State varibles were estimated for fermentations of K. marxianus under various dilution rates and dissolved oxygen concentrations. The number of elementary reaction stoichiometry with fixed coefficients was determined by singular variable decomposition. Stoichiometry with feasible physical meaning was obtained by target factor analysis. States of fermentations were estimated by linear quadratic programming. The process conditions of single cell production to maximize carbon source consumption were suggested.
Fed-batch fermentations were carried out in order to improve the efficiency of hirudin production by recombinant Saccharomyces cerevisiae. A fed-batch fermentation done with the optimized semi-synthetic medium resulted in a maximum hirudin concentration of 342mg/$\ell$ by keeping a galactose concentrations between 10 and 30g/$\ell$ which corresponded to a 11.4-fold increase in hirudin concentration compared with the simple bach fermentation done with the same medium. Comparison of the chromatographic pattern of proteins in the growth medium clearly showed that the use of the semi-synthetic medium is more advantageous for separation of hirudin than the case o fusing the complex medium. Continuous cell recycle fermentation done at dilution rate of 0.1h-1 and an inlet galactose concentration of 100g/$\ell$ yielded a maximum hirudin productivity of 19.1mg hirudin/$\ell$$.$h.
Park, Yong-Cheol;Kim, Chang-Sup;Kim, Chung-Im;Choi, Kyu-Hwan;Seo, Jin-Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.7
no.5
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pp.323-328
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1997
The recombinant Escherichia coli BL21(DE3)pLysE : pTCGT1 was grown to overproduce Bacillus macerans cyclodextrin glucanotransferase (CGTase) able to synthesize ${\alpha}$-cyclodextrin (CD) with a selectivity of 67%. A number of batch fermentations were performed to test the possibility of using lactose as an inducer of the E. coli T7 promoter system. A mixture of isopropyl ${\beta}$-D-thiogalactoside (IPTG) and lactose (1 : 1) gave a maximum CGTase activity of 2.4 U/ml, which was higher than the value obtained with induction by IPTG alone. Fed-batch fermentations involving a glucose-controlled growth period followed by a gene-expression phase with mixtures of IPTG and lactose were employed to achieve high cell density and thereby increase total CGTase activity. Optimized fed-batch fermentation using the modified inducer (IPTG : lactose=1 : 3) and 100 g/l yeast extract solution in the gene-expression phase resulted in a maximum CGTase activity of 62.9 U/ml and a final cell mass of 53.5 g/l, corresponding to a 31-fold increase in CGTase activity and a 29-fold increase in cell mass compared with the control batch fermentation.
A repeated batch fermentation system was used to produce ethanol using $Saccharomyces$$cerevisiae$ strain (NCIM 3640) immobilized on sugarcane ($Saccharum$$officinarum$ L.) pieces. For comparison free cells were also used to produce ethanol by repeated batch fermentation. Scanning electron microscopy evidently showed that cell immobilization resulted in firm adsorption of the yeast cells within subsurface cavities, capillary flow through the vessels of the vascular bundle structure, and attachment of the yeast to the surface of the sugarcane pieces. Repeated batch fermentations using sugarcane supported biocatalyst were successfully carried out for at least ten times without any significant loss in ethanol production from sugarcane juice and molasses. The number of cells attached to the support increased during the fermentation process, and fewer yeast cells leaked into fermentation broth. Ethanol concentrations (about 72.65-76.28 g/L in an average value) and ethanol productivities (about 2.27-2.36 g/L/hr in an average value) were high and stable, and residual sugar concentrations were low in all fermentations (0.9-3.25 g/L) with conversions ranging from 98.03-99.43%, showing efficiency 91.57-95.43 and operational stability of biocatalyst for ethanol fermentation. The results of the work pertaining to the use of sugarcane as immobilized yeast support could be promising for industrial fermentations.
Cavello, Ivana A.;Hours, Roque A.;Cavalitto, Sebastian F.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.8
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pp.1133-1139
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2013
Enzymatic decomposition of gelatin layers on used X-ray films and repeated utilization of the enzyme for potential application in silver recovery were investigated using keratinolytic serine proteases from Purpureocillium lilacinum LPS # 876. At pH 9.0, the enzymatic reaction was enhanced by the increase of enzyme concentration or by the increase of the temperature up to $60^{\circ}C$. Under the conditions of 6.9 U/ml, $60^{\circ}C$, and pH 9.0, hydrolysis of the gelatin layers and the resulting release of silver particles were achieved within 6 min. The protective effect of polyols against thermal denaturation was investigated. The presence of glycerol and propylene glycol increased enzyme stability. When the reusability of the enzyme for gelatin hydrolysis was tested, it could be seen that it could be effectively reused for more cycles when glycerol was added, compared with the enzyme without protective agents. The results of these repeated treatments suggested that a continuous process of recycling silver from used X-ray is feasible. Keeping in mind that recycling is (at the present time) needed and imperative, it can be remarked that, in this research, three wastes were successfully used: hair waste in order to produce serine proteases; glycerol in order to enhance enzyme thermal stability; and used X-ray films in order to recover silver and PET films.
