Cold stress influence plant growth through a wide range of growth characters. Adverse effects of low temperature to plant growth come from results of colligative and complex physiological responses to cold stress. To evaluate more exactly cold tolerance of crop plant, it is needed to observe physiological changes induced by cold stress and to analyze relationships between intraspecific variations in physiological factors related to cold tolerance and the extent of cold tolerance in the field. Therefore, the composition and unsaturation ratio of fatty acids in phospholipid, a constituent of membrane, the transition-temperature in respiratory activity of mitochodria, the chlorophyll fluorescence as a factor related to photosynthesis were investigated in rice plant and data on these factors were compared with the degree of cold tolerance obtained in the field experiment. Also, effects of hardening and Mn++ treatment were evaluated as a method to reduce chilling injuries. The unsaturation ratio of fatty acids, whether rice plants were grown in a natural condition or under the chilling stress, was higher in the cold- tolerant varieties and was significantly correlated with the degree of cold tolerance (1-9) observed in the field experiment. And it was also increased by chilling treatment or hardening treatment, due to a reduction in palmitic acid content and an increase in linolenic acid content. The transition-temperature of respiratory activity of mitochodria isolated from etiolated rice seedlings ($25^{\circ}C$, two week-grown in the dark), was correlated with the degree of cold tolerance in the field, cold -tolerant varieties showing a lower transition-temperature. It was not influenced by growth stages. The intensity of chlorophyll fluorescence was highly correlated with the degree of cold tolerance, cold-tolerant varieties having a higher fluorescence intensity. By foliar application of Mn, the transition-temperature of respiratory activity was lowered as much as 0-2$^{\circ}C$ in all tested varieties. Soil application of Mn induced more significant effect in cold-susceptible varieties with a possibility of reducing chilling injuries. On the whole, there were high correlationships among the degree of cold tolerance, the unsaturation ratio of fatty acids in phospholipid, the transition- temperature of respiratory activity and chlorophyll fluorescence except for a few varieties. The transition- temperature of respiratory activity appeared to be negatively correlated with the unsaturation ratio of fatty acids. and the chlorophyll fluorescence to be positively correlated with the unsaturation ratio. This implies that these physical and physiological factors were very closely related to cold tolerance and can be used as an effective index of the evaluation of cold tolerance of crop plant. But other factors as well as three factors discussed above are needed to be considered colligatively and altogether with a systematic analysis for the more exact evaluation of cold tolerance. in rice cultivars. in rice cultivars.
Five acid hydrazides as precolumn fluorescence derivatization reagents for carboxylic acids in HPLC, which have the benzofuran or benzothiazole moiety conjugated to a furan, thiophene or oxazoline ring, were synthesized and examined in view of reactivity, separability and sensitivity. Of these hydrazides, 2-(5-hydrazinocarbonyl-2-oxazolyl)-5,6-dimethoxybenzothiazole (BTOH) was most favorable. The detection limit of lauric acid as a model acid was 0.1 pmol per $10-{\mu}l$ injection volume at S/N=3, which was roughly equal to that of an analogous compound, 2-(5-hydrazinocarbonyl-2-furyl)-5,6-dimethoxybenzothiazole. The reagent allowed rapid assays of carboxylic acids ($C_{12:0}-C_{20:4}$) within 20 min with satisfactory scparability. The method was applied to the determination of fatty acids in human sera from healthy volunteers as well as from patients with diabetes or thyroid dysfunction.
Decay of the spin label attached to cytochrome c or to stearic acid has been measured by electron paramagnetic resonance (EPR) spectroscopy to monitor membrane oxidation induced by cytochrome c-membrane interaction. Binding of cytochrome c sequestered the acidic phospholipids and membrane oxidation was efficient in the order linoleic oleic>stearic acid for a fatty acid chain in the acidic phospholipids. The spin label on cyt c was destroyed at pH 7 whereas that on stearic acid embedded in the membrane was destroyed at pH 4, presumably due to different modes of cyt c-membrane interaction depending on pH. Interestingly, cyt c also interacts with phosphatidylethanolamine, an electrically neutral phospholipid, to cause rapid membrane oxidation. Both EPR and fluorescence measurements indicated that electrostatic interaction is at least partially responsible for the process.
