We have a cultured method to grow rat mammary epithelial cells (RMEC) for 1 to 14 days in 1:1 mixture of Dulbecco's Modified Eagle Medium: Nutrient and F-12 (DMEM/F-12) containing 10% fetal bovine serum (FBS), human EGF, insulin, hydrocortisone, human transferrin and $17{\beta}$-estradiol in vitro. We were able to isolate and distinguish two cell types, luminal epithelial cells and myoepithelial cells, from primary clutures of RMEC. Immunocytochemical stains were used to distingusih luminal epithelial cells and myoepithelial cells. Peanut lectin (PNA) was stained in most alveolar epithelail cells and luminal epithelial cells of rats, while Thy-1.1, a maker of potential rat mammary myoepithelial cells, was expressed in myoepithelial cells in the rat. Also, we examined the expression patterns of three types of gap junction proteins, connexin 26 ($C{\times}26$), connexins 32 ($C{\times}32$) and connexin 43 ($C{\times}43$) by immunocytochemistry and western blot analysis. In the cell types, the results show that at the early stage of culture, luminal epithelial cells were increased and these cells were surrounded by myoepithelial cells. At the late stage of culture, luminal epithelial cells were decreased, in contrast myoepithelial cells were increased. In the expression pattern of gap junction, $C{\times}26$ maintained it's expression until day 3, but afterwards gradually decreased in intensity. Expression of $C{\times}32$ remained until day 5, then decreased slightly. $C{\times}43$ gradually increased untill the middle time of culture then decreased in intensity. These results suggest that connexins may be important for the control of growth in rat mammary epithelial cell types.
Background: Several studies indicated that the diagnosis season affects the prognosis of some cancers, such as examples in the prostate, colon and breast. This retrospective study aimed to investigate whether the diagnosis and recurrent season impacts the prognosis of epithelial ovarian cancer patients. Methods: From January 2005 to August 2010, 161 epithelial ovarian cancer patients were analyzed and followed up until August 2013. Kaplan-Meier survival curves and the log-rank test were used to make the survival analysis. Multivariate analysis was conducted to identify independent prognostic factors. Results: The prognostic factors of overall survival in epithelial ovarian cancer patients included age, clinical stage, pathological type, histological grade, residual disease after primary surgery, recurrent season and adjuvant chemotherapy cycles. Moreover, clinical stage, histological grade, residual disease after primary surgery, recurrent season and adjuvant chemotherapy cycles also impacted the progression-free survival of epithelial ovarian cancer patients. The diagnosis season did not have a significantly relationship with the survival of operable epithelial ovarian cancer patients. Median overall survival of patients with recurrent month from April to November was 47 months, which was longer (P < 0.001) than that of patients with recurrence month from December to March (19 months). Median progression-free survival of patients with recurrence month from April to November and December to March was 20 and 8 months, respectively (P < 0.001). Conclusion: The recurrence season impacts the survival of epithelial ovarian cancer patients. However, the diagnosed season does not appear to exert a significant influence.
연구배경: 흉선 상피 종양은 전종격동에 발생하는 가장 흔한 종양으로 비특이적인 증상을 나타내는 경우가 많아 진단 및 치료에 어려움이 있다. 본 연구에서는 부산대학교병원에서 진단된 흉선 상피 종양의 임상적 특징을 알아보고자 하였다. 방 법: 1997년 1월에서 2007년 1월까지 흉선 상피 종양 으로 조직학적 진단을 받은 37명의 환자를 대상으로 임상적, 조직학적 소견을 후향적으로 분석하였다. 조직학적 분류는 WHO 분류법, 임상적 병기는 Masaoka 병기분류법을 기초로 하였다. 대상 환자는 총 37명으로 남자가 23명, 여자가 14명이었고, 평균 연령은 51.3세였다. 결 과: 진단시 무증상인 경우가 7명이었고, 증상이 있는 경우가 30명이었으며, 빈도는 흉통(53%), 호흡곤란(23%), 기침(17%) 순이었다. 5명(17%)에서 중증근무력증이 동반되었다. 진단 당시 병기는 stage I (8%), stage II (28%), stage III (32%), stage IVA (16%), stage IVB (16%)의 순으로, stage III 이상인 경우가 64%를 차지하였다. 조직학적 분류의 빈도는 type B1 (32%), C (23%), B3 (20%), B2 (16%), AB (6%), A (3%) 순이었다. 치료를 받은 31명의 환자 중 24명의 환자가 흉선절제술을 시행받았으며, 5명은 항암화학요법 단독치료, 2명은 항암화학요법과 방사선치료를 병행하였다. 흉선절제술을 시행한 24명의 환자 중 4명에서 흉선 상피 종양이 재발하였으며, stage III 및 type B3인 경우가 많았다. 또한 추적관찰 기간 동안 5명의 환자가 사망하였으며, stage IV 및 type B3, C인 경우가 많았다. 결 론: 흉선 상피 종양은 진단시 stage III 이상 또는 조직학적 분류상 type B, C가 많았고 이러한 경우 재발 및 전이의 위험이 높아 불량한 예후와 연관이 있는 것으로 생각된다.