Population changes of aerobic bacteria, yeasts, and lactic acid bacteria ware investigated during the fermentation of Kimchis containing 0, 1, 2, 4, and 6% garlic at $21^{\circ}C$. The numbers of aerobic bacteria increased during the first 2 days and decreased thereafter. The higher the garlic concentration of the Kimchis was, the smaller the increase of the aerobic bacterial population was during the initial periods of the fermentations. Garlic concentrations that showed the largest population difference between them after 2-days fermentation were 1% and 2%. The population of lactic acid bacteria also increased only during the first 2 days and was held thereafter. Lactic acid bacterial population increased more at higher garlic concentrations during the initial period of the fermentations and major microorganisms contributed to the increase were Lactobacillus brevis and low acid-producing lactbacilli. Changes of yeasts at the different garlic concentrations during the fermentations were not apparent.
Chemical production by anaerobic bacterial fermentations was an important microbiological topic in the past due to both fundamental and applied aspects related to acetone-butanol production prior to its replacement by chemical synthetic routes from petroleum. Presently, the depletion and price-escalation of petroleum has regenerated a great interest in the potential of anaerobic bacteria to transform the renewable resouces such as biomass and wastes into chemical feed-stocks and fuels.
Kim, Chang-Yong;Lee, Jin-Ha;Kim, Byung-Hoon;Yoo, Sun-Kyun;Seo, Eun-Seong;Cho, Kab-Su;Donal F. Day;Kim, Doman
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.7
no.4
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pp.234-236
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2002
A process for the production of mannitol from fructose (5% to 25%) using Leuconostoc mesenteroides NRRL B-1149 was investigated. Fermentations were carried out In batch or fed-batch fermentations without aeration at 28$\^{C}$, pH 5.0. When 5% fructose was used In batch culture fermentation, the yield of mannitol was 78% of that expected theoretically. When the frurtose concentration was Increased to 10%, the yield dropped to 59.6% of the theoretical value. However, In the fed-batch culture, using 10% fructose, the yield was 81.9% of the theoretical value. In a 15% fruttose fed-batch culture, with 5% fructose being added initially and the other 10% fructose being added as a continuous supply the final yield was 83.7% of the theoretical yield. When 20% fructose was used In the same manner, the yield was 89.5% of theoretical yield.
In order to investigate the effect of dissolved oxygen (DO) level on AVM $B_{1a}$ production by a high yielding mutant of Streptomyces avermitilis, five sets of bioreactor cultures were performed under variously controlled DO levels. Using an online computer control system, the agitation speed and aeration rate were automatically controlled in an adaptive manner, responding timely to the oxygen requirement of the producer microorganism. In the two cultures of DO limitation, the onset of AVM $B_{1a}$ biosynthesis was observed to casually coincide with the fermentation time when oxygen-limited conditions were overcome by the producing microorganism. In contrast, this phenomenon did not occur in the parallel fermentations with DO levels controlled at around 30% and 40% throughout the entire fermentation period, showing an almost growth-associated mode of AVM $B_{1a}$ production: AVM $B_{1a}$ biosynthesis under the environments of high DO levels started much earlier than the corresponding oxygen-limited cultures, leading to a significant enhancement of AVM $B_{1a}$ production during the exponential stage. Consequently, approximately 6-fold and 9-fold increases in the final AVM $B_{1a}$ production were obtained in 30% and 40% DO-controlled fermentations, respectively, especially when compared with the culture of severe DO limitation (the culture with 0% DO level during the exponential phase). The production yield ($Y_{p/x}$), volumetric production rate (Qp), and specific production rate (${\bar{q}}_p$) of the 40% DO-controlled culture were observed to be 14%, 15%, and 15% higher, respectively, than those of the parallel cultures that were performed under an excessive agitation speed (350 rpm) and aeration rate (1 vvm) to maintain sufficiently high DO levels throughout the entire fermentation period. These results suggest that high shear damage of the high-yielding strain due to an excessive agitation speed is the primary reason for the reduction of the AVM $B_{1a}$ biosynthetic capability of the producer. As for the cell growth, exponential growth patterns during the initial 3 days were observed in the fermentations of sufficient DO levels, whereas almost linear patterns of cell growth were observed in the other two cultures of DO limitation during the identical period, resulting in apparently lower amounts of DCW. These results led us to conclude that maintenance of optimum DO levels, but not too high to cause potential shear damage on the producer, was crucial not only for the cell growth, but also for the enhanced production of AVM $B_{1a}$ by the filamentous mycelial cells of Streptomyces avermitilis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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