable temperature at PDA was $25^{\circ}C$, and $22.5\sim27.5^{\circ}C$ in range were optimal for liquid culture. In liquid culture, amount of mycelial growth increases rapidly up to 40 days of cultivation. Incubation at fermentor brought yield of 106mg dry mycelia per 40ml media after 17 days. 2. In 1l-spawn bottle, growth of mycelium by inoculation of 20ml-liquid spawns were faster than 6g-sawdust spawn in spread of mycelia. On 2kg-bag culture, inoculations of 10ml-, 20ml- and 30ml-liquid spawns were all slower than 20g-sawdust spawn in mycelial spread. So, amount increasement in ampunt of liquid spawn should be discussed. Yields of mushrooms until third sproutings of 2kg-bag culture were 580g in 30ml-liquid spawn inoculation, but 510g, 486g and 470g from 20g-sawdust spawn, 20ml-liquid spawn and 10ml-liquid spawn, respectively. Thus, 30ml-liquid spawn inoculation was highest in yield.
A strain (designated SK3l) which produces an excellent adsorption substance was isolated from soil samples and identified as Bacillus specied. The major adsorption substance (biosorbent SK3l) produced by Bacillus sp. SK31 was purified by ethanol precipitation and cetylpyridinium (CPC) precipitation. The adsorption charactics of zinc and lead ions on bioadsorbent SK3l were investigated. The equilibrium isotherms showed that bioadsorbent SK3l took up zinc and lead from aqueous solutions to the extent of about 52 mg/g and 112 mg/g. respectively. The culture conditions at the flask level of Bacillus sp. SK3l were investigated for the production of polysaccharide bioadsorbent, SK3l. The optimum pH and temperature for sorbent production were 7.5 and $30^{\circ}C$, respectively. The important carbon and nitrogen sources for sorbent formation were glucose and ammonium nitrate, respectively. In the optimized medium, sorbent production was improved three folds in comparison with the basal medium. In the jar fermenter, the highest sorbent production was obtained at 60 h cu1tivation time and the amount of biosorbent SK3l at that time was 9.2 g/$m\ell$.
CHOI DU BOK;KANG SI HYUNG;SONG YON HO;KWUN KYU HYUK;JEONG KYOUNG JU;CHA WOL SUK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.2
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pp.368-375
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2005
Batch cultures were carried out to optimize the exo-polysaccharide production by liquid cultures of Pleurotus ferulae. Among the various carbon sources, when $5\%$ of glucose was used, the maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration reached were 8.78 g/l and 3.59 g/l, respectively. Yeast extract and polypeptone were identified as the most suitable nitrogen sources. In particular, when a mixture of $1\%$ of polypeptone and $0.8\%$ of yeast extract was used, 9.52 g/l of mycelial growth and 4.09 g/l of exo-polysaccharide were obtained. In the case of mineral sources, K$_2$HPO$_4$ and MgSO$_4$$\codt$7H$_2$0 were found to be the best mineral sources for mycelial growth and exo-polysaccharide production. Under the optimized culture conditions, the agitation speed and aeration were investigated for mycelial growth and exopolysaccharide production in a jar fermentor. The maximum mycelial growth and exo-polysaccharide concentration at 1.5 vvm and 200 rpm obtained were 13.2 g/l and 4.95 g/l, respectively, after 10 days of culture, which were $76\%$ and $79\%$ higher than those of the basal medium. The specific growth rate was decreased with the increase of mycelial growth. However, the specific production rate of the exo-polysaccharide was proportionally increased with the specific growth rate. The proposed model profiles showed good agreement with the experimental results for the mycelial growth and exo-polysaccharide production. The specific production rate using the optimized medium was higher than that of basal medium.
Saccharomyces yeast spores are more resistant to drying and storage than vegetative cells. For the mass production of yeast spores, compressed yeast was directly inoculated into a sporulation medium (SM). The effects of inoculum size and the addition of rice wine cake (RWC) into SM on the sporulation were examined using flasks. With $1\%$ inoculum of compressed yeast, $1.45{\times}10^8/ml$ of asci was obtained. The addition of $0.5\%$ RWC into SM improved the cell growth and spore yield, and the number of asci formed was $2.31{\times}10^8/ml$. The effects of culture temperature, temperature-shift, and concentrations of inoculum, potassium acetate, and RWC on the sporulation were also evaluated using a jar fermentor. The optimum temperature for spore formation was $22^{\circ}C$ where the number of asci formed was $2.46{\times}10^8/ml$. The shift of culture temperature from initial $30^{\circ}C$ for 1 day to $22^{\circ}C$ for 3 days increased the number of asci formed to $2.96{\times}10^8/ml$. The use of $2\%$ (w/v) inoculum of compressed yeast, $2\%$ potassium acetate, and $1\%$ (w/v) RWC in SM with the shift of culture temperature of initial $30^{\circ}C\;to\;22^{\circ}C$ resulted in $90\%$ sporulation ratio and formation of $6.18{\times}10^8\;asci/ml$.
In the medium containing 7% rice powder, 0.15% $NH_4NO_3$ and 0.1% $MnSO_4$ with initial pH 6.0, the red pigment production by Monascus anka albidus was observed. The mycelium were cultured at $30^{\circ}C$ for 5 days with reciprocal shaking (130 rpm). As a carbon source, glutinous rice gave the highest production of pigment. Ammonium nitrate and $KH_2PO_4$ as a nitrogen source and phosphate source, respectively, stimulated best the production of the red pigment. The optimum C:N ratio was found to be 18:1. The production of the pigment by the strain was 2.6 mg/ml in a flask, but 1.8 mg/ml in 5l fermentor, respectively.