The present study was performed to identify changes of plasminogen activator (PA) and plasminogen activator inhibitor (PAI) in porcine oviduct epithelial cells (POECs) during the estrous cycle. POECs obtained from ovary in pre-ovulatory (Pre-Ov), early to mid-luteal stage (Early-mid L) and post-ovulatory stage (Post-Ov). For the examine of PA activity, $1{\times}10^5$ fresh cells of POECs were cultured in DMEM/Ham F-12 containing 10% FBS and 0.2% amphotericin under humidified atmosphere of 5% $CO_2$ in air and $38^{\circ}C$. The urokinase-type PA (uPA) was observed at 7 days of POECs culture. PA activity was measured with culture prolonged of 0, 3, 6, 12 and 24 h after culture of 7 days. The PA activity were high significantly (p<0.05) at 12 h of culture, but PA activity were decreased with culture periods increased. The PA activity in POECs of Post-Ov stage were higher significantly (p<0.05) than that of Early-mid L and Pre-Ov stage. When PAI-1 and PAI-2 were added during the POECs culture, the PA were observed significant low activity (p<0.05). The PA activity and protein expression were decreased by PA inhibitor. This results suggest that PAI-1 and PAI-2 have a suppressive action on change of PA activity during the estrous cycle of pigs. Specifically, this study using PA inhibitor was effect the PA activity and PAI expression in oviduct epithelial cells in pigs.
Recent investigations have confirmed up-regulation of serum miR-21 and its diagnostic and prognostic value in several human malignancies. In this study, we examined serum miR-21 levels in epithelial ovarian cancer (EOC) patients, and explored its association with clinicopathological factors and prognosis. The results showed significantly higher serum miR-21 levels in EOC patients than in healthy controls. In addition, increased serum miR-21 expression was correlated with advanced FIGO stage, high tumor grade, and shortened overall survival. These findings indicate that serum miR-21 may serve as a novel diagnostic and prognostic marker, and be used as a therapeutic target for the treatment of EOC.