Journal of agricultural medicine and community health
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v.16
no.2
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pp.141-153
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1991
Free amino acid(FAA), free fatty acid(FFA), and amino acid obtained by hydrolysis of protein components of cystic fluid(CF) of Cysticercus cellulosae in pig and man were analyzed. FFA was analyzed by gas chromatography using Varian model 2700, and flame ionization detector with 6 feet${\times}$1/4inch glass column. Flow rate of $N_2$ was 30 ml/min, $H_2$ was 30 ml/min, air was 350 ml/min respectively and chart speed was 1 cm/min. Amino acid was analyzed by high performance liquid chromatography using Waters model 441, and fluorescence detector at 338nm/425nm with column of amino acid analyzer. Buffer A of mobile phase was pH 3.05 and pH of buffer B was 9.6 respectively. The results obtained were as follows : Seven FFAs containing 12~18 carbons were detected : Saturated fatty acids were lauric acid ($C_{12}$), myristic acid($C_{14}$), palmitic acid($C_{16}$), Stearic acid($C_{18}$). Unsaturated fatty acids were oleic acid($C_{12}^{=1}$), linoleic acid($C_{12}^{=2}$), and one unidentified fatty acid was detected. Generally much more quantity of FFA was determined in CF obtained from pig than that from man. FFA of the largest quantity was palmitic acid; 0.078 mg/ml. Eighteen FAAs were detected and the largest quantity was alanine. Ouantity of alanine was 386 ug/ml in CF from pig 108 ug/ml in CF from man respectively. while histidine in CF from pig was 273 ug/ml, that from man was only 4.3 ug/ml. Eighteen amino acids were identified by hydrolysis of protein in CF from man. But, histidine was not identified in CF from pig. Amino from pig and ug/ml from man.
Phospholipase C from Clostridium perfringens is known to catalyze the hydrolysis of phospholipids in biological membranes. In this study, a simple and sensitive method for assaying phospholipase C was developed by using liposomes entrapping calcein as a fluorescent marker. Phospholipase C-induced lysis of liposomes was determined by measuring the fluorescence intensity of calcein released out from liposomes, Various liposomes with different compositions were prepared by reverse-phase evaporation method to investigate the effect of liposomal composition on the lytic activity of phospholipase C. The calcein-entrapping efficiency of liposomes was affected by the chain length of fatty acid in phosphatidylcholine constituting liposomes. The lytic activity of phospholipase C was the highest against liposomes prepared with eggPC. The lytic activity decreased with increasing chain length of fatty acid in phosphatidylcholine. Incorporation of cholesterol more than 20% into the liposomal bilayer inhibited the phospholipase C-induced lysis. The lysis of liposomes was more greatly increased by the addition of 10 mM of calcium. The lytic activity of phospholipase C was also affected by the surface charge of liposomes. Taken together, it was concluded that reverse-phase evaporation vesicles composed of dipalmitoylphosphatidylcholine and cholesterol in the molar ratio of 9 : 1 allowed to detect the lowest concentration of phospholipase C (0.10 μg/assay volume). This study suggested that the use of liposomes can provide a simple, sensitive and inexpensive method for assaying phospholipase C.
This study was to detect the expression of heart fatty acid-binding protein (H-FABP) and adipocyte fatty acid-binding protein (A-FABP) gene mRNA in different tissues of Rugao and Luyuan chickens at 56 d and 120 d by real-time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase-chain reaction (FQ-RT-PCR). The primers were designed according to the sequences of HFABP, A-FABP and GAPDH genes in Gallus gallus, which were used as target genes and internal reference gene, respectively. The levels of H-FABP and A-FABP gene expression were detected by SYBR Green I FQ-RT-PCR. The relative H-FABP and A-FABP gene mRNA expression level was calculated with 2-$^{{\Delta}Ct}$. Melting curve analysis showed a single peak of three genes. Intramuscular fat (IMF) content in breast muscle and leg muscle of the two chicken breeds at 120 d was higher than at 56 d. IMF content in breast muscle and leg muscle at 56 d and 120 d in Luyuan was significantly higher than in Rugao, however, abdominal fat of Luyuan was significantly lower than that of Rugao. The relative H-FABP gene mRNA expression level in cardiac muscle was the highest in both chicken breeds. The relative H-FABP and A-FABP gene expression of different tissues in Luyuan was higher than in Rugao. H-FABP gene mRNA expression had a negative effect on IMF of leg and breast muscles, and was significantly negatively correlated with IMF content. The relative A-FABP gene mRNA level in abdominal fat was higher than in liver. The A-FABP gene mRNA was not expressed in leg, breast and cardiac muscles. A-FABP gene mRNA expression level was significantly positively correlated with abdominal fat and had a significant effect on abdominal fat but not IMF content.
