The hyphal tip laccase of Coprinus congregatus which is a membrane-associated enzyme and shows diffdrdnt banding patterns of PAGE analysis when compared with the enzyme of liquid culture (Choi et al. 1987) has been successfully secreted to culture medium in liquid shake culture by lowering the pH of medium to 4.0. When the fungus is cultivated in YpSs(pH 4.0) liquid, only the hyphal tip laccase is found in the medium after 6 hr incubation and there is no liquid-type enzyme when examined by PAGE analysis.
The cultivtion efficiencies of enzyme treated nightsoil liquid manure were investigated. As a result of applying the liquid manure prepared by the nightsoil digestion due to aerobic or anoxic conditions with enzyme treatement to cultivate greenstuffs as compared with the controls (conventional cultivation) due to application of none enzyme treated fertilizer, the yield was markedly increased. In the cases of kidney bean, seedleaves were increased over 2~4 times and stem growth and diameter was increased 40% as compared the controls. Finally, cultivation yield of liquid manure prepared by the nightsoil aerobic or anoxic digestion with enzyme treatment were more increased as compared with the controls.
This study was attempted to simplify the complex steeping mechanism and propose the scientific approach of microorganism. As Enzyme activity showed that as steeping hours increase, the а-amylase activity increased. Most commonly microorganisms in steeping liquid were Corynebacter spp., Candida spp. and Lactobacillus spp. According to results, steeping acidifies the character of glutinous rice, affec-ting the starch's n-amylase and bring about component's changes. As Candide spp. and Lactobaillus spp. of the steeping liquid increase, the character of liquid is acidifying.
This study was carried out to develop an effective liquid-phase double antibody enzyme immunoassay for determining of progesterone. The optimum conditions of assay system, 1st and 2nd antibodies, enzyme conjugate, and time reaction were invested. The bovine plasma progesterone level in dairy cattle and korean native bulls were also analyzed. The results obtained were as follows; 1. The reproducibility of petroleum ether was superior to that of ethyl ether as extract solvent of progesterone in plasma. 2. The optimum dilution rate of 1st and 2nd antibody was 30,000 and 10 times, respectively. Affer the reaction of enzyme conjugate to progesterone 1st antibody, and then 2nd antibody competition reaction was enough for over 1hr. 3. Average plasma progesterone level in 4 pregnant and 9 nonpregnant Holstein was $2.5{\pm}0.5$ and $0.7{\pm}0.2ng/m{\ell}$, respectively. Average plasma progesterone level of 10 Korean native bulls was $0.1{\pm}0.001ng/m{\ell}$ From these results, by using liquid phase double antibody enzyme immunoassay for progesterone is applicable to detect of early pregnancy diagnosis, factorial analysis of reproductive disorder, and also reproductive physiological function such as monitoring of cyclicity during the post-partum period.
From the outer membrane portion of Gram-negative Klebsiella pneumoniae, the activity of 2-furaldehyde dehydrogenase depending upon beta-nicotinamide adenine dinucleotide was detected. Cytoplasmic membrane was preferentially extracted from crude membrane with $Mg^{2+}$ and Triton X-100, and then outer membrane was collected by ultracentrifugation. The crude enzyme was obtained by solubilization of outer membrane with lysozyme, ethylene diamine tetraacetate and Triton X-100. Thereafter 2-furaldehyde dehydrogenase was partially purified through column chromatography on QAE-Sephadex Q-50 and Sephadex G-150 and the enzyme activity was analyzed by means of high performance liquid chromatography. The optimal pH for the activity of the enzyme was about 9.5 and the optimal temperature was about $85^{\circ}C$. The partially purified enzyme retained tis activity at $85^{\circ}C$ for 5 hours. The optimal concentration of Triton X-100 for the activity of the enzyme was about 1.5% in the reaction mixture.
This experiment was carried out to determine the progesterone concentration of bovine plasma by liquid phase double antibody enzyme immunoassay. The optimum conditions of assay-system, double (first and second) antibody and carrier (normal rabbit serum) were investigated. The optimum dilution rate of first antibody, second antibody and normal rabbit serum was $10{\times}10^3$ to $15{\times}10^3$, 20 and $1{\times}10^3$ times, respectively.