한국 서해안에서 채집한 돌가자미 Kareius bicoloatus의 정자형성과정 중 생식세포, Cyst 상피세포 및 간질세포들의 미세구조를 전자현미경 관찰에 의해 조사하였다. 제1차 정모세포에서 연접사복합체(synaptonemal complex)들이 성숙분열 중 전기의 쌍사기에 출현하였다. 특히, 감수분열을 위한 테스토스테론 호르몬을 분비하는 세포로 알려진 간질세포(Leydig cell)들은 제1차 정모세포 및 정세포 가까이에서 뚜렷하게 출현하였다. 포상핵을 가지는 이들 간질세포들은 소엽 간 간질조직 내의 섬유모세포들에 의해 둘러싸여 출현하였다. 특히, 이들 세포들은 타원형 또는 구상의 미토콘드리아들을 가지는데, 미토콘드리아들은 관상 크리스테(cristae)를 갖는 것이 특징이다. 또한, 활면소포체와 여러 개의 공포들도 세포질 내에서 출현하였다. 성장 발달 중인 정소 내에서 정소소엽 간 간질조직에서 나타나는 잘 발달된 간질세포들(스테로이드호르몬분비세포)은 포상의 핵과 관상 크리스테를 갖는 미토콘드리아를 가지며, 활면소체를 갖는 형태적 특징을 보였다. 정자형성과정 중, 제1차, 제2차 정모세포들은 cyst 상피세포 (Sertoli cell)들에 인접하거나 부착하여 나타났다. cyst 상피세포들의 핵은 길게 신장된 타원형 또는 삼각형의 핵을 가지며 세포질 내에 여러 개의 미토콘드리아가 출현하였다. 성장 발달 중인 정소 내에서 제2차 정모세포들과 정세포 가까이에 위치한 cyst 상피세포의 세포질 내에는 지방적, 미토콘드리아 로제트(mitochondeial rosettes)들과 글리코겐 입자들이 나타났다. 특히, 후기 성장 중인 정소 내에서 cyst 상피세포의 세포질 내에는 미토콘드리아, 소포체, 작은 지방적 및 다량의 글리코겐입자들이 출현하였다. 정세포 발달(정자변태) 후기에 기부중심립이 핵막에 부착하며, 원위중심립은 편모의 기저체를 형성하고, 편모축사를 형성하였다. 정자 첨체는 다른 경골어류에서와 같이 첨체를 형성하지 않았다. 정자 두부의 길이는 대략 $3{\mu}m$ 정도이며, 미부길이는 약 $30{\mu}m$ 정도이다. 정자 미부편모의 축사(axoneme)는 주변에 9쌍의 주변이중미세관 (nine outer doublet microtubule)이 있고 중앙에 두 개의 중앙미세관(two centrial singlet microtubules)으로 구성되어 9+2구조를 나타내었다. 본 종의 정자는 체외수정 종들이 갖는 두 개의 axonemal lateral fin을 가진다. 본 연구에서 여러 단계의 생식세포들 가까이에서 출현하는 cyst 상피세포(Sertoli cell)들은 영양공급, 식세포작용, 스테로이드형성의 3가지 기능을 나타내었다. 특히, 정소 발달단계 중 퇴화 회복기에 출현하는 cyst 상피세포들의 핵은 배정 후에는 모양이 불규칙하게 나타나며, 식세포작용을 나타내는 여러 특징들이 cyst 상피세포의 세포질 내에서 나타나고 있어, cyst 상피세포들은 배정 후 방출되지 않은 생식세포들의 퇴화 흡수에 관여하는 것으로 추정된다.
Voltage-gated $K^+$ (Kv) channels are widely expressed in the plasma membranes of numerous cells such as epithelial cells. Recently, it has been demonstrated that Kv channels are associated with the proliferation of several types of cancer cells. Specifically, Kv1.3 seems to be involved in cancer cell proliferation and apoptosis. In the present study, we examined the expression of Kv1.3 in immortalized and tumorigenic human mammary epithelial cells. We also evaluated the expression level of Kv1.3 in each stage of breast cancer using mRNA isolated from breast cancer patients. In addition, treatment with tetraethylammonium, a Kv channel blocker, suppressed tumorigenic human mammary epithelial cell proliferation. Therefore, Kv1.3 may serve as a novel molecular target for breast cancer therapy while its stage-specific expression pattern may provide a potential diagnostic marker for breast cancer development.