Ma Xingyuan;Zheng Wenyun;Wang Tianwen;Wei Dongzhi;Ma Yushu
Journal of Microbiology
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v.44
no.3
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pp.293-300
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2006
The Escherichia coli heat-labile enterotoxin B subunit (HLT-B) is one of the most powerful mucosal immunogens and known mucosal adjuvants. However, the induction of high levels of HLT-B expression in E. coli has proven a difficult proposition. Therefore, in this study, the HLT-B gene was cloned from pathogenic E. coli and expressed as a fusion protein with GST (glutathion S-transferase) in E. coli BL2l (DE3), in an attempt to harvest a large quantity of soluble HLT-B. The culture conditions, including the culture media used, temperature, pH and the presence of lactose as an inducer, were all optimized in order to obtain an increase in the expression of soluble GST-rHLT-B. The biological activity of the purified rHLT-B was assayed in a series of GMI-ELISA experiments. The findings of these trials indicated that the yield of soluble recombinant GST-rHLT-B could be increased by up to 3-fold, as compared with that seen prior to the optimization, and that lactose was a more efficient alternative inducer than IPTG. The production of rHLT-B, at 92 % purity, reached an optimal level of 96 mg/l in a 3.7 L fermentor. The specific GM1 binding ability of the purified rHLT-B was determined to be almost identical to that of standard CTB.
In order to produce cellulosic single cell protein from the cellulose, 163 strains of cellulose assimilating bacteria were isolated from 95 sources and one of them was screened by its strong cellulose assimilating activity. and was identified as Sporocytophaga congregate A-7. The optimum temperature and pH for cellulase production were $30^{\circ}C$ and 6.0, and the optimum temperature, pH and heat stability of the enzyme were $50^{\circ}C$, 7.0 and below $55^{\circ}C$. When the bacteria was cultured in fermentor, the specific growth rate was $0.034hr^{-1}$ and when the bacteria was mixed cultured with Candida guilliermondii var. guilliermondii, the specific growth rate of the bacteria and yeast were $0.06hr^{-1}$ and $0.08hr^{-1}$ respectively and total cell dry weight was $4{\sim}5g/l$.
To maximize the production of aminoglycoside-3'-phosphotransferase of E. coli ATCC 21990 carrying R factor which encodes aminoglycoside-3'-phosphotransferase (APH(3')) phosphorylating the 3'-hydroxyl group of aminoglycoside, mutants M1 and M2, media composition and several factors affecting the enzyme production during fermentation were studied. Although the specific activity of APH(3') produced by a mutant M1 was increased as much as four times than that of E. coii ATCC 21990, the growth rate was decreased. The increase of the enzyme production was obtained by increased biomass during fermentation. A mutant M2 was obtained to increase the cell growth rate. Mutant M2 cells were cultivated with optimal media and pure oxygen gas in a fed-batch mode of fermentor operation. The specific activity of APH(3') was decreased, but total enzyme activity of APH(3') was increased as much as two point five times than that of mutant MI.
To improve the erythritol productivity of Penicillium sp. KJ81, mutants were obtained using UV irradiation and NTG treatment Among these mutants, Penicillium sp. KJ-UV29 revealed no morphological changes, yet was superior to the wild strain in the following three points: (1) Penicillium sp. KJ-UV29 produced more erythritol than the wild strain under the same conditions, (2) no foam was produced during cultivation, unlike the wild strain, and (3) the mutant produced a Significantly lower amount of glycerol. Penirillium sp. KJ-UV29 produced as much as 15.1 g/L of erythritol, whereas the wild-type Penirillium sp. KJ81 only produced 11.7 g/L. Penicillium sp. KJ-UV29 only generated 6.1 g/L of glycerol, compared to 19.4 g/L produced by the wild strain. When investigating the optimal culture conditions for erythritol production by the mutant strain Penicillium sp. KJ-UV89, sucrose was identified as the most effective carbon source, and the mutant was even able to produce erythritol in a 70% sucrose-containing medium, although a 30% sucrose medium exhibited the highest productivity. The production of erythritol by Penirillium sp. KJ-UV29 was also significantly increased by the addition of ammonium carbonate, potassium nitrate, and sodium nitrate. Accordingly, under optimal conditions, Penicillium sp. KJ-UV29 produced 45.2 g/L of erythritol in a medium containing 30% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.5% (NH$_4$)$_2$C$_2$O$_4$, 0.1% KNO$_3$, 0.1% NaNO$_3$, and 0.01% FeSO$_4$ with 1 vvm aeration and 200 rpm agitation at 37$^{\circ}C$ for 7 days in a 5-L jar fermentor.
Optimized fermentation medium and cultural conditions for the production or exopolysaccharide KS-1 with Bacillus polymyxa KS-1 was following as; 30g g1ucose, 2.59g yeast extract, $2.5g KH_2PO_4, 0.5g NaCl, 0.3g MgSO_4.7H_20, 0.1g CaC0_3 0.05g, FeSO_4.7H_2O, and 0.05g MnS0_4 . 4H_20in 1 liter distilled water. The exopolysaccharide production was influenced by the by the temperature and pH, the optimal conditions for the production of exopolysaccharide KS-1 seemed to be $30^{\circ}C$ and pH 7.0, respectively. About $10.3g/\ell$ of maximum exopolysaccharide was obtained al the initial pH 7.0, $30^{\circ}C$, 2vvm of aeration rate and 400 rpm of impeller speed in a jar fermentor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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