본 연구는 효소복합체 처리가 양돈분뇨의 액비화 과정의 악취제어 가능성을 조사하기 위하여 액비저장 탱크에 4주간 저장하면서 효소복합체 처리, 폭기 처리, 효소와 폭기 동시 처리 및 대조구로 나누어 비교하였다. 또한 효소복합체를 돈사에 살포하여 돈사내 공기의 질과 양돈장 부지경계선에서의 복합악취농도를 조사하였는데, 그 결과를 요약하면 다음과 같다. 효소복합체와 폭기 처리는 양돈분뇨의 액비화 과정의 암모니아와 황화수소 농도에 영향을 미치는 것으로 조사되었으며, 암모니아와 황화수소 농도는 4주간의 액비화 과정 동안 지속적으로 감소되었다. 효소복합체의 일정 수준 처리는 양돈분뇨 액비화 과정의 악취저감을 위한 효율적인 수단이 될 수 있을 것으로 판단된다. 효소복합체와 폭기 처리는 양돈분뇨의 액비화 과정의 총질소, 총인 및 암모니아성 질소 농도에 영향을 미치는 것으로 조사되었으며, 효소복합체 처리는 양돈분뇨 액비의 품질 유지와 악취저감을 위한 하나의 기술적 대안으로 충분한 것으로 보인다. 효소복합체 살포는 돈사내 공기의 질을 개선하고 양돈장의 부지경계선에서의 복합악취 저감에도 효과적으로 작용하는 것으로 나타났다. 이상의 결과를 요약하면, 효소복합체 처리는 양돈분뇨 액비화 과정의 악취제어와 고품질 액비제조 가능성이 인정되며, 돈사 내부 및 양돈장 환경개선과 악취저감 효과가 있는 것으로 판단된다.
고역가 액체종국 제조 및 배양기술을 개발하기 위해, Aspergillus 속의 곰팡이(A. oryzae, A. niger)를 이용한 밀기울 첨가율 별(0, 5, 10, 15 및 20%) 배지를 이용한 액체종국을 제조하여 이들의 품질 특성을 조사하였다. 액체종국의 일반성분 및 효소활성(glucoamylase, acidic protease)을 조사한 결과, 배지에 밀기울 첨가량이 많을수록 균사체량이 많아졌을 뿐만 아니라 산도, 아미노산도도 증가하는 것을 알 수 있었고 액체종국에 첨가하는 밀기울 농도가 달라짐에 따라 각 균주의 효소활성이 바뀌는 것을 알 수 있었다. 또한, 효소활성에 따른 최적 배양시간은 곰팡이 종류에 따라 차이가 있었고 A. oryzae와 A. niger 곰팡이의 액체종국 배양은 10~15% 밀기울을 첨가하여 48~72시간 배양하는 최적조건을 규명하였다. 기존에 사용되었던 고체종국과 비교하여 밀입국제조에 종국으로써 적합한지를 구명하고자 A. oryzae와 A. niger를 사용한 고체종국을 접종한 밀누룩을 대조구로 하여 밀기울 10% 액체배지로 만든 액체종국의 접종량 별(1, 3, 5, 10%) 밀누룩의 배양시간 별(0, 15, 20, 36, 38, 40 hrs) 및 이화학적 특성과 효소활성(${\alpha}$-amylase, glucoamylase, acidic protease)변화를 비교하였다. 결론적으로 시간과 인력등의 경제적 가치가 많이 투입되는 고체종국 보다는 누룩 제조시 액체종국을 사용하는 것이 여러 가지 측면에서도 유리 하다고 여겨진다.
Bacillus strains capable of producing fibrinolytic enzyme were isolated from traditional fermented Korean soybean paste and Japanese fermented soybean (Natto). Among the 16 strains, a selected Bacillus sp. was identified as bacillus firmus, with 80.7% homology, by API kit analysis. Seed starter or B. firmus NA-1 was prepared with 5% soymilk prepared from micronized soybean powder. To produce fibrinolytic enzyme by B. firmus NA-1 the liquid culture was performed with NB broth (pH 7.0) fortified with 1% galactose, 0.1% tryptone, and 0.5% $K_2$HPO$_4$, by shaking with 180 rpm at 37$^{\circ}C$. Fibrinolytic enzyme activity reached the highest value at 7.8 unit/mL (plasmin unit) after fermentation for 72 hr. The crude fibrinolytic enzyme showed higher relative activity in the range of pH 7.0∼9.0. The activity of crude fibrinolytic enzyme was well maintained even after concentration by the vacuum evaporation at 5$0^{\circ}C$ for 1 hr.
Five types of agricultural wastes were used for the production of xylanolytic enzyme by Aspergillus flavus K-03. All wastes materials supported high levels of xylanase and ${\beta}-xylosidase$ production. A high level of proteolytic activity was observed in barley and rice bran cultures, while only a weak proteolytic activity was detected in corn cob, barley and rice straw cultures. Maximum production of xylanase was achieved in basal liquid medium containing rice barn as carbon source for 5 days of culture at pH 6.5 and $25^{\circ}C$. The xylanolytic enzyme of A. flavus K-03 showed low thermostability. The times required for 50% reduction of the initial enzyme activity were 90 min at $40^{\circ}C$, 13 min at $50^{\circ}C$, and 3 min at $60^{\circ}C$. Xylanolytic activity showed the highest level at pH $5.5{\sim}10.5$ and more than 70% of the original activity was retained at pH 6.5 and 7.0. The higher stability of xylanolytic enzymes in the broad range of alkaline pH is useful for utilization of the enzymes in industrial process requiring in alkaline conditions. Moreover, the highest production of xylanolytic enzyme was obtained when 0.5% of rice bran was supplied in basal liquid medium. SDS-PAGE analysis revealed a single xylanase band of approximately 28.5 kDa from the culture filtrates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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