배경: 원발성 흉선상피세포종(primary thymic epithelial neoplasm)은 다양한 생물학적 및 형태학적인 특성을 가진 종격동 종양이다. 이 연구에서는 59예의 흉선종 환자를 새로운 WHO분류에 따라 재분류하고, Masaoka 임상적 병기를 비롯한 여러 가지 임상적인 특성을 분석함으로써 예후에 영향을 미치는 인자를 알아보고 WHO 분류가 독립적인 예후인자가 될 수 있는지를 알아보고자 했다. 대상 및 방법: 1986년 12월부터 2003년 8월까지 계명대학교 동산의료원에서 흉선종으로 진단 받은 후 수술적 치료를 받은 59예를 대상으로 생존율에 영향을 미치는 예후인자를 흉선종의 조직학적 분류(WHO classification)와 임상적 병기(Masaoka's clinical stage) 및 환자의 특성(성별, 나이, 중증근무력증 유무, 종괴의 크기, 종괴의 침습 유무, 재발, 전이)에 따라 분석하였다. 그리고 조직학적 분류와 임상적 병기사이의 연관성을 분석하였다. 결과: 남자는 32예, 여자는 27예였으며 평균연령은 50.1$\pm$14.2세였다. 모든 흉선종은 WHO 분류에 따라 A부터 C까지 재분류하였다. WHO 분류에 따라 Type A는 6명(10.2%)이었고 AB는 7명(11.9%), B$_1$은 7명(11.9%), B$_2$는 10명(16.9%), B$_3$는 7명(11.9%), C는 22명(37.3%)으로 나타났다. 여러 가지 임상적 특성 가운데 다변수 분석을 통해 완전절제(p=0.033)와 주변조직으로의 저침습성(p=0.001)이 좋은 예후와 연관이 있는 것으로 나타났다. 전체 흉선종의 5년 생존율은 53%였으며 WHO 분류에 따른 5년 생존율은 Type A+AB가 92.3%, B$_1$+B$_2$가 70.2%, B$_3$+C가 26.1%로 나타났다. WHO 조직학적 분류와 생존율 사이의 상관관계분석에서 WHO 조직학적 분류는 예후와 통제적으로 유의하게 연관성이 있는 것으로 나타났다(p<0.001). WHO 분류에 따른 Masaoka 임상병기 분석에서도 두 변수가 통계적으로 유의하게 연관성을 가지는 것으로 나타났다(p<0.001). 결론: WHO 분류는 단순한 조직학적인 분류일 뿐만 아니라 흉선종의 생존율에 중요한 영향을 미치며 종양의 침습성을 잘 반영하는 예후인자임을 알 수 있었다.
The present study was carried out to examine the effect of oviduct epithelium and its conditioned medium on e development of early bovine embryos in vitro. Oocytes obtained from ovarian follicles of slaughtered cows were cultured in TCM199 with 10% fetal calf serum for 22-24hrs and then fertillzed in vitro using frozen-thawed semen treated with BO-caffein, BO-BSA(20mM heparin added). Oviduct epithelium was collected in each stage of the estrus cycle and conditioned medium was the medium in which oviduct epithelium in early luteal stage was cultured. In vitro fertilized bovine embryos of 1~2 cell were co-cultured with oviduct epithelium from different estrus cycles, cultured in conditioned medium, and cultured in rabbit oviduct. The cleavage rates of in vitro fertilized early bovine embryos co-cultured with oviduct epithelial cell from early luteal, luteal and follicular phase of estrus cycle(67.2~70.8%) and cultured in conditioned medium(56.7%) were significantly(p<0.05) higher than that of the control(44.2%) The rate of development to morula or blastocyst stage in oviduct epithelial cell co-culture(15.3~32.5%) from three phase of estrus cycles and conditioned medium(14.5%) were significantly(p<0.05) higher than that of the control(5.2%). The oviduct epithelial cell from early luteal phase gave a significantly( p<0.05) higher rate of development to morula or blastocyst stage than both luteal and follicular phase. The results of in vivo culture in rabbit oviduct of early bovine embryos were 52.1% for the cleavage rate and 26.7% for the rate of development to morula or blastocyst stage.
Dry age-related macular degeneration (AMD) is a type of progressive blindness that is primarily due to dysfunction and the loss of retinal pigment epithelium (RPE). The accumulation of N-retinylidene-N-retinylethanolamine (A2E), a by-product of the visual cycle, causes RPE and photoreceptor degeneration that impairs vision. Genes associated with dry AMD have been identified using a blue light model of A2E accumulation in the retinal pigment epithelium and transcriptomic studies of retinal tissue from patients with AMD. However, dry macular degeneration progresses slowly, and current approaches cannot reveal changes in gene transcription according to stages of AMD progression. Thus, they are limited in terms of identifying genes responsible for pathogenesis. Here, we created a model of long-term exposure to identify temporally-dependent changes in gene expression induced in human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19) exposed to blue light and a non-cytotoxic dose of A2E for 120 days. We identified stage-specific genes at 40, 100, and 120 days, respectively. The expression of genes corresponding to epithelial-mesenchymal transition (EMT) during the early stage, glycolysis and angiogenesis during the middle stage, and apoptosis and inflammation pathways during the late stage was significantly altered by A2E and blue light. Changes in the expression of genes at the late stages of the EMT were similar to those found in human eyes with late-stage AMD. Our results provide further insight into the pathogenesis of dry AMD induced by blue light and a novel model in vitro with which relevant genes can be identified in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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