The purpose of this study was to establish a high-throughput assay method capable of estimating specific lipase activity at oil-water interface. The method is based on the fact that fluorescence intensity of fluorescein is affected by pH. The pH-dependence might be used to monitor pH change caused by the release of fatty acid through the action of lipase. Assay was performed by incubating a reaction mixture containing oil emulsion, fluorescein and enzyme and by monitoring fluorescence intensity periodically. Fluorescence intensity decreased linearly with a rate proportional to the enzyme amount. Linear relationship was observed between enzyme amount and reaction rate which was calculated from a graph of fluorescence change against time. The assay was possible at different pH conditions in the range of pH 6.0-8.0.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.42
no.10
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pp.1618-1628
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2013
Relationships between fatty acids and tocopherols in conventional and genetically modified peanut cultivars were studied by gas chromatography with flame ion detector and high performance liquid chromatography with fluorescence detection. Eight fatty acids and four tocopherol isomers in the sample set were identified and quantified. Oleic acid and linoleic acid are major fatty acids and the ratio of oleic and linoleic acids ranged from 1.11 to 16.26. Tocopherols contents were 6.76 to 12.24 for ${\alpha}$-tocopherol (T), 0.08 to 0.39 for ${\beta}$-T, 5.28 to 15.02 for ${\gamma}$-T, and 0.17 to 1.17 mg/100 g for ${\delta}$-T. Correlation coefficient (r) for fatty acids and tocopherols indicated a strong inverse relationship between oleic & linoleic acids (r=-0.97, P<0.05) and positive relationships between palmitic & linoleic acids (r=0.95, P<0.05) and ${\gamma}$-T & ${\delta}$-T (r=0.83, P<0.05). Principal component analysis (PCA) of fatty acids and tocopherols gave four significant principal components (PCs, with eigenvalues>1), which together account for 85.49% of the total variance in the data set with PC1 and PC2 contributing 45.27% and 21.33% of the total variability, respectively. Eigen analysis of the correlation matrix loadings of the four significant PCs revealed that PC1 was mainly contributed by palmitic, oleic, linoleic, and gondoic acids, while PC2 was by behenic acid, ${\beta}$-T, and ${\gamma}$-T. The score plot generated by PC1-PC2 identified sample clusters in the two spatial planes based on the oleic and linoleic acids. The score plot PC3-PC4 didn't separate sample groups.
Arthrospira platensis has high lipid and pigment (such as chlorophyll and carotenoid) contents and thus evaluated as an important resource in functional food production. The cell growth rate and pigment concentration of EM24 increased by approximately 1.2-fold than those of the wild-type strain (WT). Fluorescence intensity levels in EM24, which were quantified with a lipid triolein standard curve, also increased by approximately 1.5-fold than those in WT (62.9 mg/Lvs. 38.9 mg/L). The analysis of fatty acid profiles indicated that the gamma-linoleic acid level in EM24 increased by 1.5-fold than that in WT.
Butea monosperma Kuntze, commonly known as 'Palash', is employed in various indigenous systems of medicine against several diseases and almost every part of the plant has diversified medicinal properties. The seeds are used as anthelmintic, aperient, digesti and to treat piles, skin diseases and abdominal troubles. They also have the property of reducing 'Kapha' and 'Vata' (in Ayurveda). In the present paper a detailed pharmacognostical evaluation of seeds has been undertaken. The study includes macro- and micro-scopical details, fluorescence powder study and HPTLC fingerprinting. The seed is characterized by finely ridged seed coat and palisade-like malpighian cells, discontinuous transparent linea lucida in upper half of malpighian layer and simple & oblong hilum. The study also concludes that the seed samples procured from different places have similar morphological and physico-chemical characteristics. These observations are also supported by similar TLC profiles. The estimation of heavy metals (to detect permissible toxic limits), and fatty acid composition have been carried out. An attempt has also been made to see the ecological and edaphic variations, if any.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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